Name: קביעת ארבעה רכיבים במערכת אספקת RNA של ננו-חלקיקי שומנים על ידי כרומטוגרפיה נוזלית בשילוב גלאי פיזור אור אידוי (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-30T12:50:00.000+00:00
Duration: 8 min 54 s
Description: חקור שיטת HPLC עם ELSD לניתוח רכיבי ננו-חלקיקי שומנים במערכות אספקת RNA. השיטה מספקת הפרדה מצוינת ורגישות גבוהה לקביעת ארבעת הרכיבים ב-LNPs.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Zong, Y., Lin, Y., Wei, T., Cheng, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipid+nanoparticle+%28LNP%29+enables+mRNA+delivery+for+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Mater%22%5BJournal%5D)">Lipid nanoparticle (LNP) enables mRNA delivery for cancer therapy.</a> Adv Mater. 35 (51), e2303261(2023).</li>
<li>Vlatko, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-immunotherapy+application+of+LNP-mRNA%3A+Maximizing+efficacy+and+safety%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedicines%22%5BJournal%5D)">Non-immunotherapy application of LNP-mRNA: Maximizing efficacy and safety.</a> Biomedicines. 9 (5), 530(2021).</li>
<li>Eygeris, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemistry+of+lipid+nanoparticles+for+RNA+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Acc+Chem+Res%22%5BJournal%5D)">Chemistry of lipid nanoparticles for RNA delivery.</a> Acc Chem Res. 55 (1), 2-12 (2021).</li>
<li>Sun, D., Lu, Z. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+and+function+of+cationic+and+ionizable+lipids+for+nucleic+acid+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Pharm+Res%22%5BJournal%5D)">Structure and function of cationic and ionizable lipids for nucleic acid delivery.</a> Pharm Res. 40 (1), 27-46 (2023).</li>
<li>Rebecca, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipid+nanoparticle+formulations+for+enhanced+co-delivery+of+siRNA+and+mRNA%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Lett%22%5BJournal%5D)">Lipid nanoparticle formulations for enhanced co-delivery of siRNA and mRNA.</a> Nano Lett. 18 (6), 3814-3822 (2018).</li>
<li>Maugeri, M., Nawaz, M., Papadimitriou, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Linkage+between+endosomal+escape+of+LNP-mRNA+and+loading+into+EVs+for+transport+to+other+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Linkage between endosomal escape of LNP-mRNA and loading into EVs for transport to other cells.</a> Nat Commun. 10, 4333(2019).</li>
<li>Renee, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+PEGylation+on+LNP+based+mRNA+delivery+to+the+eye%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">The effects of PEGylation on LNP based mRNA delivery to the eye.</a> PLoS One. 15 (10), e0241006(2020).</li>
<li>Benedicto, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+phospholipid+chemistry+for+improved+lipid+nanoparticle+%28LNP%29+delivery+of+messenger+RNA+%28mRNA%29%5BTitle%5D)+AND+%22Biomater+Sci%22%5BJournal%5D)">Optimization of phospholipid chemistry for improved lipid nanoparticle (LNP) delivery of messenger RNA (mRNA).</a> Biomater Sci. 10 (2), 549-559 (2022).</li>
<li>Kamanzi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+visualization+of+lipid+nanoparticle+fusion+as+a+function+of+formulation+and+process+parameters%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">Quantitative visualization of lipid nanoparticle fusion as a function of formulation and process parameters.</a> ACS Nano. 18 (28), 18191-18201 (2024).</li>
<li>Melissa, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+lipid+nanoparticles+for+the+delivery+of+nebulized+therapeutic+mRNA+to+the+lungs%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">Optimization of lipid nanoparticles for the delivery of nebulized therapeutic mRNA to the lungs.</a> Nat Biomed Eng. 5 (9), 1059-1068 (2021).</li>
<li>Packer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+mechanism+for+the+loss+of+mRNA+activity+in+lipid+nanoparticle+delivery+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">A novel mechanism for the loss of mRNA activity in lipid nanoparticle delivery systems.</a> Nat Commun. 12 (1), 6777(2021).</li>
<li>Snyder, L. R., Kirkland, J. J., Dolan, J. W. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSnyder%2C+LR+%22Introduction+to+Modern+Liquid+Chromatography%22">Introduction to Modern Liquid Chromatography</a>. , John Wiley & Sons. Hoboken, NJ. (2010).</li>
<li>Zhang, L. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+mRNA-LNP+components+of+two+globally+marketed+COVID-19+vaccines+on+efficacy+and+stability%5BTitle%5D)+AND+%22NPJ+Vaccines%22%5BJournal%5D)">Effect of mRNA-LNP components of two globally marketed COVID-19 vaccines on efficacy and stability.</a> NPJ Vaccines. 8 (1), 156(2023).</li>
<li>Zhang, Y., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performance+comparison+of+different+ELSD+detectors+in+pharmaceutical+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Methods%22%5BJournal%5D)">Performance comparison of different ELSD detectors in pharmaceutical analysis.</a> Anal Methods. 7 (12), 4800-4807 (2015).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>חומצה אצטית</td><td>ANPEL Laboratory Technologies (שנחאי) בע"מ</td><td>CAEQ-4-000319-0050</td><td></td></tr><tr><td>איזון</td><td>Shimadzu (שנחאי) מעבדה גלובלית מתכלים ושות', בע"מ</td><td>AP135W</td><td></td></tr><tr><td>טור</td><td>Shimadzu (שנחאי) מעבדה גלובלית מתכלים ושות', בע"מ</td><td>ShimNex WP C4 (380-01235-74)</td><td></td></tr> <tr><td>ELSD</td><td>Shimadzu (סין) ושות', בע"מ</td><td>ELSD-LT III (228-65900-46)</td><td></td></tr> <tr><td>LabSolutions תוכנה</td><td>Shimadzu (סין) ושות', בע"מ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>LC</td><td>Shimadzu (סין) ושות', בע"מ</td><td>LC40D XR</td><td></td></tr><tr><td>מתנול</td><td>ANPEL מעבדה טכנולוגיות (שנחאי) בע"מ</td><td>CAEQ-4-003302-4000</td><td></td></tr><tr><td>פיפטה-100 ומיקרו; L</td><td>Shimadzu (שנחאי) מעבדה גלובלית חומרים מתכלים ושות', בע"מ</td><td>00-NAR-100</td><td></td></tr><tr><td>פיפטה-1000 ומיקרו; L</td><td>Shimadzu (שנחאי) מעבדה גלובלית חומרים מתכלים ושות', בע"מ</td><td>00-NAR-1000</td><td></td></tr><tr><td>TEA</td><td>ANPEL Laboratory Technologies (שנחאי) בע"מ</td><td>CAEQ-4-012190-0250</td><td></td></tr><tr><td>מערכת מים טהורה במיוחד</td><td>Millipore</td><td>ZIQ7000T0C</td><td></td></tr><tr><td>מערבל מערבולת</td><td>ANPEL Laboratory Technologies (שנחאי) בע"מ</td><td>VM-B</td><td></td></tr></tbody></table>

