Name: מודל שלפוחית השתן במבחנה של זיהום בדרכי השתן הקשור לצנתר (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-24T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 57 s
Description: חקור מודל שלפוחית השתן במבחנה לחקר זיהומים בדרכי השתן הקשורים לצנתר ולהערכת יעילות טיפולים אנטימיקרוביאליים נגד ביופילמים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>313 הארכת ראש משאבה מהיר</td><td>ווטסון-מרלו</td><td>313</td><td>משאבה פריסטלטית - הארכת ראש משאבה נוספת&nbsp;</td></tr><tr><td>323S / D בקרה ידנית משאבת מהירות משתנה</td><td>ווטסון-מרלו</td><td>323S / D</td><td>משאבה פריסטלטית</td></tr><tr><td>3 ליטר שקיות מיטה, סטריליות עם ברזי מנוף&nbsp;</td><td>Great Bear Healthcare&nbsp;</td><td>GDW173</td><td></td></tr><tr><td>3 מ"מ צינורות סיליקון מרפאים פלטינה בקוטר פנימי</td><td>פישר</td><td>10111801</td><td>צינורות מעגל AUM קטנים (חבר צינורות משאבה לדגמים)</td></tr> <tr><td>צינורות סיליקון מרפאים פלטינה בקוטר 5 מ"מ</td><td>פישר</td><td>10539201</td><td>צינורות מעגל AUM בינוניים (חבר צינורות משאבה למאגר AUM)</td></tr> <tr><td>אמוניום כלוריד (NH4Cl)</td> <td>פישר</td><td>11473713</td><td></td></tr><tr><td>נתרן גופרתי נטול מים (Na2SO4)</td><td>Fisher</td><td>11498717</td><td></td></tr><tr><td>Azlon מחבר מחודד&nbsp;</td><td>פישר</td><td>10712807</td><td>משמש לחיבור אורכים שונים של צינורות במעגל AUM</td></tr><tr><td>מתלי תיקי מיטה&nbsp;</td><td>Great Bear Healthcare&nbsp;</td><td>10705P</td><td></td></tr><tr><td>מהדקי צינור זין קמצוץ Bochem, קוטר 25 מ"מ</td><td>פישר</td><td>11805101</td><td></td></tr><tr><td>סידן כלורי (CaCl2)</td> <td>פישר</td><td>10021681</td><td></td></tr><tr><td>חומצת לימון מונוהידרט&nbsp;</td><td>Merck</td><td>C1909-500G</td><td>משמש להסרת ביופילם גבישי ממודלים לאחר ניסויים&nbsp;</td></tr><tr><td>פישרברנד&nbsp; זכוכית בוגרת Class B סוג 1 פיפטות</td><td>פישר</td><td>11992168</td><td>משמש לאספקת דגמי להב במבחנה עם AUM באמצעות</td></tr><tr><td>ג'לטין</td> באנג משועמם <td>VWR</td><td>24360.233</td><td></td></tr><tr><td>Graphpad prism 10</td><td>GraphPad</td><td>V10.0</td><td>תוכנה אנליטית המשמשת לגרפים בתוצאות מודל שלפוחית השתן במבחנה וניתוח סטטיסטי.</td></tr><tr><td>Hanna HI 2211-02 מד pH ספסל</td><td>פיליפ האריס&nbsp;</td><td>PP00057414</td><td></td></tr><tr><td>In vitro שלפוחית השתן&nbsp;</td><td>-</td><td>-</td><td>ציוד בהתאמה אישית כפי שתואר בעבר על ידי Nzakizwanayo et al. (2019).</td></tr><tr><td>ג'ל סיכה Instillagel 6 מ"ל</td><td></td><td>mydoctorshop.co.uk 40-006</td><td>ג'לי סיכה המשמשים בסעיף 7.1.; ספקים אחרים זמינים.</td></tr><tr><td>Kartell Plastilab מחבר מחודד לא אחיד</td><td>Fisher&nbsp;</td><td>11914289</td><td>משמש לחיבור צינורות בקטרים שונים מקונקי</td></tr><tr><td>אגר ללא מלח (מיובש)</td><td>פישר</td><td>10472643</td><td>לספירת מושבות בודדות של חיידקים נחילים, כלומר Proteus mirabilis</td></tr><tr><td>מגנזיום כלוריד הקסהידרט (MgCl2.6H2O)</td><td>פישר</td><td>10386743</td><td></td></tr><tr><td>מונופוטסיום פוספט (KH2PO4)</td><td>פישר</td><td>10573181</td><td></td></tr><tr><td>נלג'ן מחבר בצורת Y</td><td>פישר</td><td>10186070</td><td>משמש להפעלת מעגלי AUM מרובים ממאגר AUM אחד (1-4 דגמים לכל מיכל)&nbsp;</td></tr><tr><td>אשלגן כלורי (KCl)</td> בקבוק שואב <td>פיירקס פישר</td><td>10375810</td><td></td></tr><tr><td>עם שקע צד מזכוכית טחונה, קיבולת: 5000 מ"ל</td><td>פקקי גומי של מאגר פישר</td><td>11347884</td><td>AUM</td></tr><tr><td>עם קדח, קוטר חיצוני: 37 מ"מ, אדום, קוטר: 37 מ"מ</td><td>פישר</td><td>11517612</td><td>משמש במאגר AUM ולאספקת דגמי מבחנה עם AUM</td></tr><tr><td>גודל 14 צרפתי 100% סיליקון קטטר פולי עם מזרק סטרילי של מים לניפוח&nbsp;</td><td>Great Bear Healthcare&nbsp;</td><td>4833-0514</td><td></td></tr><tr><td>נתרן כלורי (NaCl)</td><td></td><td>נתרן</td> אוקסלט 10735921 <td></td>פישר</tr><tr><td>(Na2C2O4)</td><td>Fisher</td><td>10442211</td><td></td></tr><tr><td>Teknon Biocleanse תרכיז מנקה ביוצידי, 5L&nbsp;</td><td>פישר</td><td>12447580</td><td>משמש לעיקור מודלים לאחר ניסוי</td></tr><tr><td>טריסודיום ציטראט (Na3C6H5O7)</td><td>פישר</td><td>11434993</td><td></td></tr><tr><td>טריפטון מרק סויה</td><td>פישר</td><td>10198002</td><td></td></tr><tr><td>אוריאה (CH4N2O)</td><td>פישר</td><td>10404185</td><td></td></tr><tr><td>Uro-Tainer M NaCl 0,9%</td> <td>B.Braun</td><td>FB99833</td><td>שקית השקיית שלפוחית השתן המלוחה המשמשת בסעיף 7.2.&nbsp;</td></tr><tr><td>Watson-Marlow Pumpsil 1.6 מ"מ צינורות סיליקון מרפאים פלטינה בקוטר פנימי</td><td>פישר</td><td>12406280</td><td>צינורות מעגל AUM עבים (לשימוש במשאבה פרסטלטית)</td></tr></tbody></table>

