Name: בידוד וספיגת תאים דנדריטיים של שלפוחיות חוץ-תאיות קטנות מ-Echinococcus granulosus (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-03-28T13:15:00.000+00:00
Duration: 9 min 4 s
Description: חקור את ספיגת שלפוחיות חוץ-תאיות קטנות מ-Echinococcus granulosus על ידי תאים דנדריטיים שמקורם במח העצם. שיטה זו מאפשרת לחוקרים ללמוד על מודולציה חיסונית ואינטראקציות טפל-מארח.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>צינורות 1.5 מ"ל</td><td>Henso</td><td>N14059</td><td></td></tr><tr><td>צלחת 24 בארות&nbsp;</td><td>JetBiofil</td><td>CAP011024</td><td>פוליסטירן, תחתית שטוחה, צלחת סטרילית</td></tr><tr><td>6 בארות&nbsp; &nbsp;</td><td>Henso Medical Co. Ltd.</td><td>N14221</td><td>תחתית שטוחה, חומר PS,</td></tr><tr><td>מסננת תאי פוליפרופילן סטרילית 70 מ"מ</td><td>Biologix Group Limited</td><td>15-1070</td><td></td></tr><tr><td>צבע כחול אלסיאן סטרילי 8 GX&nbsp;</td><td>סנטה קרוז</td><td>sc-214517B</td> חממת CO2 <td></td></tr><tr><td>אוטומטית</td><td>Nuarire</td><td>UN-5100E/G DH</td><td></td></tr><tr><td>סרום בקר אלבומין</td><td>Wiener lab</td><td>1443151</td><td></td></tr><tr><td>CD11c נוגדן חד שבטי-PECy5&nbsp; &nbsp; 100 ומיקרו; g</td><td>eBioscience</td><td>15-0114-82</td><td>שיבוט (N418)</td></tr><tr><td>CD40 נוגדן חד-שבטי-FITC 100 ומיקרו; g</td><td>eBioscience</td><td>11-0402-82</td><td>שיבוט (HM40-3)</td></tr> <tr><td>CD80 נוגדן חד שבטי-APC 100 ומיקרו; g</td><td>eBioscience</td><td>17-0801-82</td><td>שיבוט (16-10A-1)</td></tr><tr><td>CD86 נוגדן חד-שבטי-FITC&nbsp; 100 ומיקרו; g</td><td>eBioscience</td><td>11-0862-82</td><td>שיבוט (GL-1)</td></tr> <tr><td>צנטריפוגה</td><td>תרמו סיינטיפיק</td><td>IEC CL31R מיקרוסקופ קונפוקלי רב-מהיר</td><td></td></tr><tr><td></td><td>ניקון</td> ניקון <td>מיקרוסקופ קונפוקלי C1</td><td></td></tr><tr><td>צינורות חרוטיים 15 מ"ל קוטר 17 x 120 מ"מ</td><td>Citotest</td><td>4610-1865</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>סיגמא</td><td>107K4034</td><td></td></tr><tr><td>D-גלוקוז</td><td>מרק</td><td>1.78343</td><td></td></tr><tr><td>דימתיל סולפוקסיד&nbsp;</td><td>Anedra</td><td>6646</td><td></td></tr><tr><td>סרום בקר עוברי 500 מ"ל</td><td>סיגמא-אולדריץ'&nbsp; &nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>12352207 מערכת ציטומטריית זרימה</td><td>BD Biosciences</td><td>BD FACSCanto&trade; II</td><td></td></tr><tr><td>תא Zeta נימי מקופל&nbsp;</td><td>Malvern Panalytical</td><td>DTS1070</td><td></td></tr><tr><td>מלח ג'נטמיצין סולפט</td><td>Sigma</td><td>G1264</td><td></td></tr><tr><td>תמיסת גלוטראלדהיד</td><td>Fluka</td><td>49630</td><td></td></tr><tr><td>Hepes</td><td>Gibco</td><td>11344041</td><td></td></tr><tr><td>היפודרמי&nbsp; מחט 21 גרם x 1 אינץ' 25/8</td><td>Weigao</td><td></td><td></td></tr><tr><td>היפודרמי סטרילי&nbsp; מחט 