Name: השתלת ריאות מהונדסות ביולוגית באמצעות ריאות עכבר נטולות תאים ותאי אנדותל אנושיים ראשוניים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-03-28T13:25:00.000+00:00
Duration: 10 min 13 s
Description: חקור פרוטוקול סטנדרטי להנדסה ביולוגית של ריאות עכבר באמצעות טכניקות דה-תאניה ושחזור תאי אנדותל אנושיים. שיטה זו מאפשרת מחקר יעיל בביוהנדסת איברים ובהשתלות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>van der Mark, S. C., Hoek, R. A. S., Hellemons, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developments+in+lung+transplantation+over+the+past+decade%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respir+Rev%22%5BJournal%5D)">Developments in lung transplantation over the past decade.</a> Eur Respir Rev. 29 (157), 190132(2020).</li>
<li>Valapour, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((OPTN%2FSRTR+2022+Annual+Data+Report%3A+Lung%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">OPTN/SRTR 2022 Annual Data Report: Lung.</a> Am J Transplant. 24 (2S1), S394-S456 (2024).</li>
<li>Hoffman, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Waiting+list+dynamics+and+lung+transplantation+outcomes+after+introduction+of+the+lung+allocation+score+in+the+Netherlands%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Direct%22%5BJournal%5D)">Waiting list dynamics and lung transplantation outcomes after introduction of the lung allocation score in the Netherlands.</a> Transplant Direct. 7 (10), e760(2021).</li>
<li>Wilk, A. R., Edwards, L. B., Edwards, E. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+augmenting+OPTN+data+with+external+death+data+on+calculating+patient+survival+rates+after+organ+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">The effect of augmenting OPTN data with external death data on calculating patient survival rates after organ transplantation.</a> Transplantation. 101 (4), 836-843 (2017).</li>
<li>Neizer, H., Singh, G. B., Gupta, S., Singh, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Addressing+donor-organ+shortages+using+extended+criteria+in+lung+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Cardiothorac+Surg%22%5BJournal%5D)">Addressing donor-organ shortages using extended criteria in lung transplantation.</a> Ann Cardiothorac Surg. 9 (1), 49-50 (2020).</li>
<li>Oliveira, P., Yamanashi, K., Wang, A., Cypel, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+an+ex+vivo+lung+perfusion+rat+model+for+translational+insights+in+lung+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Establishment of an ex vivo lung perfusion rat model for translational insights in lung transplantation.</a> J Vis Exp. (199), e65981(2023).</li>
<li>Anand, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Design+and+testing+of+a+humanized+porcine+donor+for+xenotransplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Design and testing of a humanized porcine donor for xenotransplantation.</a> Nature. 622 (7982), 393-401 (2023).</li>
<li>Shakir, S., Hackett, T. L., Mostaco-Guidolin, L. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioengineering+lungs%3A+An+overview+of+current+methods%2C+requirements%2C+and+challenges+for+constructing+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Bioeng+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Bioengineering lungs: An overview of current methods, requirements, and challenges for constructing scaffolds.</a> Front Bioeng Biotechnol. 10, 1011800(2022).</li>
<li>Ott, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regeneration+and+orthotopic+transplantation+of+a+bioartificial+lung%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Regeneration and orthotopic transplantation of a bioartificial lung.</a> Nat Med. 16 (8), 927-933 (2010).</li>
<li>Petersen, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-engineered+lungs+for+in+vivo+implantation%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Tissue-engineered lungs for in vivo implantation.</a> Science. 329 (5991), 538-541 (2010).</li>
<li>Leiby, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rational+engineering+of+lung+alveolar+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22NPJ+Regen+Med%22%5BJournal%5D)">Rational engineering of lung alveolar epithelium.</a> NPJ Regen Med. 8 (1), 22(2023).</li>
