Name: זיהוי מיקרוגליה ומקרופאגים חודרים היקפיים בחוט השדרה הפגוע באמצעות ציטומטריית זרימה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-24T13:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 47 s
Description: למדו לזהות מיקרוגליה ומקרופאגים חודרים בחוט השדרה הפגוע באמצעות ציטומטריית זרימה מתקדמת. שיטה זו מאפשרת הבחנה מדויקת בין תאי חיסון שונים ומיפוי פנוטיפים M1 ו-M2 לחקר דלקת עצבית.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Rubiano, A. M., Carney, N., Chesnut, R., Puyana, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+neurotrauma+research+challenges+and+opportunities%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Global neurotrauma research challenges and opportunities.</a> Nature. 527 (7578), S193-S197 (2015).</li>
<li>Fehlings, M., Singh, A., Tetreault, L., Kalsi-Ryan, S., Nouri, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+prevalence+and+incidence+of+traumatic+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Epidemiol%22%5BJournal%5D)">Global prevalence and incidence of traumatic spinal cord injury.</a> Clin Epidemiol. 6, 309-331 (2014).</li>
<li>Sterner, R. C., Sterner, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immune+response+following+traumatic+spinal+cord+injury%3A+Pathophysiology+and+therapies%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Immune response following traumatic spinal cord injury: Pathophysiology and therapies.</a> Front Immunol. 13, 1084101(2023).</li>
<li>Sun, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+organ+dysfunction+and+systemic+inflammation+after+spinal+cord+injury%3A+A+complex+relationship%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neuroinflammation%22%5BJournal%5D)">Multiple organ dysfunction and systemic inflammation after spinal cord injury: A complex relationship.</a> J Neuroinflammation. 13 (1), 260(2016).</li>
<li>Brockie, S., Zhou, C., Fehlings, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resident+immune+responses+to+spinal+cord+injury%3A+Role+of+astrocytes+and+microglia%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Regen+Res%22%5BJournal%5D)">Resident immune responses to spinal cord injury: Role of astrocytes and microglia.</a> Neural Regen Res. 19 (8), 1678-1685 (2024).</li>
<li>Wang, Z., Zhou, W., Zhang, Z., Zhang, L., Li, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metformin+alleviates+spinal+cord+injury+by+inhibiting+nerve+cell+ferroptosis+through+upregulation+of+heme+oxygenase-1+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Regen+Res%22%5BJournal%5D)">Metformin alleviates spinal cord injury by inhibiting nerve cell ferroptosis through upregulation of heme oxygenase-1 expression.</a> Neural Regen Res. 19 (9), 2041-2049 (2024).</li>
<li>Li, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lupenone+improves+motor+dysfunction+in+spinal+cord+injury+mice+through+inhibiting+the+inflammasome+activation+and+pyroptosis+in+microglia+via+the+nuclear+factor+kappa+B+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Regen+Res%22%5BJournal%5D)">Lupenone improves motor dysfunction in spinal cord injury mice through inhibiting the inflammasome activation and pyroptosis in microglia via the nuclear factor kappa B pathway.</a> Neural Regen Res. 19 (8), 1802-1811 (2024).</li>
<li>Zhou, H. -Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+development+of+microglia+and+macrophages+after+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Regen+Res%22%5BJournal%5D)">Dynamic development of microglia and macrophages after spinal cord injury.</a> Neural Regen Res. 20 (12), 3606-3619 (2024).</li>
<li>Hakim, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spinal+cord+injury+induces+permanent+reprogramming+of+microglia+into+a+disease-associated+state+which+contributes+to+functional+recovery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Spinal cord injury induces permanent reprogramming of microglia into a disease-associated state which contributes to functional recovery.</a> J Neurosci. 41 (40), 8441-8459 (2021).</li>
<li>Brennan, F. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglia+coordinate+cellular+interactions+during+spinal+cord+repair+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Microglia coordinate cellular interactions during spinal cord repair in mice.</a> Nat Commun. 13 (1), 4096(2022).</li>
<li>Zeng, F., et al. Microglia overexpressing brain-derived neurotrophic factor promote vascular repair and functional recovery in mice after spinal cord injury. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aZeng%2C+F+%22Neural+Regen+Res%22">Neural Regen Res</a>. , (2024).</li>