מודל שלפוחית השתן במבחנה של זיהום בדרכי השתן הקשור לצנתר

An In Vitro Bladder Model of Catheter-Associated Urinary Tract Infection

פעולה מוצלחת של מודל שלפוחית השתן במבחנה תלויה בתרגול טכניקה אספטית טובה והתבוננות קפדנית בעכירות המדיה לאורך כל הניסויים (איור 3). לפני החיסון, AUM סטרילי היה בצבע צהוב חיוור ושקוף בתא המרכזי של מודל שלפוחית השתן במבחנה (איור 3A). AUM במאגר המדיה צריך להישאר ברור לאורך כל הניסוי, שכן כל שינוי עכירות שמתרחש עשוי להצביע על משקעים של מלחים מהתמיסה, או זיהום של המדיה. אם AUM במאגר המדיה או בצינורות מעגל המדיה הופך להיות עכור או מראה שינוי דרסטי בצבע, יש להשליך את השכפולים ולחזור עליהם. לאחר החיסון, עלייה בעכירות של ה-AUM בחדר המרכזי של מודל שלפוחית השתן במבחנה נראית בבירור (איור 3B). שינויים בעכירות הם לרוב בולטים יותר באורגניזמים חיוביים לאוראז כגון P. mirabilis, אך עדיין אמורים להיות גלויים לאחר החיסון באורגניזמים שליליים לאוראז. לאחר תחילת זרימת AUM, לעתים קרובות נצפית ירידה בעכירות AUM כאשר תאים פלנקטוניים נשטפים החוצה, ואינה מעידה על מחסור בתאים ברי קיימא במודל. התבוננות ברמת המדיה בתא המרכזי יכולה לשמש גם לקביעת זמן החסימה אם משתמשים באורגניזמים חיוביים לאוראז (איור 3C). כאשר הדגמים פועלים, חור העין והקצה של הצנתר צריכים להיות גלויים לחלוטין כדי להצביע על ניקוז תקין לשקיות האשפה. עם החסימה, רמת ה-AUM בתא המרכזי תעלה מעל חורי העיניים והקצה של הצנתר, מה שמצביע על כך שהניסוי מוכן לכל קריאות וסיום נקודות קצה. במהלך ניסויים, השפעות לחץ במעגל המדיה של מודל שלפוחית השתן במבחנה יכולות לגרום לדגמים להיראות חסומים. אם יש חשד לסתימה, בדוק שמעגל ה-AUM, הצנתר וצינורות שקית האשפה מתוחים לפני סיום הבדיקה, שכן כל בועות אוויר או קיפולים פוטנציאליים בצינור עלולים לגרום ל"נעילת אוויר" ולמנוע את ניקוז הצנתר.
במהלך ניסויים במודל שלפוחית השתן במבחנה , דגימה פלנקטונית יכולה לספק תובנה חשובה לגבי דינמיקת הצמיחה בתוך המודל כמו גם התקדמות CAUTI. ניתן לנטר את צמיחת התאים, ה-pH והיווצרות הביופילם במהלך הניסויים מבלי לדרוש סיום של מודלים (איור 4). אם משתמשים באורגניזמים חיוביים לאוראז, חישובי זמן חסימה יכולים לשמש כמדד לקצב היווצרות הביופילם ולהשתמש בהם כדי להשוות את המאפיינים של זני חיידקים שונים (איור 4). השוואה בין זן מסוג פרא של P. mirabilis ומוטנט LPS (החדרת mini-tn5 ל-waaC) הדגימה הארכת זמן לחסימה ובכך הפחיתה את היווצרות הביופילם במוטציה (איור 4). אורגניזמים שליליים לאוראז אינם חוסמים בדרך כלל מודלים של שלפוחית השתן במבחנה , ולכן מומלץ לקבוע נקודת קצה מוגדרת לפני הניסוי. במקרים מסוימים, אורגניזמים שליליים לאוראז עלולים לגרום לחסימת צנתר. לדוגמה, זנים שליליים לאוראז של Klebsiella pneumoniae יכולים לייצר ביופילמים נרחבים וריריים, עם זאת, אלה בדרך כלל לוקחים הרבה יותר זמן מביופילמים חיוביים לאוראז כדי לחסום את הניקוז, כך שעדיין מומלץ לקבוע נקודת קצה מוגדרת.
