Name: הדמיית תאים חיים עם צילום בהילוך מהיר לחקר קינטיקה של התפשטות קרטינוציטים באפידרמיס (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-06T13:20:00.000+00:00
Duration: 7 min 21 s
Description: חקור שיטת הדמיית תאים חיים לעקיבה אחרי קרטינוציטים באפידרמיס אנושי. טכניקה זו מאפשרת מדידת קצב חלוקה וגורל תאים לחקר מחלות עור כמו פסוריאזיס ותהליכי הזדקנות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Mateu, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+differences+between+neonatal+and+adult+fibroblasts+and+keratinocytes%3A+Donor+age+affects+epithelial-mesenchymal+crosstalk+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Functional differences between neonatal and adult fibroblasts and keratinocytes: Donor age affects epithelial-mesenchymal crosstalk in vitro.</a> Int J Mol Med. 38 (4), 1063-1074 (2016).</li>
<li>Handl, J., Čapek, J., Majtnerová, P., Báčová, J., Roušar, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+repeated+passaging+on+the+susceptibility+of+human+proximal+tubular+HK-2+cells+to+toxic+compounds%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Res%22%5BJournal%5D)">The effect of repeated passaging on the susceptibility of human proximal tubular HK-2 cells to toxic compounds.</a> Physiol Res. 69 (4), 731-738 (2020).</li>
<li>Moran, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+human+keratinocyte+cell+lines+for+barrier+studies%5BTitle%5D)+AND+%22JID+Innov%22%5BJournal%5D)">Characterization of human keratinocyte cell lines for barrier studies.</a> JID Innov. 1 (2), 100018(2021).</li>
<li>Seo, M. -D., Kang, T. J., Lee, C. H., Lee, A. -Y., Noh, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HaCaT+keratinocytes+and+primary+epidermal+keratinocytes+have+different+transcriptional+profiles+of+cornified+envelope-associated+genes+to+T+helper+cell+cytokines%5BTitle%5D)+AND+%22Biomol+Ther%22%5BJournal%5D)">HaCaT keratinocytes and primary epidermal keratinocytes have different transcriptional profiles of cornified envelope-associated genes to T helper cell cytokines.</a> Biomol Ther. 20 (2), 171-176 (2012).</li>
<li>Jahn, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Different+immortalized+keratinocyte+cell+lines+display+distinct+capabilities+to+differentiate+and+reconstitute+an+epidermis+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Different immortalized keratinocyte cell lines display distinct capabilities to differentiate and reconstitute an epidermis in vitro.</a> Exp Dermatol. 33 (1), e14985(2024).</li>
<li>Xiao, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short+cell+cycle+duration+is+a+phenotype+of+human+epidermal+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Short cell cycle duration is a phenotype of human epidermal stem cells.</a> Stem Cell Res Ther. 15 (1), 76(2024).</li>
<li>Hirose, T., Kotoku, J., Toki, F., Nishimura, E. K., Nanba, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Label-free+quality+control+and+identification+of+human+keratinocyte+stem+cells+by+deep+learning-based+automated+cell+tracking%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Label-free quality control and identification of human keratinocyte stem cells by deep learning-based automated cell tracking.</a> Stem Cells. 39 (8), 1091-1100 (2021).</li>
<li>Roshan, A., Murai, K., Fowler, J., Simons, B. D., Nikolaidou-Neokosmidou, V., Jones, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+keratinocytes+have+two+interconvertible+modes+of+proliferation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Human keratinocytes have two interconvertible modes of proliferation.</a> Nat Cell Biol. 18 (2), 145-156 (2016).</li>
<li>Abegaze, B., Ijeh, N., Vittimberga, B., Ghadially, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generating+primary+cultures+for+the+purpose+of+keratinocyte+live+cell+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Generating primary cultures for the purpose of keratinocyte live cell imaging.</a> J Vis Exp. , In Press (2024).</li>
<li>Piedrafita, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+single-progenitor+model+as+the+unifying+paradigm+of+epidermal+and+esophageal+epithelial+maintenance+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">A single-progenitor model as the unifying paradigm of epidermal and esophageal epithelial maintenance in mice.</a> Nat Commun. 11 (1), 1429(2020).</li>
<li>Ścieżyńska, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+culture+of+human+primary+keratinocytes-a+methods+review%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Isolation and culture of human primary keratinocytes-a methods review.</a> Exp Dermatol. 28 (2), 107-112 (2019).</li>
<li>Mansoury, M., Hamed, M., Karmustaji, R., Al Hannan, F., Safrany, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+edge+effect%3A+A+global+problem.+The+trouble+with+culturing+cells+in+96-well+plates%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Rep%22%5BJournal%5D)">The edge effect: A global problem. The trouble with culturing cells in 96-well plates.</a> Biochem Biophys Rep. 26, 100987(2021).</li>
<li>Malin-Mayor, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+reconstruction+of+whole-embryo+cell+lineages+by+learning+from+sparse+annotations%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Automated reconstruction of whole-embryo cell lineages by learning from sparse annotations.</a> Nat Biotechnol. 41 (1), 44-49 (2023).</li>
<li>Waliman, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+cell+lineage+reconstruction+using+label-free+4D+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Automated cell lineage reconstruction using label-free 4D microscopy.</a> Genetics. 228 (2), iyae135(2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>לוח 96 באר Imagelock</td><td>סארטוריוס</td><td>BA-04856</td><td>מומלץ מיקרופלטה תואמת למכונה אם משתמשים בפלטת באר 96.</td></tr><tr><td>לוח 24 בארות</td><td>קורנינג</td><td>3524</td><td>מומלץ מיקרופלטה תואמת למכונה אם משתמשים בפלטת 24 בארים.</td></tr><tr><td>אמפוטריצין B, 50 מ"ל</td><td>קורנינג</td><td>30-003-CF</td><td>מדלל ל-5x (מגיע במלאי פי 100) ל-5x PSA - פי 1 להחלפת מדיה</td></tr><tr><td>אפילייף, 50 מ"ל</td><td>גיבקו</td><td>MEP1500CA</td><td>הוסף את S7, נבחן פרימוצין</td></tr><tr><td>IncuCyte S3</td><td>סארטוריוס</td><td>4637</td><td>Imager (חלופות מקובלות לזום/SX5)</td></tr><tr><td>פניצילין/סטרפטומיצין, 100 מ"ל</td><td>קורנינג</td><td>30-002-Cl</td><td>מדלל ל-5x (מגיע במלאי פי 100)</td></tr><tr><td>פרימוסין</td><td>אינויווגן</td><td>אנט-PM-05</td><td>1 מ"ל לכל מדיה של 500 מ"ל</td></tr><tr><td>תוספת עונה 7</td><td>גיבקו</td><td>S0175</td><td>נוסף לאפי-חיים</td></tr></tbody></table>