קביעת ארבעה רכיבים במערכת אספקת rna של ננו-חלקיקי שומנים על ידי כרומטוגרפיה נוזלית בשילוב גלאי פיזור אור אידוי

Determining Four Components in a Lipid Nanoparticle RNA Delivery System by Liquid Chromatography Combined with Evaporative Light Scattering Detector

ניתוח הפתרון הסטנדרטי של LNP בשיטה זו השיג דרגת הפרדה גדולה מ-1.5 עבור ארבעת הרכיבים, תוך מימוש הפרדה בסיסית. יתר על כן, לא נצפו שאריות בתמיסות סטנדרטיות בריכוז גבוה, כפי שמתואר באיור 1. עקומת כיול נקבעה בטווח ריכוז של 5 עד 250 מיקרוגרם/מ"ל, המציגה מקדמי מתאם העולים כולם על 0.999, מה שמעיד על טווח ליניארי רחב וליניאריות מצוינת. עקומת הכיול מודגמת באיור 2.
כדי לבחון את יכולת השחזור של השיטה, הוזרקה שוב ושוב תמיסה סטנדרטית בריכוז של 10 ...

קביעת ארבעה רכיבים במערכת אספקת RNA של ננו-חלקיקי שומנים על ידי כרומטוגרפיה נוזלית בשילוב גלאי פיזור אור אידוי

This article presents a method for the analysis of lipid nanoparticle (LNP) components. LNP, serving as a pivotal vector for RNA-based drugs, primarily ...

determining-four-components-lipid-nanoparticle-rna-delivery-system

Research

JoVE Journal

Biochemistry

ביוכימיה

פרוטוקול זה מתאר שיטה שחול להכנת שלפוחית ​​השומנים של מיקרון משנה גדלים עם רמה גבוהה של הומוגניות. שיטה זו משתמשת במערכת לחץ מבוקר עם מבוקרים זרימת שיעורי חנקן להכנת liposome. הכנה שומנים...

שחול קבוע לחץ שבשליטת שיטה להכנת בגודל ננו שלפוחית ​​שומנים

פרוטוקול לניתוח nanoparticle מעקב (נ.ת. ע) והזרימה cytometry תפוקה גבוהה להעריך חלקיקים פולימריים גן משלוח מתואר. נת"ע מנוצל כדי לאפיין את התפלגות גודל חלקיקי nanoparticle והפצת החלקיקים לפלסמיד. cytometry זרימת תפוקה גבוהה מאפשר הערכת יעילות transfection כמוני לספרייה של biomaterials מסירת הגן.

הערכת משלוח גן פולימרית חלקיקים על ידי Nanoparticle מעקב ניתוח וזרימת cytometry תפוקה גבוהה

במחקר זה תוארה שיטה לסינתזה של אוכלוסיות קטנות במיוחד של ננו-חלקיקים תואמים ביולוגית, כמו גם מספר שיטות מבחנה שבאמצעותן ניתן להעריך את האינטראקציות התאיות שלהם.