מדידת pH לאורך ניסויים במודל שלפוחית השתן יכולה גם לספק תובנה לגבי ההבדלים בין מתח למתח, כמו גם ההתקדמות של CAUTI. אם נעשה שימוש באורגניזמים שליליים לאוראז, ה-pH בתא המרכזי של מודל שלפוחית השתן במבחנה אמור להישאר יציב במידה רבה לאורך כל הניסוי, אם כי צפויות תנודות קטנות ב-pH ככל שהדינמיקה של האוכלוסייה משתנה במהלך הניסוי. חיסון של מודלים במבחנה עם אורגניזמים חיוביים לאוראז מביא לעלייה משמעותית ב-pH לאורך זמן, כאשר ה-pH הגבוה ביותר נצפה בדרך כלל בזמן החסימה, שם ניתן לצפות בקריאות pH גבוהות עד ~8-9 (איור 4B).
ספירה של CFU/mL פלנקטוניים היא מרכיב חשוב במודלים של שלפוחית השתן במבחנה , המאפשרת למפעילים להעריך אם החיסון הצליח ולעקוב אחר התקדמות הניסויים. מדידת CFU/mL בסוף הניסוי יכולה להדגיש את כל ההבדלים בקולוניזציה של שלפוחית השתן בין זני חיידקים שונים. כאשר משווים את הזן המוטנטי mini-Tn5 של P. mirabilis לסוג הבר, נצפתה ירידה משמעותית ב-CFU/mL בזמן החסימה (איור 4C). יתר על כן, ספירה של CFUs מביופילמים על פני הצנתר, וכימות ביומסה של ביופילם יכולים לספק תובנה לגבי יכולתם של פתוגנים שונים ליישב את דרכי השתן המצונתרות. כתמי קריסטל סגול שימשו לקביעת הבדלים בהיווצרות ביופילם בין זן P. mirabilis HI4320 מסוג בר לבין מבודדים שעברו בכלורהקסידין (איור 5). מדידות צפיפות אופטיות ב-595 ננומטר הראו כי מבודדים שעברו בכלורהקסידין הראו ירידה בהיווצרות ביופילם בהשוואה לסוג הבר ובקרות שעברו בהיעדר כלורהקסידין.
מכיוון שמטרת מודל שלפוחית השתן במבחנה היא לשכפל במדויק את נישת CAUTI, ניתן להשתמש במודלים גם כדי לחקור את ההשפעות של טיפולים אנטי-מיקרוביאליים שמטרתם לטפל ב-CAUTI בסביבה רלוונטית מבחינה קלינית. עבור אורגניזמים חיוביים לאוראז, השוואת זמני החסימה של מודלים מטופלים עם מודלים לא מטופלים יכולה לספק תובנה שימושית לגבי יעילות הטיפול. טיפול במודלים של שלפוחית השתן במבחנה שחוסנו ב-P. mirabilis בתמיסת השקיית שלפוחית השתן כלורהקסידין 0.02% האריך משמעותית את זמן החסימה בהשוואה למודלים שלא טופלו או טופלו בתמיסת מלח של 0.9% (איור 6A). יתר על כן, ניתן להשתמש במודל שלפוחית השתן במבחנה כדי לחקור את הפעילות החיידקית של טיפולים אנטי-מיקרוביאליים. ניטור שינויים ב-CFU/mL של תאים פלנקטוניים וקשורים לביופילם לאחר טיפול אנטי-מיקרוביאלי יכול להצביע על יעילותם של הטיפולים. טיפול במודלים של שלפוחית השתן במבחנה שחוסנו ב-P. mirabilis הראה ירידה של &gt;7 לוג ב-CFU/mL פלנקטוניים מיד לאחר הטיפול, בהשוואה למודלים לא מטופלים ו-0.9% מושקים במי מלח כאשר מיושמים לפי הוראות היצרן (איור 6B).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67966/67966fig01.jpg"> 