הדמיית תאים חיים עם צילום בהילוך מהיר לחקר קינטיקה של התפשטות קרטינוציטים באפידרמיס

Live Cell Imaging with Time Lapse Photography to Study Epidermal Keratinocyte Proliferation Kinetics

Live-cell imaging is an evolving and somewhat challenging method to study keratinocyte behavior in vitro. Historically, keratinocyte division behavior was ...

live-cell-imaging-with-time-lapse-photography-to-study-epidermal

Research

JoVE Journal

Biochemistry

ביוכימיה

הרקמה העוברית הדמיה בזמן אמת הוא מאתגר לאורך תקופות זמן ארוכות. כאן אנו מציגים assay לניטור שינויים הסלולר משנה הסלולר בחוט השדרה חומוס לתקופות ארוכות עם רזולוציה גבוהה במרחב ובזמן. טכניקה זו יכולה להיות מותאם לאזורים אחרים של מערכת העצבים בעובר המתפתח.

ברזולוציה גבוהה הדמיה חיה של התנהגות התא ב Neuroepithelium פיתוח

אנו מתארים פרוטוקול באמצעות שקופיות קאמריות ותקשורת כדי לשתק פסיגי צמחים עבור הדמית confocal של האפידרמיס על פני כמה ימים של פיתוח, המתעד את בידול הפיוניות. חלבוני fluorophore מתויג-ניתן לעקוב באופן דינמי על ידי ביטוי ולוקליזציה subcellular, להגביר את ההבנה של התפקידים האפשריים שלהם במהלך חלוקת תאים והתמיינות תאים מסוג.

לטווח ארוך הדמיה, ברזולוציה גבוהה Confocal זמן פקיעה של<em&gt; טבורית ארבידופסיס</em&gt; אפידרמיס במהלך הנביטה

הדמית זמן לשגות משמשת כדי להעריך את ההתנהגות של תאים ראשוניים preneoplastic חלב האפיתל הנגזרים ממודלי עכבר מהונדס גנטי של סיכון לסרטן שד על מנת לקבוע אם יש קשר בין פרמטרים התנהגותיים ספציפיים ונגעים גנטיים מובחנים.