<li>Tang, Y., Le, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+roles+of+M1+and+M2+microglia+in+neurodegenerative+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Differential roles of M1 and M2 microglia in neurodegenerative diseases.</a> Mol Neurobiol. 53 (2), 1181-1194 (2015).</li>
<li>Butovsky, O., Weiner, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglial+signatures+and+their+role+in+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Microglial signatures and their role in health and disease.</a> Nat Rev Neurosci. 19 (10), 622-635 (2018).</li>
<li>Wang, J., He, W., Zhang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+richer+and+more+diverse+future+for+microglia+phenotypes%5BTitle%5D)+AND+%22Heliyon%22%5BJournal%5D)">A richer and more diverse future for microglia phenotypes.</a> Heliyon. 9 (4), e14713(2023).</li>
<li>Zeng, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Knockout+of+TNF-%CE%B1+in+microglia+decreases+ferroptosis+and+convert+microglia+phenotype+after+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Heliyon%22%5BJournal%5D)">Knockout of TNF-α in microglia decreases ferroptosis and convert microglia phenotype after spinal cord injury.</a> Heliyon. 10 (17), e36488(2024).</li>
<li>Prinz, M., Jung, S., Priller, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglia+biology%3A+One+century+of+evolving+concepts%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Microglia biology: One century of evolving concepts.</a> Cell. 179 (2), 292-311 (2019).</li>
<li>Borst, K., Dumas, A. A., Prinz, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglia%3A+Immune+and+non-immune+functions%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Microglia: Immune and non-immune functions.</a> Immunity. 54 (10), 2194-2208 (2021).</li>
<li>Hao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trends+of+epidemiological+characteristics+of+traumatic+spinal+cord+injury+in+China%2C+2009-2018%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Spine+J%22%5BJournal%5D)">Trends of epidemiological characteristics of traumatic spinal cord injury in China, 2009-2018.</a> Eur Spine J. 30 (10), 3115-3127 (2021).</li>
<li>Sica, A., Erreni, M., Allavena, P., Porta, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophage+polarization+in+pathology%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Mol+Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Macrophage polarization in pathology.</a> Cell Mol Life Sci. 72 (21), 4111-4126 (2015).</li>
<li>Kong, X., Gao, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophage+polarization%3A+A+key+event+in+the+secondary+phase+of+acute+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Macrophage polarization: A key event in the secondary phase of acute spinal cord injury.</a> J Cell Mol Med. 21 (5), 941-954 (2016).</li>
<li>Lech, M., Anders, H. -J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophages+and+fibrosis%3A+How+resident+and+infiltrating+mononuclear+phagocytes+orchestrate+all+phases+of+tissue+injury+and+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta+Mol+Basis+Dis%22%5BJournal%5D)">Macrophages and fibrosis: How resident and infiltrating mononuclear phagocytes orchestrate all phases of tissue injury and repair.</a> Biochim Biophys Acta Mol Basis Dis. 1832 (7), 989-997 (2013).</li>
<li>Mosley, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+glial+scar-monocyte+interplay%3A+A+pivotal+resolution+phase+in+spinal+cord+repair%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">The glial scar-monocyte interplay: A pivotal resolution phase in spinal cord repair.</a> PLoS One. 6 (12), e27969(2011).</li>
<li>Zhu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hematogenous+macrophage+depletion+reduces+the+fibrotic+scar+and+increases+axonal+growth+after+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Dis%22%5BJournal%5D)">Hematogenous macrophage depletion reduces the fibrotic scar and increases axonal growth after spinal cord injury.</a> Neurobiol Dis. 74, 114-125 (2015).</li>
<li>Hou, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mono-macrophage-derived+MANF+protects+against+lipopolysaccharide-induced+acute+kidney+injury+via+inhibiting+inflammation+and+renal+M1+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Inflammation%22%5BJournal%5D)">Mono-macrophage-derived MANF protects against lipopolysaccharide-induced acute kidney injury via inhibiting inflammation and renal M1 macrophages.</a> Inflammation. 44 (2), 693-703 (2020).</li>