איור 1: סכמטי של המרכיבים העיקריים של מודל שלפוחית השתן במבחנה . (א) דגם שלפוחית השתן (מערכת ניקוז סגורה): (1) תא זכוכית בעל דופן כפולה המדמה את כניסת המדיה של שלפוחית השתן (2) כניסת מדיה, AU מסופק באמצעות משאבה פריסטלטית לתא הפנימי של שלפוחית השתן (3) כניסת מים המסופקת דרך אמבט מים במחזור לתא החיצוני (4) יציאת מים (5) צנתר פולי, מוכנס לתא הפנימי (6) נקודת חיבור לומן ניקוז; נקודת חיבור לשקית אשפה/שקיות השקיה (7) שקית ניקוז האוספת את יציאת השתן. (B) סכמטי המתאר את ההגדרה של מודל שלפוחית השתן במבחנה וכיוון זרימת המדיה והמים דרך המודל. שתן מלאכותי מאוחסן במאגר מדיה (1) בטמפרטורת החדר ומסופק לדגם באמצעות משאבה פריסטלטית (2) בקצב זרימה קבוע של ~ 0.75 מ"ל דקה-1 למשך הניסוי. המדיה זורמת לתוך החדר המרכזי של כלי הזכוכית בעל הדופן הכפולה המייצגת את שלפוחית השתן (3) ומתנקזת החוצה דרך חור העין של קטטר פולי (4) לתוך שקית ניקוז (5), ומשלימה את מערכת הניקוז הסגורה והסטרילית. דגם שלפוחית השתן במבחנה נשמר בטמפרטורה קבועה של 37 מעלות צלזיוס באמצעות אמבט מים במחזור (6), הזורם דרך החדר החיצוני של כלי הזכוכית בעל הדופן הכפולה. קווים מקווקווים מייצגים צינורות סיליקון וחצים מייצגים את כיוון הזרימה. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67966/67966fig01large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67966/67966fig02.jpg"> 
איור 2: חתך של צנתרי שתן לעיבוד תאים הקשורים לביופילם. נקודות לדוגמה על קטטר שתן לדיסקציה לכימות ביופילם במורד הזרם. (A) צנתרים נחתכים תחילה באופן רוחבי באזור 8 ס"מ הפרוקסימלי לקצה/חורי העיניים (שם נצפית רוב היווצרות הביופילם). קטעים של 1 ס"מ מוסרים בעזרת אזמל, בדרך כלל נמנעים מהאזור המכיל את בלון הצנתר המנופח עקב קשיים בעיבוד השחזור (1-3). (B) ברגע שהצנתרים נחתכים בתחילה לחתיכות של 1 ס"מ, חתך אורכי נוסף נעשה במורד הלומן המרכזי כדי לחשוף כל ביופילם שקיים לכימות ביופילם נוסף, כלומר, ספירת CFU/mL של צביעה סגולה קריסטלית. קווים מקווקווים מייצגים נקודות חיתוך. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67966/67966fig02large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67966/67966fig03.jpg"> 
איור 3: שלבים של ניסוי מודל שלפוחית השתן במבחנה . תמונות של התא המרכזי של מודל שלפוחית השתן במבחנה , לאורך שלבים שונים של הניסוי. (A) AUM בתא המרכזי של מודל שלפוחית השתן במבחנה לפני החיסון. המדיה בתא המרכזי שקופה לחלוטין, מה שמעיד על עיקור מוצלח, וקצה הצנתר וחורי העיניים נראים מעל קו המדיה, מה שמעיד על ניקוז הצנתר בהצלחה. (B) מדיה בחדר המרכזי של מודל שלפוחית השתן במבחנה לאחר חיסון עם P. mirabilis (4 שעות לאחר החיסון). חיסון מוצלח מסומן על ידי העכירות המוגברת של המדיה. הנראות של קצה הצנתר וחורי העיניים מצביעים על כך ש-AUM מתנקז בהצלחה דרך הצנתר, ולא התרחשה סתימה. (C) דוגמה למודל של שלפוחית השתן חסומה במבחנה . חיסון עם P. mirabilis והיווצרות הביופילם והמינרליזציה שלאחר מכן גרמו לחסימה של חורי העיניים של הצנתר, מונעים ניקוז וגורמים לרמת המדיה בתא המרכזי לעלות מעל קצה הצנתר. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67966/67966fig03large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67966/67966fig04.jpg"> 
איור 4: מדידות נקודת קצה עבור מודל שלפוחית השתן במבחנה פועלות עד לחסימה. דוגמה למדידות נקודת קצה בזמן החסימה ממודל שלפוחית השתן במבחנה שחוסן בזן קליני של P. mirabilis, RS47 (WT), וזן מוטנטי עם היווצרות ביופילם מוחלש, RS47-2 (מוטנט). (A) זמן חסימה (h) של WT וזנים מוטנטיים של P. mirabilis. (B) pH של מודלים של שלפוחית השתן במבחנה בזמן החסימה. (C) CFU/mL של תאים פלנקטוניים בתא מודל שלפוחית השתן במבחנה בזמן החסימה. כל הנתונים מייצגים את הממוצע של חמישה שכפולים ביולוגיים. קווי שגיאה מציגים את שגיאת התקן של הממוצע (SEM). *עמ ' ≤ 0.05; **עמ' ≤ 0.01. נתון זה שונה מ-Clarke et al.46. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67966/67966fig04large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67966/67966fig05.jpg"> 
איור 5: מדידות תאים הקשורים לביופילם ממודל שלפוחית השתן במבחנה . כימות היווצרות ביופילם של P. mirabilis , השוואת זן HI4320 מסוג בר לאוכלוסיות מותאמות שעברו עם או בלי כלורהקסידין (CHD) באמצעות צביעה סגולה קריסטלית ומדידת צפיפות אופטית (OD) ב-595 ננומטר. משקל: P. mirabilis HI4320; 1, 3, 5: בקרות מעבר ללא חשיפה ל-CHD; 2, 4, 6: HI4320 עבר ב-4 מיקרוגרם/מ"ל CHD. כל הנתונים מייצגים את הממוצע של חמישה שכפולים ביולוגיים. קווי שגיאה מראים SEM. *p ≤ 0.05; **עמ' ≤ 0.01. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67966/67966fig05large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67966/67966fig06.jpg"> 
איור 6: מדידות ממודלים של שלפוחית השתן במבחנה לאחר טיפול אנטי-מיקרוביאלי. דגימות פלנקטוניות נלקחו ממודל שלפוחית השתן במבחנה שחוסן ב-P. mirabilis, לאחר השקיה בתמיסה אנטי-מיקרוביאלית של כלורהקסידין 0.02% (100 מ"ל) או בקרת מי מלח של 0.9%. (A) זמן חסימה של מודלים של שלפוחית השתן במבחנה לאחר השקיה. (B) CFU/מ"ל פלנקטוניים מיד לאחר טיפול בהשקיה. כל הנתונים מייצגים את הממוצע של חמישה שכפולים ביולוגיים. קווי שגיאה מראים SEM. *p ≤ 0.05; **עמ' ≤ 0.01; *עמ ' ≤ 0.0001. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67966/67966fig06large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.</a>