25 גרם x 5/8 אינץ'</td> <td>Weigao</td><td></td><td>עקר</td></tr><tr><td>מיקרוסקופ הפוך&nbsp;</td><td>Leica</td><td>DMIL LED Fluo&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>קטמין</td><td>הולידיי</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ליפופוליסכריד&nbsp; 5 מ"ג</td><td>Invitrogen</td><td>tlrl-rslps</td><td>LPS מהחיידק הגרם שלילי E. coli K12 . TLR2/4 אגוניסטים</td></tr><tr><td>לופרמיד הידרוכלוריד</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>5.08162</td><td></td></tr><tr><td>בינוני 199&nbsp;</td><td>Gibco</td><td>11150059</td><td></td></tr><tr><td>מתילן כחול</td><td>אנדרה</td><td>6337</td><td></td></tr><tr><td>MHC Class I (H2kb) נוגדן חד שבטי-PE 100 ומיקרו; g</td><td>eBioscience</td><td>12-5958-82</td><td>שיבוט (AF6-88.5.5.3)</td></tr> <tr><td>MHC class II (IA/IE) נוגדן חד שבטי-FITC&nbsp; 100 ומיקרו; g</td><td>eBioscience</td><td>11-5321-82</td><td>שיבוט (M5 / 114.15.2)</td></tr> <tr><td>מיקרוסקופ</td><td>אולימפוס</td><td>CX31</td><td></td></tr><tr><td>עכבר עכבר רקומביננטי Flt3L.</td><td>PrepoTech</td><td>250-31L-10UG</td><td></td></tr><tr><td>Nanodrop</td><td>Thermo Scientific</td><td>ND-One</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehyde</td><td>Agar Scientific</td><td>R1018</td><td></td></tr><tr><td>פניצילין G נתרן מלח</td><td>Sigma</td><td>P3032-10MU</td><td></td></tr><tr><td>PKH26</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>MINI26</td><td></td></tr><tr><td>אשלגן פוספט מונו-בייסי</td><td>טימפר</td><td></td><td>לפוספט חוצץ מאגר ליזה מלוח (PBS)</td></tr><tr><td>RBC 100 מ"ל</td><td>רוש</td><td>11814389001</td><td></td></tr><tr><td>RPMI בינוני&nbsp; 1640 1x 500 מ"ל</td><td>סיגמא-אולדריץ' (ג'יבקו)</td><td>11875093</td><td></td></tr><tr><td>נתרן קקודילאט&nbsp; &nbsp;</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>C0250</td><td></td></tr><tr><td>נתרן כלורי</td><td>אנדרה</td><td>7647-14-5</td><td>למי מלח חוצץ פוספט (PBS)</td></tr> <tr><td>נתרן פוספט דו-בסיסי (נטול מים) p. a.</td><td>Biopack</td><td>1639.07</td><td>עבור מלח פוספט חוצץ (PBS)</td></tr> <tr><td>מלח סטרפטומיצין סולפט</td><td>Sigma</td><td>S9137</td><td></td></tr><tr><td>מזרק 10 מ"ל</td><td>ברמן</td><td></td><td></td></tr><tr><td>צינורות פוליקרבונט סטריליים עבי דופן</td><td>בקמן קולטר</td><td></td><td>13 x 55 מ"מ, קיבולת נומינלית 4 מ"ל</td></tr><tr><td>מיקרוסקופ אלקטרונים שידור</td><td>Jeol</td><td>JEOL JSM 100CX II</td><td></td></tr><tr><td>אולטרה-צנטריפוגה</td><td>בקמן</td><td>אופטימה LE-80k&nbsp;</td><td>רוטור 90 Ti</td></tr><tr><td>קסילזין</td><td>ריצ'מונד</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Zetasizer ננו&nbsp;</td><td>מלברן&nbsp;</td><td>Nano ZSizer-ZEN3600</td><td>לביצוע מדידות פיזור אור דינמי ופוטנציאל זטה</td></tr></tbody></table>