<li>Block, M. L., Zecca, L., Hong, J. -S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglia-mediated+neurotoxicity%3A+Uncovering+the+molecular+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Microglia-mediated neurotoxicity: Uncovering the molecular mechanisms.</a> Nat Rev Neurosci. 8 (1), 57-69 (2007).</li>
<li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+the+M2a+macrophage-induced+axonal+regeneration+of+neurons+by+arginase+1%5BTitle%5D)+AND+%22Biosci+Rep%22%5BJournal%5D)">The effects of the M2a macrophage-induced axonal regeneration of neurons by arginase 1.</a> Biosci Rep. 40 (2), BSR20193031(2020).</li>
<li>Li, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+polarization+of+microglia+and+infiltrated+macrophages+in+the+injured+mice+spinal+cords%3A+A+dynamic+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22PeerJ%22%5BJournal%5D)">The polarization of microglia and infiltrated macrophages in the injured mice spinal cords: A dynamic analysis.</a> PeerJ. 11, e14929(2023).</li>
<li>Gratama, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+variation+in+results+of+flow+cytometric+lymphocyte+immunophenotyping+in+a+multicenter+study%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry%22%5BJournal%5D)">Analysis of variation in results of flow cytometric lymphocyte immunophenotyping in a multicenter study.</a> Cytometry. 30 (4), 166-177 (1997).</li>
<li>Delarasse, C., Fontaine, B., El-Behi, M., Martin, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+microglia+and+monocyte-derived+macrophages+from+the+central+nervous+system+by+flow+cytometry%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Analysis of microglia and monocyte-derived macrophages from the central nervous system by flow cytometry.</a> J Vis Exp. (124), e55781(2017).</li>
<li>Chen, Y. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+kinetics+of+macrophage+polarization+in+the+injured+rat+spinal+cord%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">Temporal kinetics of macrophage polarization in the injured rat spinal cord.</a> J Neurosci Res. 93 (10), 1526-1533 (2015).</li>
<li>Chen, Y. -Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CRID3%2C+a+blocker+of+apoptosis-associated+speck-like+protein+containing+a+CARD%2C+ameliorates+murine+spinal+cord+injury+by+improving+local+immune+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neuroinflammation%22%5BJournal%5D)">CRID3, a blocker of apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD, ameliorates murine spinal cord injury by improving local immune microenvironment.</a> J Neuroinflammation. 17 (1), 255(2020).</li>
<li>Vijay, S., Nair, R. R., Sharan, D., Jakkala, K., Ajitkumar, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Percoll+discontinuous+density+gradient+centrifugation+method+for+the+fractionation+of+the+subpopulations+of+Mycobacterium+smegmatis+and+Mycobacterium+tuberculosis+from+in+vitro+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22MethodsX%22%5BJournal%5D)">Percoll discontinuous density gradient centrifugation method for the fractionation of the subpopulations of Mycobacterium smegmatis and Mycobacterium tuberculosis from in vitro cultures.</a> MethodsX. 11 (7), 102344(2023).</li>
<li>Sharma, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Successful+transplantation+of+transfected+enriched+buffalo+spermatogonial+stem+cells+to+homologous+recipients%5BTitle%5D)+AND+%22Theriogenology%22%5BJournal%5D)">Successful transplantation of transfected enriched buffalo spermatogonial stem cells to homologous recipients.</a> Theriogenology. 142, 441-449 (2020).</li>
<li>Sims, N. R., Anderson, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+mitochondria+from+rat+brain+using+Percoll+density+gradient+centrifugation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Isolation of mitochondria from rat brain using Percoll density gradient centrifugation.</a> Nat Protoc. 3 (7), 1228-1239 (2008).</li>
<li>Maurer, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Continuous+Percoll+gradient+centrifugation+of+erythrocytes%3A+Explanation+of+cellular+bands+and+compromised+age+separation%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Continuous Percoll gradient centrifugation of erythrocytes: Explanation of cellular bands and compromised age separation.</a> Cells. 11 (8), 1296(2022).</li>
