Name: מודל זעזוע מוח בילדים בעכברים: פגיעת ראש סגורה עם הפרעות ארוכות טווח (CHILD) (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-02-07T13:40:00.000+00:00
Duration: 7 min 1 s
Description: חקור את מודל CHILD לפגיעת ראש סגורה בעכברים צעירים לחקר השלכות ארוכות הטווח של זעזוע מוח בילדים. שיטה זו מאפשרת הערכת שינויים נוירואינפלמטוריים והתנהגותיים לאורך זמן.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

הניסויים שוחזרו בשני אתרים, אוניברסיטת בורדו (צרפת) ואוניברסיטת קליפורניה ריברסייד (קליפורניה, ארה"ב).
בבורדו, כל הניסויים בוצעו על עכברים זכרים ונקבות P17 C57Bl6J שגודלו במתקן בעלי חיים באוניברסיטה. המגדלים הראשונים התקבלו ממקור מסחרי וגידלו בתנאים סטנדרטיים עם מחזור כהה/אור של 12/12 שעות, טמפרטורה של 21 ° C ± 1 ° C, ולחות של 55% ± 10%, ומזון ומים שסופקו אד ליביטום. הליכי הניסוי הם בהתאם לתקנות הוועדה לטיפול בבעלי חיים של אוניברסיטת בורדו, החוקים הצרפתיים המסדירים שימוש בחיות מעבדה (הרשאה #29324-2021012118549817 v3), הנחיות המועצה האירופית (86/609/EEC) והנחיות ARRIVE. פרוטוקול זה, בהיותו מודל קל של פגיעה מוחית טראומטית, אינו מייצר כאב או מצוקה. ככזה, הוא אינו מחייב טיפול ספציפי בכאב מעבר לטיפול הכאב הרגיל. גמילת הגורים (TBI, Shams) הייתה יעילה ב-P25.
בריברסייד, נקבות E13 בהריון C57Bl6J הושגו באופן מסחרי, וכל הניסויים בוצעו על ההמלטות שהתקבלו הן בגורים זכרים והן בגורים נקבות בגילאי P17. בעלי החיים גודלו עם מחזור אוטומטי של 12/12 שעות חושך / אור וטמפרטורה של 21 מעלות צלזיוס. לסכרים ולגורים הייתה גישה למזון ולמים. כל הליכי הניסוי אושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים באוניברסיטת קליפורניה, ריברסייד, ועמדו בחוק רווחת בעלי החיים ובמדיניות שירותי בריאות הציבור. כל הגורים (TBI, Sham) במתקן זה נגמלו ב-P21.
פרטי בעלי החיים, הריאגנטים והציוד ששימשו במחקר זה מפורטים בטבלת החומרים.
1. צעדים מקדימים
<ol>
	<li>כדי למנוע היפותרמיה, יש לחמם מראש את החדר להשראת הרדמה ואת כלובי ההתאוששות בעזרת רפידות חימום.</li>
	<li>הגדר את המנגנון הסטריאוטקסי כאשר המשפיע מותקן בזווית של 90°.</li>
	<li>ודא שכל החלקים מהודקים ומאובטחים כראוי ושהבוכנה מוברגת היטב למשפיע.</li>
	<li>חותכים גיליון אלומיניום שיתאים למנגנון הסטריאוטקסי (במקרה זה, 18 ס"מ x 30 ס"מ). האלומיניום המשמש כאן הוא באיכות אלומיניום סטנדרטית. עטפו את המסגרת הסטריאוטקסית בנייר כסף כדי ליצור כרית שעליה יונח החיה. אבטחו את המיקום והמתח של נייר הכסף בעזרת סרט מעבדה רגיל על מנת לשמור על משקל החיה.</li>
	<li>הפעל את בקר המשפיע, ובתפקוד חומרת הפציעה, הגדר את מהירות הפגיעה ל- 2 M.S-1 לדרגה 1 (G1) או 3 M.S-1 לדרגה 2 (G2) לפגיעה חמורה יותר (שינוי פרמטר זה ישפיע על חומרת זעזוע המוח).</li>
	<li>משקלו את בעלי החיים. ב-P17, משקל בעלי החיים חייב להיות מעל 5.9 גרם עבור עכברי C57Bl6. בעלי חיים שנופלים תחת משקל זה אינם נכללים. הערה: עבור מחקרים מסוימים, עכברי CD1 שימשו, ועבור P17, הסף נקבע להיות מעל 6.5 גרם (נתונים אישיים).</li>
</ol>
2. הליך פגיעה מוחית טראומטית קלה לנוער
<ol>
	<li>מרדימים את העכבר בחשיפה של 5 דקות לאיזופלורן. הגדר את הרכב הגז לתערובת של 2.5% (במקרה זה, המוביל הוא תערובת אוויר סינתטי עם 21% חמצן) עם קצב זרימה של 1.5 ליטר לדקה. הערה: משלב זה, כל הפעולות חייבות להיעשות במהירות, מכיוון שבעלי חיים שלא נפגעו יתעוררו תוך 5 דקות.</li>
