Name: הקפאה וצביעה חיסונית של רקמת האוזן הפנימית של עכבר: משלב עוברי לשלב בוגר (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-04-11T13:40:00.000+00:00
Duration: 9 min 9 s
Description: למדו הכנת רקמת האוזן הפנימית בעכברים לצביעה חיסונית בחתכים רוחביים. פרוטוקול זה מסייע לחוקרים מתחילים בתחום מדעי השמיעה לשמר מבנים קוכליאריים ולהשיג תוצאות עקביות במחקר נוירו-התפתחותי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Bainbridge, K. E., Hoffman, H. J., Cowie, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabetes+and+hearing+impairment+in+the+United+States%3A+Audiometric+evidence+from+the+National+Health+and+Nutrition+Examination+Survey%2C+1999+to+2004+%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Intern+Med%22%5BJournal%5D)">Diabetes and hearing impairment in the United States: Audiometric evidence from the National Health and Nutrition Examination Survey, 1999 to 2004 .</a> Ann Intern Med. 149 (1), 1-10 (1999).</li>
<li>Baiduc, R. R., Helzner, E. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+of+diabetes+and+hearing+loss%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Hear%22%5BJournal%5D)">Epidemiology of diabetes and hearing loss.</a> Semin Hear. 40 (4), 281-291 (2019).</li>
<li>Agarwal, S., Mishra, A., Jagade, M., Kasbekar, V., Nagle, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+hypertension+on+hearing%5BTitle%5D)+AND+%22Indian+J+Otolaryngol+Head+Neck+Surg%22%5BJournal%5D)">Effects of hypertension on hearing.</a> Indian J Otolaryngol Head Neck Surg. 65 (Suppl 3), 614-618 (2013).</li>
<li>Przewoźny, T., Gójska-Grymajło, A., Kwarciany, M., Gąsecki, D., Narkiewicz, K. Hypertension and cochlear hearing loss. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPrzewo%C5%BAny%2C+T+%22Blood+Press%22">Blood Press</a>. 24 (4), 199-205 (2015).</li>
<li>Babarinde, J. A., Adeyemo, A. A., Adeoye, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hearing+loss+and+hypertension%3A+exploring+the+linkage%5BTitle%5D)+AND+%22The+Egyptian+Journal+of+Otolaryngology%22%5BJournal%5D)">Hearing loss and hypertension: exploring the linkage.</a> The Egyptian Journal of Otolaryngology. 37 (1), 1-6 (2021).</li>
<li>Mijovic, T., Zeitouni, A., Colmegna, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autoimmune+sensorineural+hearing+loss%3A+the+otology-rheumatology+interface%5BTitle%5D)+AND+%22Rheumatology+%28Oxford%29%22%5BJournal%5D)">Autoimmune sensorineural hearing loss: the otology-rheumatology interface.</a> Rheumatology (Oxford). 52 (5), 780-789 (2013).</li>
<li>Mancini, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hearing+loss+in+autoimmune+disorders%3A+Prevalence+and+therapeutic+options%5BTitle%5D)+AND+%22Autoimmun+Rev%22%5BJournal%5D)">Hearing loss in autoimmune disorders: Prevalence and therapeutic options.</a> Autoimmun Rev. 17 (7), 644-652 (2018).</li>
<li>Persson, F., Bjar, N., Hermansson, A., Gisselsson-Solen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hearing+loss+after+bacterial+meningitis%2C+a+retrospective+study%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Otolaryngol%22%5BJournal%5D)">Hearing loss after bacterial meningitis, a retrospective study.</a> Acta Otolaryngol. 142 (3-4), 298-301 (2022).</li>
<li>Kutz, J. W., Simon, L. M., Chennupati, S. K., Giannoni, C. M., Manolidis, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+predictors+for+hearing+loss+in+children+with+bacterial+meningitis%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Otolaryngol+Head+Neck+Surg%22%5BJournal%5D)">Clinical predictors for hearing loss in children with bacterial meningitis.</a> Arch Otolaryngol Head Neck Surg. 132 (9), 941-945 (2006).</li>
<li>Li, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hearing+loss+in+neurological+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Hearing loss in neurological disorders.</a> Front Cell Dev Biol. 9, 716300(2021).</li>
<li>Shen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cognitive+decline%2C+dementia%2C+Alzheimer%27s+disease+and+presbycusis%3A+Examination+of+the+possible+molecular+mechanism%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Cognitive decline, dementia, Alzheimer's disease and presbycusis: Examination of the possible molecular mechanism.</a> Front Neurosci. 12, 12(2018).</li>