<li>Gamboa-Suárez, B. A., Lotta-Arévalo, I. A., Sarmiento-Salazar, F., Matta, N. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Finding+a+needle+in+a+haystack%3A+DNA+Haemoproteus+columbae+enrichment+using+percoll+density+gradient+and+flow+cytometry%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+Parasitol%22%5BJournal%5D)">Finding a needle in a haystack: DNA Haemoproteus columbae enrichment using percoll density gradient and flow cytometry.</a> Vet Parasitol. 328, 110170(2024).</li>
<li>Cao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paeoniflorin+suppresses+kidney+inflammation+by+regulating+macrophage+polarization+via+KLF4-mediated+mitophagy%5BTitle%5D)+AND+%22Phytomedicine%22%5BJournal%5D)">Paeoniflorin suppresses kidney inflammation by regulating macrophage polarization via KLF4-mediated mitophagy.</a> Phytomedicine. 116, 154901(2023).</li>
<li>Nishihara, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+constriction+injury+of+the+sciatic+nerve+in+rats+causes+different+activation+modes+of+microglia+between+the+anterior+and+posterior+horns+of+the+spinal+cord%5BTitle%5D)+AND+%22Neurochem+Int%22%5BJournal%5D)">Chronic constriction injury of the sciatic nerve in rats causes different activation modes of microglia between the anterior and posterior horns of the spinal cord.</a> Neurochem Int. 134, 104672(2020).</li>
<li>Durafourt, B. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+polarization+properties+of+human+adult+microglia+and+blood-derived+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Glia%22%5BJournal%5D)">Comparison of polarization properties of human adult microglia and blood-derived macrophages.</a> Glia. 60 (5), 717-727 (2012).</li>
<li>Wachholz, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglia+activation+is+associated+with+IFN-alpha+induced+depressive-like+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Behav+Immun%22%5BJournal%5D)">Microglia activation is associated with IFN-alpha induced depressive-like behavior.</a> Brain Behav Immun. 55, 105-113 (2016).</li>
<li>Chen, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Correlations+between+macrophage+polarization+and+osteoinduction+of+porous+calcium+phosphate+ceramics%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">Correlations between macrophage polarization and osteoinduction of porous calcium phosphate ceramics.</a> Acta Biomater. 103, 318-332 (2020).</li>
<li>Guo, S. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nasal+delivery+of+Fasudil-modified+immune+cells+exhibits+therapeutic+potential+in+experimental+autoimmune+encephalomyelitis%5BTitle%5D)+AND+%22CNS+Neurosci+Ther%22%5BJournal%5D)">Nasal delivery of Fasudil-modified immune cells exhibits therapeutic potential in experimental autoimmune encephalomyelitis.</a> CNS Neurosci Ther. 25 (6), 783-795 (2019).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1 ופעמים; PBS</td><td>&nbsp; סולארביו</td><td>עמ' 1020</td><td></td></tr><tr><td>10 פעמים; PBS</td><td>&nbsp; סולארביו</td><td>עמ' 1022</td><td></td></tr><tr><td>18 עכברים נקבות C57/BL6 בנות שמונה שבועות&nbsp;</td><td>Cavens Laboratory Animal Ltd, צ'אנג ג'ואו, סין</td><td></td><td></td></tr><tr><td>APC-eFluor 780 עם תווית Rat Anti-Mouse CCR7 (IgG2b kappa)</td><td>Invitrogen</td><td>47-1971-82</td><td>0.25&mu; גרם/מבחן</td></tr><tr><td>APC-eFluor 780 עם תווית Rat IgG2b kappa&nbsp; בקרת איזוטיפ</td><td>Invitrogen</td><td>47-4321-82</td><td>0.25&mu; גרם/מבחן</td></tr><tr><td>חולדה נגד עכבר CD45 עם תווית APC (IgG2b kappa)</td><td>Invitrogen</td><td>17-0451-82</td><td>0.125&mu; גרם/מבחן</td></tr><tr><td>חולדה עם תווית APC IgG2b kappa&nbsp; בקרת איזוטיפ</td><td>Invitrogen</td><td>17-4031-82</td><td>0.125&mu; גרם/מבחן</td></tr><tr><td>DMEM</td><td>ג'יבקו</td><td>11965092</td><td></td></tr><tr><td>סרום בקר עוברי</td><td>לונסרה</td><td>S711-001</td><td></td></tr><tr><td>חולדה נגד עכבר CD68 עם תווית FITC (IgG2b kappa)</td><td>Invitrogen</td><td>&nbsp; MA5-16676</td><td>0.25&mu; גרם/מבחן</td></tr><tr><td>חולדה עם תווית FITC IgG2b kappa&nbsp; בקרת איזוטיפ</td><td>Invitrogen</td><td>11-4031-82</td><td>0.25&mu; גרם/מבחן</td></tr><tr><td>פרפורמלדהיד</td><td>ביושארפ</td><td>23319084</td><td></td></tr><tr><td>CD11b נגד עכברים עם תווית PE (IgG2b kappa)</td><td>Invitrogen</td><td>12-0112-81</td><td>0.25&mu; גרם/מבחן</td></tr><tr><td>חולדה עם תווית PE IgG2b kappa&nbsp; בקרת איזוטיפ</td><td>Invitrogen</td><td>12-4031-82</td><td>0.25&mu; גרם/מבחן</td></tr><tr><td>פרקול</td><td>&nbsp; סולארביו</td><td>עמ' 8370</td><td></td></tr><tr><td>תמיסת טריפסין</td><td>ביושארפ</td><td>BL526א</td><td></td></tr></tbody></table>