<li>Kitano, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+transplantation+of+human+bioartificial+lung+grafts+in+a+porcine+model%3A+A+feasibility+study%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Thorac+Cardiovasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Orthotopic transplantation of human bioartificial lung grafts in a porcine model: A feasibility study.</a> Semin Thorac Cardiovasc Surg. 34 (2), 752-759 (2022).</li>
<li>Ohata, K., Ott, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human-scale+lung+regeneration+based+on+decellularized+matrix+scaffolds+as+a+biologic+platform%5BTitle%5D)+AND+%22Surg+Today%22%5BJournal%5D)">Human-scale lung regeneration based on decellularized matrix scaffolds as a biologic platform.</a> Surg Today. 50 (7), 633-643 (2020).</li>
<li>Ren, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+pulmonary+vasculature+in+decellularized+rat+and+human+lungs%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotech%22%5BJournal%5D)">Engineering pulmonary vasculature in decellularized rat and human lungs.</a> Nat Biotech. 33 (10), 1097-1102 (2015).</li>
<li>Doi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplantation+of+bioengineered+rat+lungs+recellularized+with+endothelial+and+adipose-derived+stromal+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Transplantation of bioengineered rat lungs recellularized with endothelial and adipose-derived stromal cells.</a> Sci Rep. 7 (1), 8447(2017).</li>
<li>Stone, K. C., Mercer, R. R., Gehr, P., Stockstill, B., Crapo, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Allometric+relationships+of+cell+numbers+and+size+in+the+mammalian+lung%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Cell+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Allometric relationships of cell numbers and size in the mammalian lung.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 6 (2), 235-243 (1992).</li>
<li>Basil, M. C., Morrisey, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+regeneration%3A+a+tale+of+mice+and+men%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Lung regeneration: a tale of mice and men.</a> Semin Cell Dev Biol. 100, 88-100 (2020).</li>
<li>Hsia, C. C., Hyde, D. M., Weibel, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+structure+and+the+intrinsic+challenges+of+gas+exchange%5BTitle%5D)+AND+%22Compr+Physiol%22%5BJournal%5D)">Lung structure and the intrinsic challenges of gas exchange.</a> Compr Physiol. 6 (2), 827-895 (2016).</li>
<li>Tomiyama, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+transplantation+of+the+bioengineered+lung+using+a+mouse-scale+perfusion-based+bioreactor+and+human+primary+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Orthotopic transplantation of the bioengineered lung using a mouse-scale perfusion-based bioreactor and human primary endothelial cells.</a> Sci Rep. 14 (1), 7040(2024).</li>
<li>Stoian, A., Adil, A., Biniazan, F., Haykal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+decades+of+advances+and+limitations+in+organ+recellularization%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Issues+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Two decades of advances and limitations in organ recellularization.</a> Curr Issues Mol Biol. 46 (8), 9179-9214 (2024).</li>
<li>Crabbe, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recellularization+of+decellularized+lung+scaffolds+is+enhanced+by+dynamic+suspension+culture%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Recellularization of decellularized lung scaffolds is enhanced by dynamic suspension culture.</a> PLoS One. 10 (5), e0126846(2015).</li>
<li>Daly, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Initial+binding+and+recellularization+of+decellularized+mouse+lung+scaffolds+with+bone+marrow-derived+mesenchymal+stromal+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng+Part+A%22%5BJournal%5D)">Initial binding and recellularization of decellularized mouse lung scaffolds with bone marrow-derived mesenchymal stromal cells.</a> Tissue Eng Part A. 18 (1-2), 1-16 (2012).</li>
<li>Regulations for Animal Experiments and Related Activities. , Tohoku University. at
 <a target="_blank" href=" https://www.clag.med.tohoku.ac.jp/clar/en/"> https://www.clag.med.tohoku.ac.jp/clar/en/</a> (2024).</li>
<li>Sokocevic, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+age+and+emphysematous+and+fibrotic+injury+on+the+re-cellularization+of+de-cellularized+lungs%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">The effect of age and emphysematous and fibrotic injury on the re-cellularization of de-cellularized lungs.</a> Biomaterials. 34 (13), 3256-3269 (2013).</li>