בידוד וספיגת תאים דנדריטיים של שלפוחיות חוץ-תאיות קטנות מ-echinococcus granulosus

Isolation And Dendritic Cell-Uptake of Small Extracellular Vesicles from Echinococcus granulosus

תרשים זרימה המסכם את השלבים העיקריים לשמירה על תרביות טהורות של שלב הזחל E. granulosus , בידוד ואפיון של sEVs וקליטתם על ידי תאים דנדריטיים של עכברים מוצג באיור 1. כדי להשיג ייצור sEV גבוה מפרוטוסקולסים ומטאצסטודות, נעשה שימוש בשיטת תרבית חוץ גופית שפותחה בעבר במעבדה כדי למקסם את ההישרדות וההומאוסטזיס המטבולי של הטפיל הנחקר (איור 2).
<img alt="Figure 1" class="xfigi...

בידוד וספיגת תאים דנדריטיים של שלפוחיות חוץ-תאיות קטנות מ-Echinococcus granulosus

The secretion of extracellular vesicles by cestodes is crucial for enabling cellular communication not only among parasites but also with host tissues. In ...

isolation-dendritic-cell-uptake-small-extracellular-vesicles-from

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

אימונולוגיה וזיהומים

מקור: ווטסון, די.סי., et.al. בידוד וטיהור ניתנים להרחבה של שלפוחיות חוץ-תאיות מ-Escherichia coli וחיידקים אחרים. J. Vis. Exp. (2021)סרטון זה מדגים את הבידוד והריכוז של שלפוחיות חוץ-תאיות (EVs) שמקורן בקרום החיצוני של חיידקים מהונדסים גנטית. התהליך כולל גידול החיידקים לשחרור EVs, ואחריו צנטריפוגה עוקבת ושלבי סינון להסרת תאים ופסולת. לבסוף, אולטרה-סינון משמש לריכוז הרכבים החשמליים לניתוח במורד הזרם.

בידוד והעשרה של שלפוחיות חוץ-תאיות שמקורן בקרום החיצוני מחיידקים

סרטון זה מתאר שיטה המבוססת על כרומטוגרפיה של אי הכללת גודל (SEC) לבידוד שלפוחיות חוץ-תאיות או כלי רכב חשמליים שמקורם בתאי מערכת החיסון במוח – תאי המיקרוגליה. כלי הרכב החשמליים פועלים כמטען מולקולרי כדי לספק מתווכים, המווסתים תגובה חיסונית. לכן, כלי הרכב החשמליים המבודדים יכולים לשמש כמודל במבחנה לחקר הדיבור בין תאי עצב למיקרוגליה במהלך תגובה חיסונית עצבית.

בידוד מבוסס SEC של שלפוחיות חוץ-תאיות שמקורן במיקרוגליה: טכניקה לבידוד בועיות חוץ-תאיות ממדיית תרבית מותנית במיקרוגליה

יש התעניינות הולכת וגובר בהבנת הפונקציות החיסוניות של אוכלוסיות מסוימות של תאים בתיקונים של Peyer (PPS), אתרים אינדוקטיביים העיקריים של רקמות הלימפה מעיים כרוכות בכך. כאן אנו מתארים פרוטוקולים מקבילים להכנת PP הכנות תא בודדות לניתוח cytometric זרימה וcryosections PP לimmunostaining.