	<li>מקם את ראש העכבר מתחת למשפיע. יש לפרוס את הגור בכל אורכו. קוטרו של החוד 3 מ"מ והוא מכוסה בגומי כדי למזער את השפעת המתכת על הגולגולת.</li>
	<li>הנמיכו את המשפיע על ידי העברת הידית למצב הרחבה .</li>
	<li>הנמיכו בערך את המשפיען ומקמו את העכבר כך שהמשפיע יהיה רק בין האוזניים. לאחר מכן, החליקו את העכבר כך שקצה הבוכנה יזוז קדימה לקצה בוכנה אחד המקביל לקצה בוכנה אחד, ולקצה בוכנה אחד משמאל לחיה (ראו איור 1). הערה: חיות דמה ממוקמות מעט רחוק מהבוכנה (אין לפגוע בשום חלק של החיה).</li>
	<li>הנמיכו את המפגע כך שהוא ייגע עם ראש החיה (איור 1, E2).</li>
	<li>הגדר את המשפיע לנסיגה (איור 1E3).</li>
	<li>על מנת לקבוע את חומרת הפציעה, הזיזו את הבוכנה 1 מ"מ למטה לדרגה 1 (G1). לדרגת פגיעה חמורה יותר 2 (G2), הזיזו את הבוכנה 3 מ"מ למטה (איור 1E4).</li>
	<li>הגדר את זמן השהייה ל -0.1 שניות ללא קשר לחומרת (שינוי פרמטר זה לא ישפיע על חומרת זעזוע המוח).</li>
	<li>לחץ על פגיעה בידית ימין (איור 1, E5).</li>
	<li>הגדר במהירות את הידית השמאלית למצב כבוי כדי שהמערכת לא תתחמם יתר על המידה. ראו את תרשים הזרימה לקבלת מידע נוסף (איור 2).</li>
</ol>
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67667/67667fig01.jpg"> 
איור 1: מיקום קצה המשפיע. (A) קצה המשפיע ממוקם תחילה על קו האמצע בין האוזניים. (B) לאחר מכן מזיזים את הקצה 3 מ"מ קדימה (שווה ערך לקוטר קצה). (C) לבסוף, קצה הבוכנה מועבר 3 מ"מ בצד שמאל של העכבר. (ד,ה) מיקומים אפשריים של קצה המשפיע ביחס לקנה המגנטי. (D) למפגע יש 3 מצבים ביחס לגוף הבוכנה (ניטרלי, נשלף או מורחב/פגיעה) עם טווח של 5 מ"מ ביניהם. (ה) מיקום קצה הפגיעה ביחס למשטח הגולגולת בשלבים השונים של ההליך. (1) מיקום המשפיע בעמדה הניטרלית; (2) הבוכנה מועברת כדי לגעת בעדינות בגולגולת של בעל החיים (שלב 2.5); (3) לאחר מכן מוגדר המשפיע לסגת (שלב 3.6); (4) כל גוף המשפיע מועבר של x מ"מ למטה (שלב 2.7). עבור ציון G1, מהירות פגיעה (y) של 2 m.s-1 עם עומק 1 מ"מ (x) עבור G1 או מהירות פגיעה (y) של 3 m.s-1 עם עומק 3 מ"מ (x) עבור G2. (5) לאחר לחיצה על פגיעת המנוף, קצה המנוף נע x מ"מ מתחת לפני השטח של הגולגולת במהירות y במהלך זמן השהייה עם המעבר חזרה למצב ניטרלי. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67667/67667fig01large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67667/67667fig02.jpg"> 
איור 2: תרשים זרימה של צאצא. תרשים זרימה המפרט את השלבים להשראת CHILD בעכברי PND17 המקודדים בצבע כדי לציין שלבים שונים של השראת זעזוע מוח. צילומים של ההתקנה כוללים (A) את כל מערך השראת CHILD (מכשיר ההרדמה אינו גלוי), כולל בקר ההשפעה, המכשיר הסטריאוטקטי עם המפגע והקצה הממוקמים מעל רדיד הפח המתוח, וקופסת השחזור הממוקמת על גבי כרית חימום. (B) קצה פגיעה מגומי (3 מ"מ) עם קשקשים. (C) המכשיר הסטריאוטקטי עם רדיד הבדיל מתוח לרוחב המסגרת הסטריאוטקטית והסולנואיד המשפיע עם קצה הפגיעה ממוקם מעל נייר הכסף. (D) תא התאוששות היושב על כרית החום. (E) בקר ההשפעה עם שני מתגי בקרה, מסומנים כמו בתרשים הזרימה (תיבה אדומה = הארכה/שליפה/כיבוי; תיבה סגולה = מתג השפעה). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67667/67667fig02large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
3. מעקב פוסט טראומה
הערה: ניתן להקליט את השלבים הבאים בווידאו לצורך ניתוח לא מקוון, מה שמאפשר לנסיין לבצע CHILD על מספר בעלי חיים ברצף. עם זאת, יש לבצע הערכות קבועות וחוזרות ונשנות של רווחת בעלי החיים.