<li>Profant, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auditory+dysfunction+in+patients+with+Huntington%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Auditory dysfunction in patients with Huntington's disease.</a> Clin Neurophysiol. 128 (10), 1946-1953 (2017).</li>
<li>Jafari, Z., Kolb, B. E., Mohajerani, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auditory+dysfunction+in+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Mov+Disord%22%5BJournal%5D)">Auditory dysfunction in Parkinson's disease.</a> Mov Disord. 35 (4), 537-550 (2020).</li>
<li>Rybak, L. P., Ramkumar, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ototoxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">Ototoxicity.</a> Kidney Int. 72 (8), 931-935 (2007).</li>
<li>Demirhan, M. A., Celebisoy, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cognitive+functions+in+episodic+vestibular+disorders%3A+Meniere%27s+disease+and+vestibular+migraine%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vestib+Res%22%5BJournal%5D)">Cognitive functions in episodic vestibular disorders: Meniere's disease and vestibular migraine.</a> J Vestib Res. 33 (1), 63-70 (2023).</li>
<li>Shoham, N., Lewis, G., Favarato, G., Cooper, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+anxiety+disorders+and+symptoms+in+people+with+hearing+impairment%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Soc+Psychiatry+Psychiatr+Epidemiol%22%5BJournal%5D)">Prevalence of anxiety disorders and symptoms in people with hearing impairment: a systematic review.</a> Soc Psychiatry Psychiatr Epidemiol. 54 (6), 649-660 (2019).</li>
<li>Manley, G. A., Gummer, A. W., Popper, A. N., Fay, R. R. The cochlea: What it is, where it came from, and what is special about it. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aManley%2C+GA+%22Understanding+the+Cochlea.+Springer+Handbook+of+Auditory+Research%22">Understanding the Cochlea. Springer Handbook of Auditory Research</a>. 62, Springer. Cham. 17-32 (2017).</li>
<li>Bai, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensionally+visualized+ossification+and+mineralization+process+of+the+otic+capsule+in+a+postnatal+developmental+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Laryngoscope+Investig+Otolaryngol%22%5BJournal%5D)">Three-dimensionally visualized ossification and mineralization process of the otic capsule in a postnatal developmental mouse.</a> Laryngoscope Investig Otolaryngol. 8 (4), 1036-1043 (2023).</li>
<li>Dabdoub, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sox2+signaling+in+prosensory+domain+specification+and+subsequent+hair+cell+differentiation+in+the+developing+cochlea%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Sox2 signaling in prosensory domain specification and subsequent hair cell differentiation in the developing cochlea.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 105 (47), 18396-18401 (2008).</li>
<li>Mann, Z. F., Chang, W., Lee, K. Y., King, K. A., Kelley, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+and+function+of+scleraxis+in+the+developing+auditory+system%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Expression and function of scleraxis in the developing auditory system.</a> PLoS One. 8 (9), e75521(2013).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+purinergic+receptor+P2rx3+is+required+for+spiral+ganglion+neuron+branch+refinement+during+development%5BTitle%5D)+AND+%22eNeuro%22%5BJournal%5D)">The purinergic receptor P2rx3 is required for spiral ganglion neuron branch refinement during development.</a> eNeuro. 7 (4), (2020).</li>
<li>Matern, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gfi1Cre+mice+have+early+onset+progressive+hearing+loss+and+induce+recombination+in+numerous+inner+ear+non-hair+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Gfi1Cre mice have early onset progressive hearing loss and induce recombination in numerous inner ear non-hair cells.</a> Sci Rep. 7, 42079(2017).</li>
<li>Woods, C., Montcouquiol, M., Kelley, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Math1+regulates+development+of+the+sensory+epithelium+in+the+mammalian+cochlea%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Math1 regulates development of the sensory epithelium in the mammalian cochlea.</a> Nat Neurosci. 7 (12), 1310-1318 (2004).</li>
<li>Zhang, K. D., Coate, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+the+development+and+function+of+type+II+spiral+ganglion+neurons+in+the+mammalian+inner+ear%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Recent advances in the development and function of type II spiral ganglion neurons in the mammalian inner ear.</a> Semin Cell Dev Biol. 65, 80-87 (2017).</li>