<li>Ren, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ex+vivo+non-invasive+assessment+of+cell+viability+and+proliferation+in+bio-engineered+whole+organ+constructs%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Ex vivo non-invasive assessment of cell viability and proliferation in bio-engineered whole organ constructs.</a> Biomaterials. 52, 103-112 (2015).</li>
<li>Watanabe, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cells+attenuate+ischemia-reperfusion+injury+after+prolonged+cold+ischemia+in+a+mouse+model+of+lung+transplantation%3A+a+preliminary+study%5BTitle%5D)+AND+%22Surg+Today%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cells attenuate ischemia-reperfusion injury after prolonged cold ischemia in a mouse model of lung transplantation: a preliminary study.</a> Surg Today. 47 (4), 425-431 (2017).</li>
<li>Watanabe, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Donor+IL-17+receptor+A+regulates+LPS-potentiated+acute+and+chronic+murine+lung+allograft+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22JCI+Insight%22%5BJournal%5D)">Donor IL-17 receptor A regulates LPS-potentiated acute and chronic murine lung allograft rejection.</a> JCI Insight. 8 (21), e158002(2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>דה-סלולריזציה</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>27 גרם x 1/2 אינץ'. BD PrecisionGlide Needle</td><td>BD</td><td>305109</td><td>או שווה ערך 27 גרם מחט הזרקה</td></tr><tr><td>BD Insyte IV קטטר 20 GA X 1.8 8IN</td><td>BD</td><td>381237</td><td>או שווה ערך 20 G IV</td></tr><tr><td>קטטר להב תפר משי להב (4-0)</td><td>Nesco</td><td>GA04SB</td><td>או שווה ערך</td></tr><tr><td>CaCl2</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C5670</td><td></td></tr><tr><td>קטטר לווריד הצוואר של חולדה, PU 2Fr 10 ס"מ</td><td>Instech</td><td>C20PU-MJV1301</td><td>מומלץ לעכברים במשקל 30 גרם ומטה.</td></tr><tr><td>קטטר לווריד הצוואר של חולדות, PU 3Fr 10 ס"מ</td><td>Instech</td><td>C30PU-RJV1307</td><td>מומלץ לעכברים שוקל מעל 30 גרם.</td></tr><tr><td>DNase I</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>DN25</td><td></td></tr><tr><td>MgSO4</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M7506</td><td></td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S3014</td><td></td></tr><tr><td>מזרקי PinPort</td><td>Instech</td><td>PNP3M</td><td></td></tr><tr><td>, 22 G</td><td>Instech</td><td>PNP3F22-50</td><td>מתאים ל-C30PU-RJV1307</td></tr><tr><td>PinPorts, 25 G</td><td>Instech</td><td>PNP3F25-50</td><td>מתאים ל-C20PU-MJV1301</td></tr><tr><td>נתרן דאוקסיכולאט</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>D6750</td><td></td></tr><tr><td>מזרק סטרילי, 5 מ"ל</td><td>טריטון גנרי</td><td></td><td></td></tr><tr><td>X-100</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>9036-19-5</td><td></td></tr><tr><td>תרבית</td><td></td><td></td><td></td>תאים</tr><tr><td>EGM-2 צמיחת תאי אנדותל בינוני-2 BulletKit</td><td>Lonza</td><td>CC-3162</td><td></td></tr><tr><td>HUVEC &ndash; תאי אנדותל וריד טבורי אנושי</td><td>Lonza</td><td>C2519A</td><td></td></tr><tr><td>ביו-ריאקטור</td><td></td><td></td><td></td>מבוסס זלוף</tr><tr><td>20 גרם מחט</td><td>גנרית</td><td></td><td></td></tr><tr><td>תלת כיוונית פקק</td><td>גנרי</td><td></td><td></td></tr><tr><td>בורר פקק</td><td>גנרי גודל משעמם גנרי</td><td></td><td></td>, 6-10 מ"מ</tr><tr><td>EasyLoad III ראש משאבה</td><td>Cole-Parmer</td><td>זכוכית 243934</td><td></td></tr><tr><td> מיכל</td><td>Hario</td><td>SCN-200T</td><td>קוטר פנימי: 80 מ"מ</td></tr><tr><td>חימום מערבל מגנטי</td> התאמת פיתיון <td>גנרי</td><td></td><td></td></tr><tr><td>, PVDF, עבור צינור רך</td><td>Nordson Medical</td><td>2-9965-01</td><td>נקבה, מתאים לצינורות עם תעודת זהות 1.5 מ"מ (L / S 14)</td></tr> <tr><td>התאמת פיתיון, PVDF, עבור צינור רך</td><td>Nordson Medical</td><td>2-9964-01</td><td>זכר, מתאים צינורות עם תעודת זהות 1.5 מ"מ (L / S 14)</td></tr> <tr><td>התאמת פיתיון, PVDF, לצינור רך</td><td>Nordson Medical</td><td>2-9965-03</td><td>נקבה, מתאים צינורות עם תעודת זהות 3 מ"מ (L/S 16)</td></tr> <tr><td>התאמת פיתיון, PVDF, לצינור רך</td><td>Nordson Medical</td><td>2-9964-03</td><td>זכר, מתאים לצינורות עם תעודת זהות 3 מ"מ (L/S 16)</td></tr> <tr><td>מוט ערבוב מגנטי</td><td>גנרי</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Masterflex