<ol>
	<li>שימו לב למשך דום נשימה, אם קיים (מיד לאחר הפגיעה), ואם היה סיבוב ראש במהלך הפגיעה.</li>
	<li>מקם את העכבר על צדו הימני בכלוב התאוששות.</li>
	<li>שים לב לזמן הנכון של העכבר (גידול על 4 רגליים) ואת הזמן של חידוש התנהגות גישוש. בדרך כלל, עכברי דמה מתעוררים תוך 3-4 דקות ומחדשים התנהגות גישושית 3-4 דקות מאוחר יותר (איור 3). עכברים ילדים מתעוררים תוך 7-12 דקות לאחר הפגיעה (איור 3A) וחוזרים לחקור תוך 12-18 דקות לאחר הפגיעה (איור 3B), בהתאם למין ולחומרת ההשפעה (איור 3A,B). הערה: אם בעל החיים המושפע אינו מחדש את התנהגות הגישוש שלו תוך 30 דקות, בעל החיים אינו נכלל.</li>
	<li>לאחר החלמה מלאה, החזירו את בעלי החיים לכלוב הביתי שלהם. בשלב זה, ההתנהגות של עכברי דמה ועכברי CHILD (חומרת G1 או G2) צריכה להיות דומה לחלוטין, ואין להבחין בין קבוצות בעלי חיים בתוך ההמלטה. הערה: ניתן להחזיק את בעלי החיים עד 18 חודשים לאחר הפציעה14 בתנאים שצוינו בתחילת השיטות. ניתן לבצע הערכות תוצאות התנהגותיות באמצעות סוללה של בדיקות בשילוב עם מדידות MRI, הדמיית מיניסקופ, היסטולוגיה ואימונוהיסטוכימיה12. אימונוהיסטוכימיה עבור GFAP ו- NeuN יכולה לשמש בנקודות זמן מוקדמות כדי לאמת את המודל ואת נוכחותם של שינויים ברקמות.</li>
</ol>
4. אימונוהיסטוכימיה
הערה: יום אחד לאחר הפציעה, בעלי חיים מקבוצות G2 ודמה (n = 4 עכברים עבור G2 ו- n = 4 עבור Sham) הורדמו ועברו ניקוב טרנסקרדילי עם 4% paraformaldehyde (PFA) שהוכן במי מלח חוצצים פוספט (PBS) 0.1 M, pH 7.4 ב 4 ° C. המוחות חולצו10 מהגולגולת והוטבלו באותה תמיסת PFA במשך הלילה, ולאחר מכן הועברו ל-PBS עם נתרן אזיד (0.1%) לפני החיתוך. לאחר מכן הוכנו חתכים קורונליים בעובי של 50 מיקרומטר באמצעות ויברטום. לאחסון ארוך, חלקים הונחו באמצעי הגנה קריו-פרוטקטיבית (30% אתילן גליקול ו-20% גליצרול ב-PBS) בטמפרטורה של -20°C עד לשימוש. כדי לאפיין את ההשפעה של זעזוע המוח על גליוזיס מוחי ואובדן עצבי, בוצעה אימונוהיסטוכימיה המכוונת ל-GFAP ול-NeuN כמתואר להלן.
<ol>
	<li>שטפו את חלקי המוח 4 פעמים במשך 10 דקות ב-PBS.</li>
	<li>העבר את המקטעים בתמיסת חסימה (1% BSA, 0.3% Triton X-100 ב-PBS) למשך 10 דקות בטמפרטורת החדר (RT).</li>
	<li>יש לדגור על מקטעים למשך הלילה בטמפרטורה של 4°C עם הנוגדנים העיקריים הבאים המדוללים בתמיסת חסימה: עוף נגד GFAP (1:3000) וארנב אנטי-NeuN (1:500).</li>
	<li>שטפו את הפרוסות 4 פעמים במשך 10 דקות ב-PBS תחת תסיסה.</li>
	<li>לאחר מכן, העבר את החלקים בתמיסת חסימה המכילה את הנוגדנים הפלואורסצנטיים המשניים מדוללים 1:1000 למשך שעה אחת ב- RT, Alexa-Fluor-488-nm עז נגד ארנבת, ו- Alexa-Fluor-568-nm עז נגד עוף.</li>
	<li>שטפו את הקטעים 4 פעמים במשך 10 דקות ב- PBS תחת תסיסה.</li>
	<li>הרכיבו את המקטעים על שקופיות באמצעות אמצעי הרכבה והוסיפו החלקת כיסוי. השאר את השקופיות בטמפרטורה של 4°C עד לקבלת התמונה.</li>
	<li>Aquire immunofluorescence באמצעות מיקרוסקופ epifluorescence ותוכנת micromanager. השתמש בתוסף תפירה עם עדשת 10x כדי לקבל תמונות אריחים של המיספרות ipsilateral ו contralateral. הערה: צביעת בקרה שלילית שבה הושמט הנוגדן הראשוני או הנוגדן המשני לא הראתה תיוג ניתן לזיהוי. לניתוח תמונה מפורט יותר, ניתן להשתמש בתוכנת פיג'י15 כדי לכמת את הפרמטרים של immunostaining באזורים שונים של עניין16.</li>
</ol>

