Name: בידוד של תאי סטרומה מזנכימלייםשמקורםבחבל הטבור גבוה BAMBI גבוה MFGE8 (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-10T14:20:00.000+00:00
Duration: 6 min 5 s
Description: למדו לבודד תאי UC-MSC מחבל הטבור עם ביטוי גבוה של BAMBI ו-MFGE8 באמצעות מיון זרימה. שיטה זו מאפשרת לחקור את ההטרוגניות של תאי גזע ולייעל טיפולים בנפריטיס זאבתית.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>ניתוח פונקציונלי של תת-אוכלוסיותBAMBI גבוהותMFGE8UC-MSC גבוהות

<ol><li>Liechty, K. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+mesenchymal+stem+cells+engraft+and+demonstrate+site-specific+differentiation+after+in+utero+transplantation+in+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Human mesenchymal stem cells engraft and demonstrate site-specific differentiation after in utero transplantation in sheep.</a> Nat Med. 6 (11), 1282-1286 (2000).</li>
<li>Zhou, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Challenges+and+advances+in+clinical+applications+of+mesenchymal+stromal+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hematol+Oncol%22%5BJournal%5D)">Challenges and advances in clinical applications of mesenchymal stromal cells.</a> J Hematol Oncol. 14 (1), 24(2021).</li>
<li>Xie, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tnf-alpha-mediated+m%286%29a+modification+of+elmo1+triggers+directional+migration+of+mesenchymal+stem+cell+in+ankylosing+spondylitis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Tnf-alpha-mediated m(6)a modification of elmo1 triggers directional migration of mesenchymal stem cell in ankylosing spondylitis.</a> Nat Commun. 12 (1), 5373(2021).</li>
<li>Mcguire, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cell-derived+interleukin-28+drives+the+selection+of+apoptosis+resistant+bone+metastatic+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cell-derived interleukin-28 drives the selection of apoptosis resistant bone metastatic prostate cancer.</a> Nat Commun. 12 (1), 723(2021).</li>
<li>Yuan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cell+therapy+induces+flt3l+and+cd1c%28%2B%29+dendritic+cells+in+systemic+lupus+erythematosus+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cell therapy induces flt3l and cd1c(+) dendritic cells in systemic lupus erythematosus patients.</a> Nat Commun. 10 (1), 2498(2019).</li>
<li>Wang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Umbilical+cord+mesenchymal+stem+cell+transplantation+in+active+and+refractory+systemic+lupus+erythematosus%3A+A+multicenter+clinical+study%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Umbilical cord mesenchymal stem cell transplantation in active and refractory systemic lupus erythematosus: A multicenter clinical study.</a> Arthritis Res Ther. 16 (2), R79(2014).</li>
<li>Ortiz, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cell+engraftment+in+lung+is+enhanced+in+response+to+bleomycin+exposure+and+ameliorates+its+fibrotic+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cell engraftment in lung is enhanced in response to bleomycin exposure and ameliorates its fibrotic effects.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 100 (14), 8407-8411 (2003).</li>
<li>Phinney, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+heterogeneity+of+mesenchymal+stem+cells%3A+Implications+for+cell+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biochem%22%5BJournal%5D)">Functional heterogeneity of mesenchymal stem cells: Implications for cell therapy.</a> J Cell Biochem. 113 (9), 2806-2812 (2012).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+transcriptome+atlas+of+human+mesenchymal+stem+cells+exploring+cellular+heterogeneity%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Single-cell transcriptome atlas of human mesenchymal stem cells exploring cellular heterogeneity.</a> Clin Transl Med. 11 (12), e650(2021).</li>