<li>Brooks, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pou3f4-expressing+otic+mesenchyme+cells+promote+spiral+ganglion+neuron+survival+in+the+postnatal+mouse+cochlea%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Pou3f4-expressing otic mesenchyme cells promote spiral ganglion neuron survival in the postnatal mouse cochlea.</a> J Comp Neurol. 528 (12), 1967-1985 (2020).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pericytes+control+vascular+stability+and+auditory+spiral+ganglion+neuron+survival%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Pericytes control vascular stability and auditory spiral ganglion neuron survival.</a> Elife. 12, e83486(2023).</li>
<li>Lewis, M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLewis%2C+M+%22A+guide+to+selecting+control+and+blocking+reagents%22">A guide to selecting control and blocking reagents</a>. , https://www.jacksonimmuno.com/secondary-antibody-resource/technical-tips/controls-diluents-blocking/ (2018).</li>
<li>Song, L., McGee, J., Walsh, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Frequency-and+level-dependent+changes+in+auditory+brainstem+responses+%28ABRS%29+in+developing+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Acoust+Soc+Am%22%5BJournal%5D)">Frequency-and level-dependent changes in auditory brainstem responses (ABRS) in developing mice.</a> J Acoust Soc Am. 119 (4), 2242-2257 (2006).</li>
<li>Montgomery, S. C., Cox, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole-mount+dissection+and+immunofluorescence+of+the+adult+mouse+cochlea%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Whole-mount dissection and immunofluorescence of the adult mouse cochlea.</a> J Vis Exp. (107), e53561(2016).</li>
<li>Driver, E. C., Northrop, A., Kelley, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+migration%2C+intercalation+and+growth+regulate+mammalian+cochlear+extension%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Cell migration, intercalation and growth regulate mammalian cochlear extension.</a> Development. 144 (20), 3766-3776 (2017).</li>
<li>Babola, T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Purinergic+signaling+controls+spontaneous+activity+in+the+auditory+system+throughout+early+development%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Purinergic signaling controls spontaneous activity in the auditory system throughout early development.</a> J Neurosci. 41 (4), 594-612 (2021).</li>
<li>Donadieu, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+cryosections+and+specific+immunohistochemical+methods+for+detecting+hypoxia+in+mouse+and+rat+cochleae%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Histochem%22%5BJournal%5D)">Improved cryosections and specific immunohistochemical methods for detecting hypoxia in mouse and rat cochleae.</a> Acta Histochem. 109 (3), 177-184 (2007).</li>
<li>Rio, C., Dikkes, P., Liberman, M. C., Corfas, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glial+fibrillary+acidic+protein+expression+and+promoter+activity+in+the+inner+ear+of+developing+and+adult+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Glial fibrillary acidic protein expression and promoter activity in the inner ear of developing and adult mice.</a> J Comp Neurol. 442 (2), 156-162 (2002).</li>
<li>Ahmad, S., Chen, S., Sun, J., Lin, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Connexins+26+and+30+are+co-assembled+to+form+gap+junctions+in+the+cochlea+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">Connexins 26 and 30 are co-assembled to form gap junctions in the cochlea of mice.</a> Biochem Biophys Res Commun. 307 (2), 362-368 (2003).</li>
<li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spag6+mutant+mice+have+defects+in+development+and+function+of+spiral+ganglion+neurons%2C+apoptosis%2C+and+higher+sensitivity+to+paclitaxel%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Spag6 mutant mice have defects in development and function of spiral ganglion neurons, apoptosis, and higher sensitivity to paclitaxel.</a> Sci Rep. 7 (1), 8638(2017).</li>