<meta charset="utf8"></head><body>מודל CHILD – שחזור זעזוע מוח בקרב בני נוער ותוצאות ארוכות טווח בעכברים

<ol><li>Dewan, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estimating+the+global+incidence+of+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosurg%22%5BJournal%5D)">Estimating the global incidence of traumatic brain injury.</a> J Neurosurg. 130 (4), 1080-1097 (2018).</li>
<li>Rivara, F. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Persistence+of+disability+24+to+36+months+after+pediatric+traumatic+brain+injury%3A+a+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Persistence of disability 24 to 36 months after pediatric traumatic brain injury: a cohort study.</a> J Neurotrauma. 29 (15), 2499-2504 (2012).</li>
<li>Fesharaki-Zadeh, A., Datta, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+overview+of+preclinical+models+of+traumatic+brain+injury+%28TBI%29%3A+Relevance+to+pathophysiological+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Neurosci%22%5BJournal%5D)">An overview of preclinical models of traumatic brain injury (TBI): Relevance to pathophysiological mechanisms.</a> Front Cell Neurosci. 18, (2024).</li>
<li>Panchenko, P. E., Hippauf, L., Konsman, J. P., Badaut, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Do+astrocytes+act+as+immune+cells+after+pediatric+TBI%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Dis%22%5BJournal%5D)">Do astrocytes act as immune cells after pediatric TBI.</a> Neurobiol Dis. 185, 106231(2023).</li>
<li>Kochanek, P. M., Wallisch, J. S., Bayır, H., Clark, R. S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pre-clinical+models+in+pediatric+traumatic+brain+injury-challenges+and+lessons+learned%5BTitle%5D)+AND+%22Childs+Nerv+Syst%22%5BJournal%5D)">Pre-clinical models in pediatric traumatic brain injury-challenges and lessons learned.</a> Childs Nerv Syst. 33 (10), 1693-1701 (2017).</li>
<li>Smith, A. M., Grayson, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+strike+to+the+head%3A+Parallels+between+the+pediatric+and+adult+human+and+the+rodent+in+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">A strike to the head: Parallels between the pediatric and adult human and the rodent in traumatic brain injury.</a> J Neurosci Res. 102 (7), e25364(2024).</li>
<li>McNamara, E. H., Grillakis, A. A., Tucker, L. B., McCabe, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+closed-head+impact+model+of+engineered+rotational+acceleration+%28CHIMERA%29+as+an+application+for+traumatic+brain+injury+pre-clinical+research%3A+A+status+report%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">The closed-head impact model of engineered rotational acceleration (CHIMERA) as an application for traumatic brain injury pre-clinical research: A status report.</a> Exp Neurol. 333, 113409(2020).</li>
<li>Bodnar, C. N., Roberts, K. N., Higgins, E. K., Bachstetter, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systematic+review+of+closed-head+injury+models+of+mild+traumatic+brain+injury+in+mice+and+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">A systematic review of closed-head injury models of mild traumatic brain injury in mice and rats.</a> J Neurotrauma. 36 (11), 1683-1706 (2019).</li>
<li>Semple, B. D., Blomgren, K., Gimlin, K., Ferriero, D. M., Noble-Haeusslein, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+development+in+rodents+and+humans%3A+Identifying+benchmarks+of+maturation+and+vulnerability+to+injury+across+species%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Brain development in rodents and humans: Identifying benchmarks of maturation and vulnerability to injury across species.</a> Prog Neurobiol. 106-107, 1-16 (2013).</li>
<li>Rodriguez-Grande, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gliovascular+changes+precede+white+matter+damage+and+long-term+disorders+in+juvenile+mild+closed+head+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Glia%22%5BJournal%5D)">Gliovascular changes precede white matter damage and long-term disorders in juvenile mild closed head injury.</a> Glia. 66 (8), 1663-1677 (2018).</li>