L/S כונן מודולרי דיוק דיגיטלי עם קלט/פלט מרחוק ובקר שולחני</td><td>Cole-Parmer</td><td>07557-00</td><td></td></tr><tr><td>Masterflex L/S צינורות משאבה מדויקת, PharMed BPT, L/S 16</td><td>Cole-Parmer</td><td>06508-16</td><td></td></tr><tr><td>Masterflex L/S צינורות משאבת תמחור, סיליקון מרפא פלטינה, L/S 14</td><td>Cole-Parmer</td><td>96410-14</td><td></td></tr><tr><td>Millex-GP יחידת מסנן מזרק, 0.22 ומיקרו; m, polyethersulfone, 33 מ"מ, מעוקר גמא</td><td>Millipore</td><td>SLGPR33RS</td><td></td></tr><tr><td>Pyrex 250 מ"ל בקבוק דשא, מכסה בורג GL-45</td><td>קורנינג</td><td>1395-250</td><td></td></tr><tr><td>סיליקון ספטה עבור GL45 מכסה בורג PBT פתוח</td><td>עליון קורנינג</td><td>1395-455S</td><td></td></tr><tr><td>פקק אור סיליקון</td><td>IMG</td><td>07763-18</td><td>קוטר עליון: 87 מ"מ, קוטר תחתון: 75 מ"מ</td></tr><tr><td>מזרק סטרילי, 10 מ"ל, 50 מ"ל</td><td>גנרי</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ניתוח עכבר (בידוד גוש לב-ריאה | השתלת ריאות)</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>10-0 קשרי ניילון</td><td>Kono Seisakusho</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>10-0 קשרי משי</td><td>Kono Seisakusho</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>4-0 קשרי משי</td><td>Kono Seisakusho</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>מהדק עורקי, 45 מ"מ מעוקל ומחורץ מהדק עורקי</td><td></td><td>C-17-45</td><td></td></tr><tr><td>BD Insyte IV קטטר 24GA</td><td>BD</td><td>381512</td><td>או שווה ערך 24G i.v. קטטר</td></tr><tr><td>בולדוג מלקחיים וסקולריים 45 מ"מ מעוקל</td><td>Natsume מחבר</td><td>M2</td><td></td></tr><tr><td>Butorphanol טרטרט&nbsp;</td><td>Meiji Seika Pharma</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Cefazolin נתרן</td><td>אוטסוקה פרמצבטי</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים דומונט #5/45</td><td>כלי מדע עדינים</td><td>1251-35</td><td></td></tr><tr><td>מספריים קפיציים בסגנון ואנה עדינים</td><td>כלי מדע עדינים</td><td>15403-08</td><td>45&deg; טיפ, 0.01 x 0.06 מ"מ</td></tr><tr><td>ערכת קוטרי תאומים</td><td>מכשיר הרווארד</td><td>RS-300</td><td></td></tr><tr><td>Halsted-Mosquito clamp קצה מעוגל, 125 מ"מ</td><td>מרכז מחקר ביולוגי</td><td>16181670</td><td></td></tr><tr><td>מחזיק מחט Hegar, 150 מ"מ</td><td>B Braun/Aesculap</td><td>BM065R</td><td></td></tr><tr><td>תמיסת Heparine</td><td>Mochida Seiyaku</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Medetomidine</td><td>Nippon Zenyaku Kogyo</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>מיקרו מלקחיים ישרים</td><td>B Braun/Aesculap</td><td>BD33R</td><td></td></tr><tr><td>Midazolam</td><td>Sandoz</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>מאוורר עכבר</td><td>מכשיר הרווארד</td><td>דגם 687&trade;</td><td></td></tr><tr><td>תמיסת מלח רגילה, צלחת</td> פטרי <td>Otsuka Pharmaceutical</td><td>N/A</td><td></td>בדרגה קלינית</tr><tr><td>, 60 x 15 מ"מ</td><td>BD</td><td>351007</td><td></td></tr><tr><td>Safelet Cath PU 20 מד קטטר פוליאוריטן</td><td>Nipro</td><td>09-031</td><td></td></tr><tr><td>Sakaki מספריים אל חלד מעוקלים 14 ס"מ</td><td>מרכז מחקר ביולוגי</td><td>64152034</td><td></td></tr><tr><td>מחזיק אזמל</td><td>מרכז מחקר ביולוגי</td><td>16101040</td><td></td></tr><tr><td>מערכת נסיגה של בעלי חיים קטנים</td><td>Fine Science Tools</td><td>18200-20</td><td></td></tr><tr><td>אזמל להב רזרבי #11</td><td>Muranaka Medical Instruments</td><td>567-001-03</td><td></td></tr><tr><td>מספריים קפיציים, 15 ס"מ</td><td>מרכז מחקר ביולוגי</td><td>PRI13-3736</td><td></td></tr><tr><td>סטריאומיקרוסקופ</td><td>Leica Microsystems</td><td>M525</td><td>עדיף מיקרוסקופ כירורגי בדרגה קלינית עם מערכת זרוע גמישה.</td></tr><tr><td>Sugita טיטניום מפרצת קליפ מעוקל דק, No.98</td><td>Mizuho רפואי</td><td>17-001-98</td><td></td></tr><tr><td>Sugita טיטניום קליפ אפליקציה, 110 מ"מ</td><td>Mizuho רפואי</td><td>17-013-53</td><td></td></tr><tr><td>מחמם חשמלי מתכוונן לטמפרטורה</td><td>גנרי</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ultrafine כותנה ספוגית</td><td>גנרית</td><td></td><td></td></tr> כלי <tr><td>דם וסימפונות</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fine נייר זכוכית</td><td>גנרי</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ונולה 20 מד טפלון אנגיוקטטר</td><td>טופ</td><td>1160</td><td></td></tr><tr><td>ונולה 22 מד טפלון אנגיוקטטר</td><td>טופ</td><td>1161</td><td></td></tr><tr><td>ונולה 24 מד טפלון אנגיוקטטר</td><td>למעלה</td><td>1124</td><td></td></tr></tbody></table>