<li>Gratton, M. A., Rao, V. H., Meehan, D. T., Askew, C., Cosgrove, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Matrix+metalloproteinase+dysregulation+in+the+stria+vascularis+of+mice+with+Alport+syndrome%3A+implications+for+capillary+basement+membrane+pathology%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Matrix metalloproteinase dysregulation in the stria vascularis of mice with Alport syndrome: implications for capillary basement membrane pathology.</a> Am J Pathol. 166 (5), 1465-1474 (2005).</li>
<li>Goodyear, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accelerated+age-related+degradation+of+the+tectorial+membrane+in+the+Ceacam16%CE%B2gal%2F%CE%B2gal+null+mutant+mouse%2C+a+model+for+late-onset+human+hereditary+deafness+DFNB113%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Mol+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Accelerated age-related degradation of the tectorial membrane in the Ceacam16βgal/βgal null mutant mouse, a model for late-onset human hereditary deafness DFNB113.</a> Front Mol Neurosci. 12, 147(2019).</li>
<li>Zupančič, D., Terčelj, M., Štrus, B., Veranič, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+to+obtain+good+morphology+and+antigen+detection+in+the+same+tissue+section%5BTitle%5D)+AND+%22Protoplasma%22%5BJournal%5D)">How to obtain good morphology and antigen detection in the same tissue section.</a> Protoplasma. 254 (5), 1931-1939 (2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Chemicals</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Thermo Fisher Scientific, Inc.</td><td>BP151-500</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>קורנינג, בע"מ</td><td>46-013-CM</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>סיגמא-אולדריץ', LLC.</td><td>60-00-4</td><td></td></tr><tr><td>סוכרוז&nbsp;</td><td>VWR אינטרנשיונל, בע"מ</td><td>97061-432</td><td></td></tr><tr><td>נתרן אזיד&nbsp;</td><td>אמרסקו, בע"מ</td><td>0639-250G</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehyde</td><td>מדעי מיקרוסקופיה אלקטרונית</td><td>15714</td><td></td></tr><tr><td>אתנול</td><td>דקון מעבדות, בע"מ</td><td>v1001</td><td></td></tr><tr><td>דימתילבוטאן&nbsp;</td><td>תרמו פישר סיינטיפיק, בע"מ</td><td>19387-AP</td><td></td></tr><tr><td>תרכובת טמפרטורת חיתוך אופטימלית (OCT)</td> <td>VWR International, Inc.</td><td>25608-930</td><td></td></tr><tr><td><ציוד חזק>ספציפי</חזק></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cryostat</td><td>Thermo Fisher Scientific, Inc.</td><td>14-071-459</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים חיתוך</td><td>מדעי מיקרוסקופיה אלקטרונית</td><td>72700-DZ</td><td></td></tr><tr><td>מחסום הידרופובי עט פרוקסידאז-אנטיפרוקסידאז (PAP)&nbsp;</td><td>מעבדות וקטור בע"מ</td><td>H-4000</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופ קונפוקלי</td><td>קרל זייס מיקרוסקופיה, LLC.</td><td>LSM 880</td><td></td></tr><tr><td>P20 מיקרופיפטה</td><td>גילסון, בע"מ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>F144056M מספריים לנתיחה</td><td>Thermo Fisher Scientific, Inc.</td><td>08-951-20</td><td></td></tr><tr><td>צלחת סילגארד</td><td>מדעי מיקרוסקופיה אלקטרונית</td><td>24236-10</td><td></td></tr><tr><td>צנטריפוגה</td><td>Eppendorf</td><td>5424R</td><td></td></tr><tr><td><חומרי הרכבה חזק>ים</חזקים></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fluoromount</td><td>מדעי מיקרוסקופיה אלקטרונית</td><td>17984-25</td><td></td></tr><tr><td>Superfrost פלוס שקופיות</td><td>Thermo Fisher Scientific, Inc.</td><td>1255015</td><td></td></tr><tr><td><ריאגנטים חזקים>צביעה חיסונית</חזקים></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>נורמליים סרום חמור</td><td>Jackson ImmunoResearch, Inc.</td><td>017-000-121</td><td></td></tr><tr><td>קטעי FAB נגד עכברים&nbsp;</td><td>ג'קסון ImmunoResearch, Inc.</td><td>715-007-003</td><td></td></tr><tr><td>BlokHen</td><td>Aves labs, Inc.</td><td>BH-1001</td><td></td></tr><tr><td>Tuj1 (בטא-III-טובולין) נוגדן חד שבטי לעכבר</td><td>Biolegend, Inc.</td><td>MMS-435P</td><td></td></tr><tr><td>Sox2 נוגדן פוליקלונלי עיזים</td><td>R& די סיסטמס, בע"מ</td><td>AF2018</td><td></td></tr><tr><td>Myo6 ארנב נוגדן רב-שבטי</td><td>Proteus Biosciences</td><td>25&ndash; 6791</td><td></td></tr><tr><td>Myo7A נוגדן רב-שבטי ארנב</td><td>Thermo Fisher Scientific, Inc.</td><td>PA1-936</td><td></td></tr><tr><td>Plexin-B1 נוגדן פוליקלונלי עיזים</td><td>R& די סיסטמס, בע"מ</td><td>AF3749</td><td></td></tr><tr><td>נוגדנים משניים (מיוצרים בחמור; Alexa-488, Cy3, Cy5)</td><td>Jackson ImmunoResearch, Inc.</td><td>ראה קטלוג</td><td></td></tr></tbody></table>