<li>Ichkova, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+cerebrovascular+and+long-term+neurological+modifications+ensue+following+juvenile+mild+traumatic+brain+injury+in+male+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Dis%22%5BJournal%5D)">Early cerebrovascular and long-term neurological modifications ensue following juvenile mild traumatic brain injury in male mice.</a> Neurobiol Dis. 141, 104952(2020).</li>
<li>Badaut, J., et al. Endocannabinoid-mediated rescue of somatosensory cortex activity, plasticity and related behaviors following an early in life concussion. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBadaut%2C+J+%22bioRxiv%22">bioRxiv</a>. , (2024).</li>
<li>Leyba, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurovascular+hypoxia+after+mild+traumatic+brain+injury+in+juvenile+mice+correlates+with+heart-brain+dysfunctions+in+adulthood%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Physiol%22%5BJournal%5D)">Neurovascular hypoxia after mild traumatic brain injury in juvenile mice correlates with heart-brain dysfunctions in adulthood.</a> Acta Physiol. 238 (2), e13933(2023).</li>
<li>Obenaus, A., et al. Progressive lifespan modifications in the corpus callosum following a single juvenile concussion in male mice monitored by diffusion MRI. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aObenaus%2C+A+%22bioRxiv%22">bioRxiv</a>. , (2023).</li>
<li>Schindelin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fiji%3A+An+open-source+platform+for+biological-image+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Fiji: An open-source platform for biological-image analysis.</a> Nat Methods. 9 (7), 676-682 (2012).</li>
<li>Clément, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Juvenile+mild+traumatic+brain+injury+elicits+distinct+spatiotemporal+astrocyte+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Glia%22%5BJournal%5D)">Juvenile mild traumatic brain injury elicits distinct spatiotemporal astrocyte responses.</a> Glia. 68 (3), 528-542 (2020).</li>
<li>Drieu, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Persistent+neuroinflammation+and+behavioural+deficits+after+single+mild+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Persistent neuroinflammation and behavioural deficits after single mild traumatic brain injury.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 42 (12), 2216-2229 (2022).</li>
<li>Obenaus, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+single+mild+juvenile+TBI+in+male+mice+leads+to+regional+brain+tissue+abnormalities+at+12+months+of+age+that+correlate+with+cognitive+impairment+at+the+middle+age%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathol+Commun%22%5BJournal%5D)">A single mild juvenile TBI in male mice leads to regional brain tissue abnormalities at 12 months of age that correlate with cognitive impairment at the middle age.</a> Acta Neuropathol Commun. 11 (1), 32(2023).</li>
<li>Ryan, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Traumatic+brain+injury+in+children%3A+Glial+fibrillary+acidic+protein+and+clinical+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr+Emerg+Care%22%5BJournal%5D)">Traumatic brain injury in children: Glial fibrillary acidic protein and clinical outcomes.</a> Pediatr Emerg Care. 38 (3), e1139-e1142 (2022).</li>
<li>Czeiter, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+biomarkers+on+admission+in+acute+traumatic+brain+injury%3A+Relations+to+severity%2C+CT+findings+and+care+path+in+the+CENTER-TBI+study%5BTitle%5D)+AND+%22EBioMedicine%22%5BJournal%5D)">Blood biomarkers on admission in acute traumatic brain injury: Relations to severity, CT findings and care path in the CENTER-TBI study.</a> EBioMedicine. 56, 102785(2020).</li>
<li>Edwards, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serum+GFAP%2C+NfL%2C+and+tau+concentrations+are+associated+with+worse+neurobehavioral+functioning+following+mild%2C+moderate%2C+and+severe+TBI%3A+A+cross-sectional+multiple-cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurol%22%5BJournal%5D)">Serum GFAP, NfL, and tau concentrations are associated with worse neurobehavioral functioning following mild, moderate, and severe TBI: A cross-sectional multiple-cohort study.</a> Front Neurol. 14, 1223960(2023).</li>
<li>Smith, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-fat+diet+consumption+negatively+influences+closed-head+traumatic+brain+injury+in+a+pediatric+rodent+model%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">High-fat diet consumption negatively influences closed-head traumatic brain injury in a pediatric rodent model.</a> Exp Neurol. 379, 114888(2024).</li>
<li>Hunniford, V. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systematic+assessment+of+preclinical+multilaboratory+studies+and+a+comparison+to+single+laboratory+studies%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">A systematic assessment of preclinical multilaboratory studies and a comparison to single laboratory studies.</a> eLife. 12, e76300(2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>BSA</td><td>Sigma Aldrich Chimie S.a.r.l 80 Rue de Luzais L'lsle-d'Abeau Chesnes - BP701 38297 Saint-Quentin-Fallavier Cedex צרפת</td><td>A7030</td><td></td></tr><tr><td>C57Bl6J עכברים&nbsp;</td><td>מעבדת נהר צ'ארלס צרפת CRLF 9 All. מולן ברגר, 69130 ואקוטי; קולי, צרפת</td><td></td><td>בורדו</td></tr><tr><td>אימפקטור אלקטרומגנטי</td><td>Leica Biosystems, ריצ'מונד, אילינוי ארה"ב</td><td>אימפקטור סטריאוטקסי</td><td></td>אחד</tr><tr><td>מיקרוסקופ אפיפלואורסצנטי</td><td>אולימפוס, BX41, סנטר ואלי, פנסילבניה</td><td></td><td></td></tr><tr><td>אתילן גליקול</td><td>סיגמא אולדריץ' צ'ימי S.a.r.l 80 Rue de Luzais L'lsle-d'Abeau Chesnes - BP701 38297 Saint-Quentin-Fallavier Cedex צרפת</td><td>102466</td><td></td></tr><tr><td>נוגדן ראשוני GFAP</td><td>Millipore, Billerica, MA</td><td>AB5541</td><td>נוגדן משני עוף נגד GFAP</td></tr><tr><td>GFAP</td><td>בדיקות מולקולריות, Invitrogen</td><td>A11034</td><td>עיזים נגד ארנב AlexaFluor&nbsp; 488</td></tr><tr><td>Glycerol</td><td>Sigma Aldrich Chimie S.a.r.l 80 Rue de Luzais L'lsle-d'Abeau Chesnes - BP701 38297 Saint-Quentin-Fallavier Cedex צרפת</td><td>G5516</td><td></td></tr><tr><td>רדיד אלומיניום כבד</td><td>קירקלנד</td><td>RK611</td><td>שהושג בתוכנת Cosco</td></tr><tr><td>Micromanager&nbsp;</td><td>(NIH, ארה"ב</td><td></td><td></td></tr><tr><td>נוגדן ראשוני NeuN</td><td>AbCam, דיסקברי דרייב, קיימברידג' קמפוס ביו-רפואי, קיימברידג', CB2 0AX, בריטניה</td><td>AB128886</td><td>ארנב אנטי-NeuN</td></tr><tr><td>נוגדן משני</td><td>בדיקות מולקולריות, Invitrogen</td><td>A11041</td><td>עז אנטי-עוף AlexaFluor 568</td></tr><tr><td>PBS</td><td>Sigma Aldrich Chimie S.a.r.l 80 Rue de Luzais L'lsle-d'Abeau Chesnes - BP701 38297 Saint-Quentin-Fallavier Cedex France</td><td>P5493</td><td></td></tr><tr><td>PFA</td><td>Sigma Aldrich Chimie S.a.r.l 80 Rue de Luzais L'lsle-d'Abeau Chesnes - BP701 38297 Saint-Quentin-Fallavier Cedex צרפת</td><td>1.04003</td><td></td></tr><tr><td>סודיום אזיד</td><td>Sigma Aldrich Chimie S.a.r.l 80 Rue de Luzais L'lsle-d'Abeau Chesnes - BP701 38297 Saint-Quentin-Fallavier Cedex France</td><td>26628-22-8</td><td></td></tr><tr><td>מסגרת סטריאוטקסית - כלי KOPF בסיסיים</td><td>7324 Elmo St, Tujunga, CA 91042, &Eacute; tats-Unis</td><td>900-C</td><td></td></tr><tr><td>מסגרת סטריאוטקסית - מניפולטור אלקטרודות</td><td>מכשירי KOPF 7324 Elmo St, Tujunga, CA 91042, &Eacute; tats-Unis</td><td>960</td><td></td></tr><tr><td>מסגרת סטריאוטקסית - מכשירי</td><td>KOPF מסגרת U 7324 Elmo St, Tujunga, CA 91042, ו-Eacute; tats-Unis</td><td>900-U</td><td></td></tr><tr><td>Triton x-100</td><td>Sigma Aldrich Chimie S.a.r.l 80 Rue de Luzais L'lsle-d'Abeau Chesnes - BP701 38297 Saint-Quentin-Fallavier Cedex France</td><td>X100</td><td></td></tr><tr><td>Vectashield</td><td>Vector laboratories</td><td>H-1000-10</td><td>Mounting</td></tr><tr><td>medium Vibratome</td><td>Leica Biosystems, ריצ'מונד, אילינוי, ארה"ב</td><td>VTS1000</td><td></td></tr><tr><td></td><td>מעבדת ג'קסון מעבדת ג'קסון 600 מיין סטריט בר הרבור, מיין ארה"ב 04609</td><td></td><td>UCR</td></tr></tbody></table>