Catheter-associated urinary tract infections (CAUTIs) are among the most common healthcare-associated infections. Biofilm formation on urinary catheters ...

an-vitro-bladder-model-catheter-associated-urinary-tract

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

אימונולוגיה וזיהומים

מקור: O'Brien, V. P., ואחרים, זיהום שובב בדרכי השתן של Escherichia coli שנגרם מחשיפת שלפוחית השתן בגרדנרלה בנרתיק בעכברים. J. Vis. Exp. (2020)סרטון זה מדגים את השימוש במיקרוסקופ אלקטרוני סורק כדי להמחיש קולוניזציה חיידקית ואינטראקציות בין מאכסן-פתוגן באפיתל השלפוחית של מודל עכבר שנדבק מראש.

הכנת רקמת שלפוחית השתן של העכבר להמחשת זיהום חיידקי

מקור: קונובר, מ. ס. ואחרים, ג'. הקמה ואפיון של דלקות בדרכי השתן ו-CAUTI במודל עכבר. J. Vis. Exp. (2015)סרטון זה מדגים את ההליך להרכבה והשתלת קטטר טרנס-שופכה בעכבר, ולאחר מכן חיסון חיידקי כדי לקבוע זיהום בדרכי השתן הקשור לקטטר ולחקור אינטראקציות בין מארח לפתוגן המתווכת על ידי ביופילם.

זיהום בדרכי השתן הקשור לקטטר במודל עכבר

מקור: קונובר, מ. ס. ואח', הקמה ואפיון של דלקות בדרכי השתן ו-CAUTI במודל עכבר. J. Vis. Exp. (2015)סרטון זה מדגים את גילוי קהילות חיידקיות תוך-תאיות (IBCs) ברקמת שלפוחית השתן של העכבר הנגועה ב-Escherichia coli המבטא β-גלקטוזידאז. לאחר קיבוע רקמות, פרמיאביליזציה וצביעה ב-X-gal, תאי IBC מופיעים כפונקטה כחולה תחת מיקרוסקופ ניתוח, מה שמאשר פלישה חיידקית במהלך זיהום בדרכי השתן.