הקפאה וצביעה חיסונית של רקמת האוזן הפנימית של עכבר: משלב עוברי לשלב בוגר

Cryosectioning and Immunostaining Mouse Inner Ear Tissue: From Embryonic to Adult Stages

אנו מציגים דוגמאות מהמעבדה שלנו של הקודקוד והסיבוב הבסיסי של שבלול עכבר עוברי 16.5 (E16.5) והסיבוב הבסיסי מהיום שלאחר הלידה 0 (P0) ושבלול P30. דגימות אלה נחתכו ונצבעו באמצעות סמנים לתאי שיער (Myo7A ו-Myo6), נוירונים של גנגליון ספירלי (SGNs; Tuj1), תאי גליה ותאי תמיכה (Sox2), ו-Plexin-B1, המסמן את קרום הבסיס סביב צינור השבלול ו-SGNs. חתכי השבלול בשלבי התפתחות שונים חושפים הבדלים משמעותיים במורפולוגיה ובארגון התאי, המשקפים את התבגרות השבלול.
ב-E16.5, השבלול נמצא בשלב מוקדם של התפתחות, כאשר האיבר...

This protocol details general histology methods for preparing inner ear samples from embryonic, neonatal, and adult mice. The purpose of this protocol is ...

cryosectioning-immunostaining-mouse-inner-ear-tissue-from-embryonic

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

ביולוגיה התפתחותית

הליך פשוט של vibratome חתך את האיבר של קורטי, ואחריו מיקרוסקופיה אימונוהיסטוכימיה ו confocal מתואר. הליך זה מאפשר שימור משופר של cytoarchitecture את הקנס של האיבר של קורטי יונקים, וכתוצאה מכך מאפשר כימות מדויק של סוגי תאים.

Vibratome חתך לשימור משופרת של Cytoarchitecture של איברים של יונקים של קורטי

אנו מציגים שיטה המתארת בידוד ותרבית של צמחי שבלול מהאוזן הפנימית של עכבר עוברי.  אנו גם מדגימים שיטה להעברת גנים לתוך צמחי שבלול באמצעות אלקטרופורציה של גל מרובע. תרבית הצמח במבחנה יחד עם טכניקת העברת גנים מאפשרת לחוקרים לחקור את ההשפעות של שינוי ביטוי גנים במהלך ההתפתחות.

תרבות של עוברי Explants שבלול העכבר וג&#39;ין העברה על ידי Electroporation

אנו מציגים שיטה לבודד את האיבר הבוגר של קורטי כשלושה סיבובים שלמים שבלול (קודקוד, אמצע, ובסיס). אנחנו גם מדגימים הליך immunostaining עם נוגדנים מתויגים fluorescently. יחד טכניקות אלה יאפשרו המחקר של תאי שיער, תאי תמיכה, וסוגי תאים אחרים הנמצא בשבלול.