השתלת ריאות מהונדסות ביולוגית באמצעות ריאות עכבר נטולות תאים ותאי אנדותל אנושיים ראשוניים

Transplantation of Bioengineered Lung Using Decellularized Mouse Lungs and Primary Human Endothelial Cells

בעקבות פרוטוקול הדה-סלולריזציה, ריאות העכבר הן לבנות ושקופות באופן ניכר (איור 6A). יש להסיר לחלוטין רכיבים תאיים, אך המבנה המכתשית נשאר שלם בתצפית ההיסטולוגית (איור 6B,C). ריאות עכבר שעברו תאים באמצעות 3 × 107 HUVECs עם תרבית ביו-ריאקטור מבוססת זלוף של יומיים מראים התפלגות הומוגנית של HUVECs (איור 7A). HUVECs נודדים לאזור המכתשית ההיקפית, ויוצרים רשת נימית (איור 7B). לאחר ההש...

Lung transplantation is a critical treatment for patients with end-stage lung diseases like idiopathic pulmonary fibrosis, but challenges such as donor ...

transplantation-bioengineered-lung-using-decellularized-mouse-lungs

Research

JoVE Journal

Bioengineering

הנדסה ביולוגית

פיתחנו מטריצה ​​ריאות decellularized תאיים ו bioreactor הרומן biomimetic שניתן להשתמש בהם כדי לייצר רקמת הריאה תפקודית. על ידי זריעת תאים לתוך המטריצה ​​ו culturing ב bioreactor, אנו מייצרים רקמה מדגים חילוף הגזים יעיל כאשר מושתלים in vivo לתקופות קצרות של זמן.