וגם בידוד Immunostaining ימפוציטים ותאי דנדריטים מהתיקונים של Peyer Murine

פרוטוקול זה מפרט שיטה לבודד תאי המציגים אנטיגנים מבלוטת התימוס אנושית דרך שלבים שונים של עיכול אנזימטי של הרקמה ואחריו צנטריפוגה צפיפות של ההשעיה התא בודדת ומיון לבסוף מגנטי ו / או FACS של אוכלוסיות התאים של עניין.

בידוד של תאי מיאלואידית דנדריטים ותאי האפיתל מקורנית האדם

נתאר כאן שיטה כדי לבודד ולטהר תאים דנדריטים שונים אנטומי בתאים אנושיים באיברי הרבייה הנקביים על ההערכה של תכונות פנוטיפיות שהיו קיימות בעבר ופונקציונליים שלהם. בשיטה זו ניתן להתאים כדי לבודד תאים חיסוניים אחרים או תאים דנדריטים של רקמות הרירית אחרות.

בידוד של תאים דנדריטים האדם באיברי הרבייה הנקביים ללימודי פנוטיפיות שהיו קיימות בעבר ופונקציונלי

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לתיאור חוץ-תאית שלפוחית (EVs) בידוד במבחנה בינוני בתרבית מ למבוגרים עלקת הבילהרציה japonicum.

בידוד ושלפוחיות אפיון של חוץ-תאית מן הבוגרים עלקת הבילהרציה japonicum

הדו ח הנוכחי מדגיש את הדרישות כרונולוגי לחילוץ שלפוחית לפוחית (EV) בידוד מ מיקרוגלייה או דם מקרופאגים. Microglia-EVs נגזר הוערכו כרגולטורים של neurite מוצלח בעוד דם מקרופאג-נגזר EVs נחקרו בשליטה של הפלישה C6 glioma תא ב מבחנה. המטרה היא להבין טוב יותר אלה פונקציות EV כמו מגשרים החיסונית במיקרו סביבות מסוימות.

אפיון של תא החיסון-מסחטות נגזרות ושלפוחיות ולימוד השפעה פונקציונלית על סביבת התא

אנו מתארים טכניקת התמרה חולפת מהירה בשלבים התפתחותיים שונים של Echinococcus granulosus באמצעות וקטורים לנטי-ויראליים מהדור השלישי.

התמרה חולפת של הצורות הסטרוביליות של אכינוקוקוס גרנולוסוס

חיידקים מפרישים שלפוחיות חוץ-תאיות בגודל ננומטר (EVs) הנושאות מולקולות ביולוגיות ביו-אקטיביות. מחקר EV מתמקד בהבנת הביוגנזה שלהם, תפקידם באינטראקציות ובמחלות בין מיקרובים למיקרובים ולמיקרובים מארחים, כמו גם ביישומים הטיפוליים הפוטנציאליים שלהם. זרימת עבודה לבידוד מדרגי של כלי רכב חשמליים מחיידקים שונים מוצגת כדי להקל על סטנדרטיזציה של מחקר EV.

בידוד וטיהור מדרגיים של שלפוחיות חוץ-תאיות מ-Escherichia coli וחיידקים אחרים

הפרוטוקול המוצע כולל הנחיות כיצד להימנע מזיהום באנדוטוקסין במהלך בידוד שלפוחיות חוץ-תאיות מסופרנאטנטים של תרביות תאים, וכיצד להעריך אותן כראוי.

בידוד של תכולת אנדוטוקסין נמוכה שלפוחיות חוץ-תאיות שמקורן בשורות תאים סרטניים

חקור את ספיגת שלפוחיות חוץ-תאיות קטנות מ-Echinococcus granulosus על ידי תאים דנדריטיים שמקורם במח העצם. שיטה זו מאפשרת לחוקרים ללמוד על מודולציה חיסונית ואינטראקציות טפל-מארח.

בידוד וספיגת תאים דנדריטיים של שלפוחיות חוץ-תאיות קטנות מ-Echinococcus granulosus

גלה סרטונים נוספים