מוצקים שומנים חלקיקים (SLNs) אפליקציות לתאיות מיקוד

הפרוטוקול המוצג מתאר את הניתוח של הובלה מתווכת חלבון ממברנה ברמת הטרנספורטר היחיד באמצעות שכבות דו-שכבתיות נטולות שומנים נטולות ממס המשתרעות על פני נקבוביות. זה מושג על ידי יצירת שבבי מערך ננו-נקבוביות המיוצרים בתפזורת, בשילוב עם איסוף וניתוח נתונים מקבילים ביותר, המאפשרים הקמה עתידית של הקרנות אפקטור חלבון ממברנה.

תחבורת ממברנה תהליכים נותחה על ידי מערכת שבב nanopore מקבילה מאוד ברזולוצית חלבון יחידה

טיפות ליפידים הם אברונים חשובים עבור שכפול של מספר פתוגנים, כולל וירוס הפטיטיס C (HCV). אנו מתארים שיטה לבודד טיפות השומנים עבור ספקטרומטריית מסה כמותית של חלבונים הקשורים; ניתן להשתמש בו תחת מגוון של תנאים, כגון זיהום וירוס, לחץ סביבתי, או טיפול תרופתי.

בידוד אגל ליפידים על ניתוח כמותי ספקטרומטריית מסה

מאמר זה מתאר את ומגעים falcarindiol ב מצופים השומנים חלקיקים nm 74. ספיגת הסלולר של חלקיקים באמצעות תאי גזע אנושי לתוך טיפות השומנים מנוטרת על ידי הדמיה פלורסנט, קונפוקלי. חלקיקים מיוצרים בשיטת הזרקת מהירה של הממס הסטה, הגודל שלהם נמדד עם טכניקה פיזור אור דינאמי.

ספיגת של חלקיקים חדשים מצופים השומנים, המכיל Falcarindiol על ידי גזע אנושי Mesenchymal

פרוטוקול זה מתאר את הייצור של ליפוזומים וכיצד ניתן להשתמש בקיבוע על פני השטח ולעבור באופן אינדיבידואלי בצורה מקבילה מסיבית תוך שימוש במיקרוסקופיה פלואורסצנטית. הדבר מאפשר לכמת את הגודל והאחידות בין ליפוזומים בודדים של האוכלוסייה.

מיקרוסקופ כמותי מיקרופלואורסצנטית בודד מבוססי ליפומה שיטת הזיהוי של הומוגניות בין ליפוזומים בודדים

חלקיקי שומנים מפותחים באמצעות גישה פלטפורמת ערבוב microfluidic עבור mRNA ו- DNA אנקפסולציה.

גיבוש ואפיון חלקיקי שומנים בדם לאספקת גנים באמצעות פלטפורמת ערבוב מיקרופלואידית

אנו מדגימים כיצד להשתמש במכשיר ניתוח ננו-חלקיקים חדשני כדי להעריך את התפלגות הגודל ואת ריכוז החלקיקים הכולל של שלל חוץ תאי מבודד רקמת שומן perigonadal עכבר ופלזמה אנושית.

ניתוח מעקב חלקיקים לכימות וקביעת גודל של שלל חוץ-תאי

כאן מוצג פרוטוקול לניסוח ננו-חלקיקי שומנים (LNPs) המכילים mRNA המקודד לוציפראז גחלילית. LNPs אלה נבדקו על עוצמתם במבחנה בתאי HepG2 ו-in vivo בעכברי C57BL/6.

בדיקת יעילות In Vitro ו-In Vivo של ננו-חלקיקי mRNA-ליפידים שנוסחו על ידי ערבוב מיקרופלואידי

הודגם פרוטוקול מפורט לסינתזה של ננו-חלקיקי שומנים (LNPs) באמצעות טכנולוגיות מיקסר סילון פוגע כלוא (CIJ), כולל CIJ דו-סילוני ומערבל מערבולות רב-סילוני בעל ארבעה סילונים (μMIVM). מערבלי CIJ יוצרים סביבות מיקרו-ערבוב טורבולנטיות הניתנות לשחזור, וכתוצאה מכך מייצרים LNPs חד-מפוזרים.

סינתזה של ננו-חלקיקי שומנים על ידי זרימה טורבולנטית במערבלי סילון פוגעים מוגבלים

חקור שיטת HPLC עם ELSD לניתוח רכיבי ננו-חלקיקי שומנים במערכות אספקת RNA. השיטה מספקת הפרדה מצוינת ורגישות גבוהה לקביעת ארבעת הרכיבים ב-LNPs.

קביעת ארבעה רכיבים במערכת אספקת RNA של ננו-חלקיקי שומנים על ידי כרומטוגרפיה נוזלית בשילוב גלאי פיזור אור אידוי

גלה סרטונים נוספים