מודל זעזוע מוח בילדים בעכברים: פגיעת ראש סגורה עם הפרעות ארוכות טווח (child) 

A Pediatric Concussion Model in Mice: Closed Head Injury with Long-Term Disorders (CHILD)

מודל CHILD הוא מודל מהיר יחסית וניתן לשחזור של mTBI בעכברים ילדים, המאפשר גם שינויים בחומרה ובמיקום. עכברי CHILD, כצפוי, הציגו זמני החלמה ארוכים יותר באופן משמעותי מפגיעת ראש סגורה (איור 3). כאשר נצברו קוהורטים (n = 36 נקבת שאם, n = 140 בושה זכרית, n = 30 נקבה G1, n = 55 זכר G1, n = 32 נקבה G2, n = 141 זכר G2), נצפה עיכוב בזמן התיקון (איור 3A, ANOVA 3-way p &lt; 0.001) ובזמן לחידוש התנהגויות גישוש (איור 3B, 3-way ANOVA ...

מודל זעזוע מוח בילדים בעכברים: פגיעת ראש סגורה עם הפרעות ארוכות טווח (CHILD) 

Concussions and mild traumatic brain injuries (mTBI) during childhood represent a significant health endangerment, with many patients later in life ...

a-pediatric-concussion-model-mice-closed-head-injury-with-long-term

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

מקור: Yang, Z., et.al. מודל פגיעת ראש חוזרת בעכברים. J. Vis. Exp. (2016). סרטון זה מדגים את השראת פגיעות ראש חוזרות ונשנות בעכבר באמצעות מכשיר פגיעה אלקטרומגנטי. ההליך כולל מיקום קצה הפגיעה בין התפרים הבין-פרונטליים והלמבדואידים על גולגולתו של עכבר מורדם ושימוש בקצה בדיקה כדי להגדיר במדויק את עומק הפגיעה. הפגיעה מועברת במהירות ובעומק מבוקרים כדי לדמות פגיעות מוח טראומטיות קלות, ולאחר מכן תקופת החלמה, כאשר הפציעות חוזרות על עצמן במרווחי זמן מוגדרים.