הדמית זמן לשגות של תאי אפיתל חלב Preneoplastic ראשוניים הנגזרת ממודלי עכבר מהונדס גנטי של סרטן השד

פרוטוקול זה מתאר את השימוש במיקרוסקופ multiphoton לבצע הדמית הזמן לשגות מורחבת של אינטראקציות רבות-תאי בזמן אמת, in vivo ברזולוצית תא בודד.

זמן לשגות Extended הדמיה Intravital של Dynamics תאיים בזמן אמת ב microenvironment הגידול

כאן, אנו מציגים את ניטור בזמן אמת של נדידת תאים בשיטת ריפוי פצע באמצעות תאי האפיתל של השד מדולדל TIP60 MCF10A. היישום של טכניקות הדמיה לחיות תאים בפרוטוקול שלנו מאפשר לנו נתח והמחש תא בודד תנועה בזמן אמת ולאורך זמן.

הדמיה חיה של נדידת תאים אפיתל השד לאחר דלדול ארעית של TIP60

שינויים מורפולוגיים מתרחשים בתאי החיסון החיסונית התגובה בעקבות ההפעלה ולקדם שינויים בגיוס הסלולר. ניצול 2-פוטון הדמיה בשילוב עם חלבון מהונדס בצורה גנטית לפיברוסט-1 (FSP1)-יצור; tdTomato פלומפולט-stop-floxed (tb/tb) קו העכבר הירוק fluorescently מתויג ליפופוליל-fitc, אנחנו יכולים להדגים ספיגה ספציפית מאוד של ליפופוליד בפיברוהכדורים ושינויים מורפולוגיים ב vivo.

ב Vivo שני צבעים 2-פוטון הדמיה של תאי כתב שתייגת גנטית בעור

כאן אנו מציגים פרוטוקול להערכת הדינמיקה של היווצרות צירים והתקדמות mitotic. היישום שלנו של הדמיה זמן לפקיעה מאפשר למשתמש לזהות תאים בשלבים שונים של mitosis, לעקוב ולזהות פגמים mitotic, ולנתח את הדינמיקה הציר ואת הגורל mitotic cell בעת חשיפה לתרופות נגד mitotic.

הדמיה של תא חי כדי להעריך את הדינמיקה של תזמון מטאמפאזה ואת הגורל התאים בעקבות Mitotic צירים רטבאליות

כאן אנו מתארים פרוטוקול לטיפוח שיטתי של כדורי אפידרמיס בתרבות השעיה תלת-ממדית. פרוטוקול זה כולל יישומים נרחבים לשימוש במגוון סוגי רקמות אפיתל ולדוגמנות של מספר מחלות ותנאים אנושיים.

הקמת מערכת תרבית אפידרמיס כדורית בעלת תפוקה גבוהה למודל פלסטיות תאי גזע קרטינוציטים

הפרוטוקול מציג כלי חדש לפישוט הדמיה תוך חיונית באמצעות מיקרוסקופ קונפוקלי הפוך.

גישת הדמיה תוך-חיונית יעילה לניטור ארוך טווח של דינמיקה של רקמת אפיתל במיקרוסקופ קונפוקלי הפוך

השילוב של איטרטיבי-הלבנה-הרחבה-ריבוי (IBEX) ובדיקת תיוג נוקלאוטידים מסחרית (Click-iT EdU) מאפשר זיהוי וסיווג של סוגי תאים מתחלקים בתהליכים דינמיים ביותר בקטעי רקמת עכברים קפואים קבועים. יתר על כן, צינור עיבוד תמונה חדש בקוד פתוח מספק רכישה וניתוח של תמונות בתפוקה גבוהה.

זרימת עבודה של הדמיה וניתוח בתפוקה גבוהה להערכת פנוטיפים של תאי עור ומצבי התפשטות בדגימות רקמה

פרוטוקול זה מתאר את התרבית של קרטינוציטים טריים שהושגו (מעבר 0) לשימוש בהדמיית תאים חיים.

יצירת תרביות ראשוניות להדמיית תאים חיים של קרטינוציטים

חקור שיטת הדמיית תאים חיים לעקיבה אחרי קרטינוציטים באפידרמיס אנושי. טכניקה זו מאפשרת מדידת קצב חלוקה וגורל תאים לחקר מחלות עור כמו פסוריאזיס ותהליכי הזדקנות.

הדמיית תאים חיים עם צילום בהילוך מהיר לחקר קינטיקה של התפשטות קרטינוציטים באפידרמיס

גלה סרטונים נוספים