מודל עכבר פצע דקירה לחקר דימום ודלקת בפגיעה מוחית טראומטית

מודלים פשוטים של פגיעה מוחית טראומטית (TBI) הקלו על פיתוח גישות טיפוליות. פרוטוקול זה מתאר את היצירה של קליפת עכבר פצוע דקירה באמצעות מחטים, המאפשרת ניתוח של דימום ודלקת. מודל עכבר TBI פצוע דקירה מציע את היתרון של ביצוע ללא צורך בציוד מיוחד.

אנו מעוניינים לפתח שיטה לעצירת דימום ודיכוי דלקת ב-TVI, ולכן הקמנו פרוטוקול ליצירת מודל מסה של TVI בקלות באמצעות מחט בלבד. מודל ה-TVI של פצע הדקירה שלנו מועיל מכיוון שהוא משמן דימום והפעלה אפורה. לפרוטוקול שלנו שלושה יתרונות עיקריים בהשוואה לטכניקות אחרות.

אין צורך בציוד או כלים ספציפיים. ניתן לעשות זאת בקלות ובמהירות, והפצע כל כך זעיר שהוא לא משפיע על התנהגות העכבר, כך שכל אחד יכול לבצע זאת עם יכולת שחזור גבוהה. המעבדה שלנו תתמקד בתקשורת בין נוירונים, תאים אפורים ותאי גליה, וטפילים במהלך תיקון פגיעה מוחית טראומטית.

התקשורת ממלאת תפקיד קריטי בתיקון. עם זאת, זה לא מובן לגמרי עד כה. הפרוטוקול שלנו שימושי מאוד לניתוח תקשורת.

כדי להתחיל, הניחו את העכבר המורדם על צד הגחון שלו על מגבת נייר. ודא שהעכבר מורדם עמוק באמצעות בדיקת צביטה בבוהן. חיטוי אתר הניתוח על ידי סבבים לסירוגין של בטדין וקרצוף אתנול 70% שלוש פעמים כל אחד.

כעת, אחוז בעור העורף בעזרת מלקחיים קהים ובצע חתך ברוחב של 1 עד 1.5 מילימטר כדי לחשוף את עצם העורף מבלי לפגוע בגולגולת או באיבר כלשהו. לאחר מכן פתח בעדינות ובאיטיות את החתך כדי להתבונן בגבול בין קליפת המוח למוח הקטן דרך הגולגולת. כדי לבצע קרניוטומיה של עכבר, צור חור קטן בהמיספרה הימנית של עצם העורף בעזרת מחט.

סובב בעדינות את המחט כדי ליצור נקודת החדרה למחט פצע דקירה, תוך הקפדה לא לפגוע בפרנכימה המוחית. עבור פצע הדקירה, הכנס את המחט המתאימה מנקודת ההחדרה ודקר את קליפת המוח לאורך ציר הזנב הרוסטרלי. לבסוף, תפר את חתך העור באמצעות תפר ניילון 3-0 עם מחט בצורת חצי עגול.

הפצע לאחר ההליך אושר במיקרוסקופיה. אקסטרוואזציה של IGG הגיעה לשיאה יום לאחר הפציעה, ואחריה התאוששות הדרגתית, וירידה בעוצמת הכתמים לאחר שלושה, חמישה ושבעה ימים. דליפת הצבע הכחול של אוון לפרנכימה של המוח התרחשה מיד לאחר הפציעה, כאשר ריכוזו הגיע לשיא של שעה.

ריכוז הצבע ירד בהדרגה לאחר יום ושלושה ימים. הצטברות שיא של מיקרוגליה חיובית IBA1 ואסטרוציטים חיוביים ל-GFAP התרחשה חמישה ושלושה ימים לאחר הפציעה, בהתאמה, כאשר נוכחותם פחתה בשבעה ימים. ציטוקינים דלקתיים, כולל גורם נמק גידול אלפא, אינטרלוקין שש ואינטרלוקין בטא אחד הראו ביטוי שיא של mRNA יום אחד לאחר הפציעה, בעוד ששינוי גורם הגדילה בטא 1 הגיע לשיא שלושה ימים לאחר הפציעה.