מידול פציעות ראש חוזרות ונשנות של זעזוע מוח במודל עכבר

זעזוע מוח מציג את הסוג הנפוץ ביותר של פגיעה מוחית טראומטית. לכן, מודל של בעלי חיים עם זעזוע מוח חוזר, המשכפל את המאפיינים החשובים של פציעה במטופלים, עשוי לספק אמצעי לחקר זעזוע מוח בצורה קפדנית, מבוקרת ויעילה.

מודל פגיע ראש החוזרים מזעזע של עכברים

הספורטאים סופגים כמה מאות פציעות מוחיות טראומטיות קלות (mTBI) / זעזוע מוח מדי שנה; עם זאת, את התוצאות של אלה על המוח הוא הבין היטב. לכן, מודל החיות של mTBI יחיד וחוזר על עצמו באופן עקבי משכפל סימפטומים קליניים רלוונטיים מספק את האמצעים לקדם את המחקר של mTBI ו זעזוע מוח.

דגם עכבר של פגיעה בודדת וחזרה קלה של פגיעה מוחית טראומטית

הפרוטוקול מתאר פגיעה מוחית טראומטית קלה במודל עכבר. בפרט, פרוטוקול שלב אחר שלב לגרימת פגיעת ראש סגורה קלה בקו האמצע ואפיון מודל בעלי החיים מוסבר במלואו.

מודל ראש סגור מבוקר אלקטרומגנטי של פגיעה מוחית טראומטית קלה בעכברים

במאמר זה אנו מציגים מודל של פגיעה מוחית טראומטית קלה (mTBI) בראש סגור, ואת התיקוף שלו המציג דמיון יוצא דופן ל-mTBI האנושי בנוגע לביטויים התנהגותיים במהלך השלבים החריפים והתת-חריפים.

מודל חולדה של פגיעה טראומטית קלה בראש סגור ותיקוף שלה

פרוטוקול זה מציג מודל עכברי שונה של פגיעה מוחית טראומטית קלה חוזרת ונשנית (rmTBI) הנגרמת באמצעות שיטת פגיעת ראש סגור (CHI). הגישה כוללת חלון גולגולת דליל וכלי הקשה נוזליים כדי להפחית את הדלקת הנגרמת בדרך כלל על ידי חשיפה לקרומי המוח, יחד עם שיפור יכולת השחזור והדיוק במידול rmTBI במכרסמים.

מודל עכבר שונה של פגיעה מוחית טראומטית קלה חוזרת ונשנית המשלבת חלון גולגולת דליל וכלי הקשה נוזליים

כאן אנו מתארים readout מולקולרי של הסתגלות חוש ריח לטווח הארוך...

Readout מולקולרי של הסתגלות חוש ריח לטווח הארוך ב<em&gt; ג elegans</em

תאי ensheathing חוש ריח (OECs) הם תאי רכס עצביים המאפשרים צמיחה של תאי עצב ההרחה הראשוניים. נכס ספציפי זה יכול לשמש להשתלת תאים. אנו מציגים כאן מודל של השתלה סלולרית המבוסס על השימוש בOECs במודל פציעת עצב בגרון.

השתלה של תאי ensheathing חוש ריח להערכת החלמה תפקודית לאחר פגיעה עצבית היקפית

הדמיה חיה של שבלול האוזן של יונקים העובריים היא מאתגרת, כי התהליכים התפתחותיים ביד פועלים על שיפוע זמני על עשרה ימים. כאן אנו מציגים שיטה culturing ולאחר מכן ההדמיה רקמות explant השבלול עוברית שנלקחו מעכבר כתב ניאון בחמישה ימים.

לטווח ארוך זמן פקיעת הדמיה של Explants שבלול העכבר

כאן אנו מתארים שיטה לגרום פגיעת ראש סגור מוח הטראומתי (TBI) בדרוזופילה. שיטה זו מספקת שער לחקור את המנגנונים התאיים ומולקולריים העומדים בבסיס פתולוגיות TBI באמצעות המגוון הרחב של כלים וטכניקות ניסיוניים זמינים לזבובים.

שיטה לגרום סגור ראש הפגיעה מוחית טראומטית ב<em&gt; דרוזופילה</em

חקור את מודל CHILD לפגיעת ראש סגורה בעכברים צעירים לחקר השלכות ארוכות הטווח של זעזוע מוח בילדים. שיטה זו מאפשרת הערכת שינויים נוירואינפלמטוריים והתנהגותיים לאורך זמן.

מודל זעזוע מוח בילדים בעכברים: פגיעת ראש סגורה עם הפרעות ארוכות טווח (CHILD)

גלה סרטונים נוספים