<li>Chen, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+and+spatial+transcriptomics+decodes+wharton%27s+jelly-derived+mesenchymal+stem+cells+heterogeneity+and+a+subpopulation+with+wound+repair+signatures%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Sci+%28Weinh%29%22%5BJournal%5D)">Single-cell and spatial transcriptomics decodes wharton's jelly-derived mesenchymal stem cells heterogeneity and a subpopulation with wound repair signatures.</a> Adv Sci (Weinh). 10 (4), e2204786(2023).</li>
<li>Chen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissecting+heterogeneity+reveals+a+unique+bambi%28high%29+mfge8%28high%29+subpopulation+of+human+uc-mscs%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Sci+%28Weinh%29%22%5BJournal%5D)">Dissecting heterogeneity reveals a unique bambi(high) mfge8(high) subpopulation of human uc-mscs.</a> Adv Sci (Weinh). 10 (1), e2202510(2022).</li>
<li>Tsuji, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+different+cell-detaching+methods+on+the+viability+and+cell+surface+antigen+expression+of+synovial+mesenchymal+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">Effects of different cell-detaching methods on the viability and cell surface antigen expression of synovial mesenchymal stem cells.</a> Cell Transplant. 26 (6), 1089-1102 (2017).</li>
<li>Lai, T. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Different+methods+of+detaching+adherent+cells+and+their+effects+on+the+cell+surface+expression+of+fas+receptor+and+fas+ligand%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Different methods of detaching adherent cells and their effects on the cell surface expression of fas receptor and fas ligand.</a> Sci Rep. 12 (1), 5713(2022).</li>
<li>Avinash, K., Malaippan, S., Dooraiswamy, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+of+isolation+and+characterization+of+stem+cells+from+different+regions+of+oral+cavity+using+markers%3A+A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Methods of isolation and characterization of stem cells from different regions of oral cavity using markers: A systematic review.</a> Int J Stem Cells. 10 (1), 12-20 (2017).</li>
<li>Galvao, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rock+inhibition+drives+resolution+of+acute+inflammation+by+enhancing+neutrophil+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Rock inhibition drives resolution of acute inflammation by enhancing neutrophil apoptosis.</a> Cells. 8 (9), 964(2019).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>צינור מיקרוצנטריפוגה 0.6 מ"ל</td><td>קורנינג&nbsp;</td><td>Axygen MCT-060-A</td><td></td></tr><tr><td>1.5 מ"ל צינורות מיקרוצנטריפוגה</td><td>בייג'ינג Labgic Technology</td><td>MCT-001-150</td><td></td></tr><tr><td>צלחת תרבית תאים 100 מ"מ&nbsp;</td><td>בייג'ינג Labgic טכנולוגיה</td><td>12311</td><td></td></tr><tr><td>12 באר צלחת</td><td>בייג'ינג Labgic טכנולוגיה</td><td>11210</td><td></td></tr><tr><td>15 מ"ל צינור צנטריפוגה</td><td>נאנג'ינג Vazyme חומר טכנולוגיה</td><td>TCF00115</td><td></td></tr><tr><td>24 באר צלחת</td><td>בייג'ינג Labgic טכנולוגיה</td><td>11310</td><td></td></tr><tr><td>50 מ"ל צינור צנטריפוגה</td><td>נאנג'ינג Vazyme חומר טכנולוגיה</td><td>TCF00150</td><td></td></tr><tr><td>5 מ"ל צינורות תחתונים עגולים</td><td>קורנינג</td><td>FALCON 352003</td><td></td></tr><tr><td>70 &mu; מסננת תאים m</td><td>Falcon</td><td>352350</td><td>דילול: 1:1000</td></tr><tr><td>APC אנטי אנושי CD79a (Ig&alpha;) נוגדן</td><td>BioLegend</td><td>333505</td><td>581 דילול: 1:200</td></tr><tr><td>APC/Cyanine7 אנטי-אנושי נוגדן CD73 (Ecto-5'-nucleotidase)</td><td>BioLegend</td><td>344022</td><td>G46-6 דילול: 1:200</td></tr><tr><td>APC-Cy7 Mouse IgG1, &kappa; בקרת איזוטיפ</td><td>BD Bioscience</td><td>557873</td><td>MOPC-31C (בקרת איזוטיפ) דילול: 1:200</td></tr><tr><td>נוגדן BAMBI</td><td>Bioss</td><td>bs-12418R</td><td></td></tr><tr><td>Brilliant Violet 510 נוגדן CD44 נגד עכברים/אנושי</td><td>BioLegend</td><td>103044</td><td>5E10 דילול: 1:200</td></tr><tr><td>Brilliant Violet 510 Rat IgG2b, &kappa; איזוטיפ Ctrl נוגדן</td><td>BioLegend</td><td>400646</td><td>MOPC-21 (בקרת איזוטיפ) דילול: 1:200</td></tr><tr><td>CD105 (אנדוגלין) נוגדן חד שבטי&nbsp; APC</td><td>eBioscience</td><td>17-1057-42</td><td>HM47 דילול: 1:200</td></tr><tr><td>שקופיות תא ספירת תאים</td><td>שנחאי QIUJING</td><td>XB-K-25</td><td></td></tr><tr><td>צנטריפוגה</td><td>בייג'ינג BAIYANG</td><td>BY-320C</td><td></td></tr><tr><td>ChamQ אוניברסלי SYBR qPCR מאסטר מיקס</td><td>Vazyme</td><td>Q711-02</td><td></td></tr><tr><td>כלורופורם</td><td>XILONG 13700908</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מדעי DMEM/F-12 (1:1) בסיסי (1x)</td><td>Gibco</td><td>C11330500BT</td><td></td></tr><tr><td>EDTA (0.5 מ'), pH 8.0,</td> דילול <td>AM9260G Invitrogen</td><td></td> נטול Rnase<td>: 1:1000</td></tr><tr><td>אתנול&nbsp; &nbsp;</td><td>XILONG Scientific</td><td>12803405</td><td></td></tr><tr><td>סרום בקר עוברי (FBS)</td><td>Gibco</td><td>10099-141C&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>FITC עכבר אנטי אנושי CD34</td><td>BD Bioscience</td><td>555821</td><td>IM7 דילול: 1:200</td></tr><tr><td>FITC עכבר אנטי אנושי CD45</td><td>BD Bioscience</td><td>555482</td><td>AD2 דילול: 1:200</td></tr><tr><td>עכבר FITC אנטי אנושי HLA-DR</td><td>BD Bioscience</td><td>555811</td><td>SN6 דילול: 1:200</td></tr><tr><td>זרימה ציטומטר</td><td>BD Bioscience</td><td>FACSAria&trade; III Cell SorterAria</td><td></td></tr><tr><td>Flowjo</td><td>BD Bioscience</td><td>V10</td><td></td></tr><tr><td>מגיב דיסוציאציה עדין של תאים</td><td>STEMCELL Technologies</td><td>100-0485</td><td></td></tr><tr><td>עיזים נגד עכבר IgG H& L (Alexa Fluor 488)</td><td>abcam</td><td>ab150113</td><td>HI30 דילול: 1:200</td></tr><tr><td>עז נגד ארנב IgG H& L (AlexaFluor 594)</td><td>abcam</td><td>ab150080</td><td>דילול: 1:1000</td></tr><tr><td>HiScript II Q RT SuperMix עבור qPCR (+מגב gDNA)</td><td>Vazyme</td><td>R223-01</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופים הפוכים</td><td>Nikon</td><td>ECLIPSE Ts2</td><td></td></tr><tr><td>איזופרופיל אלכוהול</td><td>XILONG Scientific</td><td>12802505</td><td></td></tr><tr><td>MFGE8 נוגדן</td><td>Biorbyt</td><td>orb388429</td><td>דילול: 1:100</td></tr><tr><td>מיקרוצנטריפוגה</td><td>תרמו פישר מדעי</td><td>FRESCO 21</td><td></td></tr><tr><td>עכבר IgG1 kappa בקרת איזוטיפ APC</td><td>eBioscience</td><td>17-4714-42</td><td>P3.6.2.8.1 (בקרת איזוטיפ) דילול: 1:200</td></tr><tr><td>עכבר IgG1 kappa בקרת איזוטיפ FITC</td><td>eBioscience</td><td>11-4714-42</td><td>eBMG2b (בקרת איזוטיפ) דילול: 1:200</td></tr><tr><td>עכבר IgG2b kappa בקרת איזוטיפ FITC</td><td>eBioscience</td><td>11-4732-42</td><td>RTK4530 (בקרת איזוטיפ) דילול: 1:200</td></tr><tr><td>PBS (פי 10)</td><td>סנגון ביוטק (שנחאי)</td><td>E607016-0500</td><td></td></tr><tr><td>PE-CY5 עכבר אנטי אנושי CD90&nbsp;</td><td>BD Bioscience</td><td>555597</td><td>P3.6.2.8.1 (בקרת איזוטיפ) דילול: 1:200</td></tr><tr><td>PE-Cy5 עכבר IgG1 &kappa; בקרת איזוטיפ</td><td>BD Bioscience</td><td>550618</td><td></td></tr><tr><td>פניצילין-סטרפטומיצין 100x</td><td>Cytiva</td><td></td><td>SV30010 דילול: 1:100</td></tr><tr><td>מערכת PCR בזמן אמת</td><td>יישומי ביו-מערכות על ידי Thermo Fisher Scientific</td><td>Q6</td><td></td></tr><tr><td>מים ללא RNase</td><td>QIAGEN</td><td>129112</td><td></td></tr><tr><td>ספקטרופוטומטר</td><td>תרמו פישר Scientific</td><td>NanoDrop One(840-317400)</td><td></td></tr><tr><td>קצות מיקרופיפטה סטריליים</td><td>בייג'ינג Labgic טכנולוגיה</td><td></td><td>דילול: 1:100</td></tr><tr><td>T75 בקבוק תרבית תאים</td><td>בייג'ינג Labgic Technology</td><td>13212A</td><td></td></tr><tr><td>Thermal Cycler</td><td>Applied Biosystems by Thermo Fisher Scientific</td><td>Veriti</td><td></td></tr><tr><td>Tri Reagent</td><td>Sigma Aldrich</td><td>T9424</td><td></td></tr><tr><td>Typsin-EDTA Solution</td><td>ביו-ערוץ ביוטכנולוגיה</td><td>BC-CE-005</td><td></td></tr><tr><td>מעטפת מים CO2&nbsp; חממת</td><td>תרמו פישר סיינטיפיק</td><td>3111</td><td></td></tr></tbody></table>