ההר שלם Dissection וImmunofluorescence של מבוגרי עכבר השבלול

אנו מציגים פרוטוקול לבידוד הבולה השמיעתית, הקפסולה והעצמות מעכברים לאחר לידה לצורך ניתוח היסטולוגי שלם.

דיסקציה של בולה השמיעה של עכברים אחרי לידה: בידוד של עצמות באוזן התיכונה ניתוח היסטולוגית

כאן, אנו מציגים פרוטוקול מפורט כדי לזהות ולכמת את רמות החלבון במהלך הגולגולת מורפולגנזה/פתוגנזה על ידי מכתים באמצעות העכבר ברקמות הגולגולת כמו דוגמאות. בנוסף, אנו מתארים שיטה להכנה והקפאה של רקמות קשות בלתי מתויטות מעכברים צעירים לצורך חיסוני.

הכנה לרקמה וכתמים של רקמות הגולגולת והעצמות הבלתי מתויטות

כתב יד זה מתאר פרוטוקול ניסיוני להערכת מאפיינים מורפולוגיים ומעמד פונקציונלי של הסינפסות של רצועת הכלים בעכברים נורמליים. המודל הנוכחי מתאים גם לרעש המושרה והקשורות לגיל synaptopathy מודלים מוגבלים. גם התוצאות של לימודי העכבר הקודמים נדונו.

מורפולוגית ופונקציונלית הערכה של הסרט סינפסות בתדר ספציפי אזורים של העכבר שבלול

מאמר זה מציג משטח שונה הכנה שבלול שיטה הדורשת decalcification ושימוש של תא ודבק רקמה לדבוק פיסות של epithelia לכסות 10 מ"מ כיסוי עגול עבור אימונוהיסטוכימיה העכבר למבוגרים כנימת.

הכנה לפני שבלול בעכבר למבוגרים

מחקר זה מתאר כיצד לנתח את השק האנדולימפטי מהאוזן הפנימית של העכבר בגילאים שונים. התוצאה של דיסקציה דומה מוצגת במודל עכבר Slc26a4-null של הגדלת השק האנדולימפטי. עכבר מהונדס עם כתב ניאון המתבטא בשק האנדולימפטי מוצג כמודל לדמיין בקלות את השק האנדולימפטי, ואת הכלי החינוכי.

נתיחת השק האנדולימפטי מעכברים

כאן, אנו מציגים פרוטוקול עבור מודל עכבר של ליקוי שמיעה הנגרם על ידי רעש (NIHL). כדי ליצור את NIHL, פיתחנו מכשיר חדש ופשוט העשוי מפלסטיק גלי, כלוב מלכודת חולדות ורמקול. תגובת גזע המוח השמיעתי והדמיית אימונופלואורסצנטיות שימשו להערכת תפקוד השמיעה והנזק לתאי השערה החיצוניים, בהתאמה.

תנאי ניסוי מותאמים לאובדן שמיעה כתוצאה מרעש בעכברים והערכת תפקוד השמיעה ונזק לתאי השערה החיצוניים

הסטריה וסקולריס חיונית ליצירת הפוטנציאל האנדוקוכליארי. כאן, אנו מציגים את הדיסקציה של העכבר הבוגר stria vascularis עבור ריצוף גרעין יחיד או immunostaining.

דיסקציה של Stria vascularis עכבר בוגר עבור ריצוף גרעין יחיד או immunostaining

מתואר פרוטוקול להכנת הקפאות רשתית של עכברים וביצוע צביעה חיסונית על קולטני אור. מאמר זה מאפשר לחוקרים לייצר באופן עקבי חלקים קפואים ברשתית של עכברים עם מורפולוגיה שמורה היטב ותוצאות צביעה חיסונית באיכות גבוהה.

הקפאה וצביעה חיסונית של רשתית העכבר

למדו הכנת רקמת האוזן הפנימית בעכברים לצביעה חיסונית בחתכים רוחביים. פרוטוקול זה מסייע לחוקרים מתחילים בתחום מדעי השמיעה לשמר מבנים קוכליאריים ולהשיג תוצאות עקביות במחקר נוירו-התפתחותי.

הקפאה וצביעה חיסונית של רקמת האוזן הפנימית של עכבר: משלב עוברי לשלב בוגר

גלה סרטונים נוספים