נוהל הנדסה ריאות

דה-סלולריזציה של איברים שלמים מייצרת פיגומים ביולוגיים טבעיים שעשויים לשמש לרפואה רגנרטיבית. מוצג תיאור של מודל פרימטים לא אנושי של התחדשות ריאות שבו ריאות שלמות עוברות דה-סלולריזציה ולאחר מכן נזרעות עם תאי גזע בוגרים ותאי אנדותל בביו-ריאקטור המאפשר זרימת כלי דם ואוורור מדיה נוזלית.

דה-סלולריזציה של ריאות פרימטים לא אנושיים ורסלולריזציה באמצעות ביו-ריאקטור מיוחד לאיברים גדולים

על מנת להבין את המנגנונים התאיים ומולקולריים שבבסיס neotissue היווצרות והתפתחות היצרות במסתמי לב רקמה מהונדסת, מודל עכברי של השתלת שסתום לב heterotopic פותח. שסתום לב ריאה הושתל לנמען באמצעות טכניקת השתלת לב heterotopic.

השתלה של הריאה Valve שימוש במודל עכבר של Heterotopic לב והשתלות

סיכום של המיקרו-סביבה הספציפית לאיבר, המגרה אנגיוגנזה מקומית, הוא הכרחי להתחדשות מוצלחת של רקמות פגועות. דוח זה מדגים שיטה חדשה להשתלת ג'ל פיברין על פני הריאה של עכבר חי על מנת לחקור כיצד המיקרו-סביבה הספציפית לריאה מווסתת אנגיוגנזה והתחדשות המכתשית בעכבר בוגר.

השרשה של הפיברין ג&#39;ל על עכבר ריאות לחקר אנגיוגנזה ריאות ספציפית

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לייצר שתלי כלי רקמה מהונדסת, כי הם פונקציונליים להשתלה לעכברים על ידי זריעה כפולה תאי גזע pluripotent מושרה באופן חלקי (PiPSC) - נגזר תאי שריר חלק וPiPSC - תאי האנדותל נגזרו על bioreactor פיגום כלי decellularized.

דור והארכת כלי רקמות מהונדסות במודל עכבר

פרוטוקול זה מפנה ביעילות עכבר גזע עוברי תא נגזרות האנדודרם סופי להבשיל דרכי נשימה תא אפיתל. טכניקת בידול זה משתמשת 3 ממדי פיגומי ריאות decellularized לכוון מפרט שושלת ריאות, באווירת התרבות מוגדרת, סרום ללא.

דור של אפיתל דרכי נשימת עכבר נגזרות ESC תאי שימוש decellularized פיגומי ריאות

פרוטוקול זה מתאר שיטה ליצירת רקמות ריאה מהונדסות בקנה מידה קטן הניתנות לשחזור, על-ידי אכלוס מחדש של פרוסות ריאה שעברו דה-תאיזציה מדויקת עם תאי אפיתל מסוג 2, פיברובלסטים ותאי אנדותל.

רקמות ריאה מהונדסות שהוכנו מפרוסות ריאה נטולות תאים

במאמר זה, תאי אנדותל ריאתיים ראשוניים בודדו וגודלו בתרבית מעכברים ילודים.

בידוד תאי אנדותל ריאה ראשוניים של עכבר

מוצג כאן פרוטוקול לבידוד רקמת ריאה אזורית דה-צלולרית. פרוטוקול זה מספק כלי רב עוצמה לחקר מורכבויות באינטראקציות מטריצה חוץ-תאית ומטריצת תאים.

דיסקציה ובידוד של רקמת ריאה דה-צלולרית ספציפית לאזור

כאן, אנו מציגים פרוטוקול להדמיה תוך-חיונית של הריאה השמאלית של העכבר המושתל באמצעות מיקרוסקופ של שני פוטונים. זה מהווה כלי רב ערך לחקר דינמיקה תאית ואינטראקציות בזמן אמת לאחר השתלת ריאות מורין.

מיקרוסקופ תוך-ויטלי דו-פוטוני של ריאת העכבר המושתל

חקור פרוטוקול סטנדרטי להנדסה ביולוגית של ריאות עכבר באמצעות טכניקות דה-תאניה ושחזור תאי אנדותל אנושיים. שיטה זו מאפשרת מחקר יעיל בביוהנדסת איברים ובהשתלות.

השתלת ריאות מהונדסות ביולוגית באמצעות ריאות עכבר נטולות תאים ותאי אנדותל אנושיים ראשוניים

גלה סרטונים נוספים