בידוד של תאי סטרומה מזנכימלייםשמקורםבחבל הטבור גבוה bambi גבוה mfge8

Isolation of Human BAMBIhighMFGE8high Umbilical Cord-Derived Mesenchymal Stromal Cells

איור 1 מציג את פרופילי ביטוי סמני פני התא של UC-MSCs אנושיים. MSCs מתורבתים היו חיוביים מאוד לביטוי CD44, CD73, CD90 ו-CD105 ושליליים לביטוי CD14, CD34, CD45, CD79 ו-HLA-DR. ה-MSCsהגבוהיםשל BAMBI MFGE8 מוינו מ-UC-MSCs אנושיים מתורבתים, וביטוי ה-BAMBI וה-MFGE8 שלהם נותח מחדש על ידי ציטומטריית זרימה לאחר הרחבה במשך 3-4 מעברים (איור 2). בתהליך זה, השכיחותשל MSCs גבוהיםMFGE8 גבוהים של BAMBI השתנתה בהתאם לתורם ולשיטת הדיסוצ...

בידוד של תאי סטרומה מזנכימלייםשמקורםבחבל הטבור גבוה BAMBI גבוה MFGE8

Umbilical cord-derived mesenchymal stromal/stem cells (UC-MSCs) present low immunogenicity and potent immunomodulatory effects for treating various ...

isolation-human-bambihighmfge8high-umbilical-cord-derived-mesenchymal

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

פרוטוקול זה מתאר את הבידוד והרחבת הבאות של תאים סטרומה mesenchymal ותאי האנדותל המושבה להרכיב ללא שימוש בבעלי חיים בסרום ליצור זוגות עצמיים למטרות השתלה ניסיונית.

בידוד בעלי חיים הרחבת חינם סרום של טבורי האדם נגזר תאים סטרומה mesenchymal (MSCs) ו האנדותל יצירת המושבה ובתאים (ECFCs)

לתאי גזע מזנכימליים (MSCs) יש פוטנציאל התמיינות לקראת שושלת אוסטאובלסטית כאשר הם מגורים עם גורמים מסיסים או ביו-חומרים ספציפיים. עבודה זו מציגה אפשרות חדשה להעברת MSCs מקרום מי השפיר האנושי (AM-hMSCs) המעסיק את מטריצת עצם הבקר Nukbone (NKB) כפיגום.