המחשת קהילות חיידקים תוך-תאיות בשלפוחית כיס עכבר נגועה

בסרטון זה, אנו מתארים את הטכניקה לניהול תוך שלפוחית של חיידקים אורופתוגניים כדי ליצור מודל זיהום בדרכי השתן בעכברים. מודל זה יכול לשמש להבנת התפשטות זיהום חיידקי אורופתוגני בתוך מערכת השתן ואת המנגנונים הקובעים רגישות לזיהומים בדרכי השתן.

מודל יצירת דלקת בדרכי השתן: טכניקה למתן חיידקים אורופתוגניים בעכבר לפיתוח מודל דלקת בדרכי השתן

סרטון זה מדגים את ביסוס זיהום Escherichia coli אורופתוגני בשלפוחית השתן של עכבר נקבה באמצעות החדרת קטטר טרנס-שופכתי. החיידקים המוזרקים מצליחים לבסס זיהום בדרכי השתן בתוך שלפוחית השתן, ומספקים פלטפורמה רבת ערך לחקר מחלות הקשורות לבריאות הקשורות לדרכי השתן.

צנתור דרך השופכה וחיסון חיידקי ליצירת מודל דלקת בדרכי השתן בעכברים זכרים

הקמת מודל של דלקת בדרכי השתן בעכברות

היכולת למדל דלקות בדרכי השתן (UTI) היא חיונית על מנת להיות מסוגל להבין פתוגנזה חיידקית ולהוליד פיתוח של טיפולים חדשים. מטרת עבודה זו היא להדגים מודלים עכבריים של UTI ניסיוני ודלקת בדרכי השתן הקשורה לצנתר המסכמים ומנבאים ממצאים שנראו בבני אדם.

ההקמה ואפיון של UTI וCAUTI במודל עכבר

הדגם הוקמה של צנתור-transurethral של עכברים מאפשרת לימוד פתולוגיות בשלפוחית השתן, כולל זיהום בדרכי השתן, אך ניתן לבצע רק אצל נקבות. מודל חדש של זכר החדרה-transurethral, המובאים כאן, יאפשר מחקר באזור המסומן חזקה קליניים ואפידמיולוגיים ההבדלים בין המינים.

זיהום בדרכי השתן במודל בעלי חיים קטנים: צנתור-Transurethral של זכר ונקבה עכברים

פרוטוקול זה מתאר שיטה פשוטה של לבודד תאים אפיתל יחיד, שלפוחית השתן נגוע של המודל מאתר של דלקת בדרכי השתן.

בידוד של אחת הקהילות חיידקי תאיים שנוצר ממודל מאתר של זיהום בדרכי השתן לניתוח תא בודד במורד הזרם

מודל עכברי של חיסון אורופתוגני E. coli (UPEC) טרנס-urethral כדי ליצור מאגרי שלפוחית שתן תוך-תאיים סמויים וחשיפה שלפוחית השתן לאחר מכן ל - G. vaginalis כדי לגרום ל- UPEC UTI חוזר ונשנה מודגם. כמו כן הודגמו ספירה של חיידקים, ציטולוגיה של שתן, וקיבוע ועיבוד שלפוחית השתן באתרם לסריקת מיקרוסקופיית אלקטרונים.

זיהום חוזר בדרכי השתן של Escherichia coli שנגרם על ידי גרדנרלה וגינליס חשיפה לשלפוחית השתן בעכברים

חקור מודל שלפוחית השתן במבחנה לחקר זיהומים בדרכי השתן הקשורים לצנתר ולהערכת יעילות טיפולים אנטימיקרוביאליים נגד ביופילמים.

מודל שלפוחית השתן במבחנה של זיהום בדרכי השתן הקשור לצנתר

גלה סרטונים נוספים