בידוד של תאי גזע mesenchymal האדם והטיפוח שלהם על עצם מטריקס הנקבובי

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לנתיחה של חבל טבור האנושי (UC) ו מדגם שליה העובר לתוך חוט קרונית (CL), ג'ל וורטון (WJ), צומת חבל-שליה (CPJ), ואת השליה עוברת (FP) עבור הבידוד ואפיון של תאי סטרומה mesenchymal (MSCs) באמצעות טכניקת תרבות explant.

בידוד ואפיון של תאי סטרומה mesenchymal מן טבורי אדם העובר שליה

חבל הטבור אנושי (UC) ניתן להשיג במהלך תקופת הלידה כתוצאה מונח לידה מוקדמת, ולאחר postterm משלוח. ב פרוטוקול זה, אנו מתארים את בידוד ואפיון של UC-derived בתאי גזע mesenchymal (UC-MSCs) מן העוברים/תינוקות בגיל 19-40 שבועות של הריון.

בידוד ואפיון של האדם נגזר הטבור בתאי גזע Mesenchymal של לידה מוקדמת ותינוקות המונח

מחקר זה מציג הליך דיסקציה קהה ייחודי לשמירה על שלמות הג'לי של וורטון (WJ), וכתוצאה מכך WJ פחות פגום וכמות וכדאיות גדולה יותר של תאי גזע מזנכימליים שנקטפו (MSC). השיטה מפגינה תפוקה ויכולת שגשוג גבוהות בהשוואה לשיטות דיסקציה חדות קונבנציונליות.

בידוד תאי גזע מזנכימליים שמקורם בחבל הטבור עם יבולים גבוהים ונזק נמוך

בדו"ח זה, אנחנו מדגימים מערכת לבודד התורם התרבות תאים מבלוטת החלב העכבר, ו orthotopically השתלת תאים אלה בעכברים הנמען לנתח סטרומה: אינטראקציות אפיתל במהלך התפתחות הגידול החלב.

השתלה של תאים סטרומה החלב ותאי קרצינומה של עכברים C57BL/6J

קרצינומה הקשורים fibroblasts (CAFs) עשיר myofibroblasts להציג בתוך stroma הגידול, לשחק תפקיד מרכזי נהיגה התקדמות הגידול. פיתחנו מודל הגידול coimplantation xengraft עבור ניסיוני להפקת CAFs מן fibroblasts החלב האנושי. הפרוטוקול מתאר כיצד להקים myofibroblasts CAF כי תרכוש את היכולת לקדם tumourigenesis.

הדור ניסויית של קרצינומה-Associated Fibroblasts (CAFs) מ Fibroblasts החלב אנוש

השיטה מתוארת בידוד ואפיון של תאי גזע אנושיים שיניים זולות (hDPSCs) באמצעות...

בידוד, אפיון והשוואתי התמיינות של תאי גזע אנושיים שיניים זולות נגזרה שיניים קבועות על ידי שימוש בשתי שיטות שונות

הבידוד של תאי גזע סרטני (CSCs) ישירות מרקמות אנושיות הוא הנדרש לאפיון הביולוגי שלהם. כתב יד זה מתאר מתודולוגיה לבידודה של CSCs ערמונית מרקמות אנושיות, תוך מתן טיפים על פתרון בעיות בצעדים קשים גם.

בידוד של תאי גזע סרטני מדגימות אדם סרטן הערמונית

הקמת מערכות עיקריות של רירית הרחם סטרומה תא תרבות מדגימות כריתת רחם היא טכניקת ערך ביולוגית וצעד חיוני לקראת רודף מגוון רחב של מחקר שואף. כאן, אנו מתארים שתי שיטות המשמשות להקמת תרבויות סטרומה מרקמות של רירית הרחם שעברו כריתה כירורגית של חולים אנושיים.

שתי שיטות לקביעת אדם תאי רירית הרחם סטרומה ראשיים מדוגמאות כריתת הרחם

למדו לבודד תאי UC-MSC מחבל הטבור עם ביטוי גבוה של BAMBI ו-MFGE8 באמצעות מיון זרימה. שיטה זו מאפשרת לחקור את ההטרוגניות של תאי גזע ולייעל טיפולים בנפריטיס זאבתית.

בידוד של תאי סטרומה מזנכימליים^שמקורםבחבל הטבור גבוה BAMBI גבוה MFGE8

גלה סרטונים נוספים