זיהוי מיקרוגליה ומקרופאגים חודרים היקפיים בחוט השדרה הפגוע באמצעות ציטומטריית זרימה

Identifying Microglia and Peripheral Infiltrating Macrophages in the Injured Spinal Cords Using Flow Cytometry

תאי החיסון מרקמת חוט השדרה מופרדים באמצעות סיליקה קולואידית המצופה בצנטריפוגה של שיפוע צפיפות פוליוויניל פירולידון. במהלך תהליך הצנטריפוגה, התאים מפוזרים לשכבות שונות בהתאם לצפיפות הציפה שלהם, ובכך משיגים הפרדת תאים (איור 1). מלמעלה למטה, ההתפלגות היא כדלקמן: פסולת סלולרית, שכבה עשירה בתאים חד-גרעיניים, שכבה עשירה בלימפוציטים, ובתחתית, שכבת האריתרוציט והגרנולוציטים.
ניתוח FCM של תאים דמויי M1 ודמויי M2 משתמש בפרופיל ביטוי סמן תאים המורכב מ-CD68, CD45, CD11b ו-CCR7...

In a healthy spinal cord, peripheral infiltrating macrophages are almost undetectable, and microglia (MG) participate in maintaining the stability of the ...

identifying-microglia-peripheral-infiltrating-macrophages-injured

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

המאמר הנוכחי מתאר פרוטוקול מהיר יעיל לבודד תאים mononuclear מרקמות המוח ואת חוט השדרה אשר יכול להיות מנוצל ביעילות עבור ניתוחים תזרים cytometric.

בידוד של המוח ותאי חוט השדרה mononuclear שימוש Percoll Gradients

כימות של דלקת הסלולר ב CNS פצועים / פתולוגי על ידי cytometry זרימה מסובך ידי פסולת שומנים / מיאלין כי יכול להיות בגודל פרור דומים לתאים, הפחתת הרגישות / דיוק. יש לנו הכנה מתקדמים תא שיטה להסרת פסולת המיאלין ולשפר זיהוי תאים על ידי זרימת cytometry בחוט השדרה הפגוע.

הערכה כמותית של תאים חיסוניים רקמות חוט השדרה נפגע על ידי זרימת cytometry: השתמש חדשנית שיטת טיהור Cell

Microglia תושב מקרופאגים הם המספקים את השורה הראשונה של מעקב ההגנה החיסונית של מערכת העצבים המרכזית. מיקרו RNA הם מולקולות רגולטוריות כי לשחק תפקיד חשוב בתהליכים פיזיולוגיים רבים, כולל הפעלת והבחנה של מקרופאגים. במאמר זה נתאר את שיטת המדידה של מיקרו RNA ב microglia.

זיהוי של מיקרו RNA ב microglia על ידי Real-time PCR ב CNS רגיל ובמהלך Neuroinflammation

אפיון תאי מיאלואידית מוח לאחר שבץ יכול להתבצע על ידי stereology בשיטת fractionator האופטית, או על ידי ניתוח התזרים cytometric של מוח לויקוציטים השעיות. שניהם טכניקות שימושיות לבצע הבחנה phenotypical מדויקת של תת תא מיאלואידית העיקרי נמצאים במוח איסכמי.

Stereological וcytometry זרימת אפיון תת-אוכלוסיות יקוציט במודלים של חולף או קבוע מוחין איסכמיה

ניתן להשתמש בהדמיה תוך-חיונית של שני פוטונים כדי לחקור אינטראקציות בין סוגי תאים שונים בחוט השדרה בסביבת הרקמה הטבעית שלהם בחיה כימרית של מח עצם עם פגיעת ריסוק טראומטית של חוט השדרה בעמוד הגב.

ההדמיה Intravital של axonal אינטראקציות עם Microglia והמקרופאגים בפגיעת Crush טור העכבר הגבי

פרוטוקול זה מספק ניתוח של subplopulations macrophage במערכת העצבים המרכזית עכבר מבוגר על ידי cytometry הזרימה והוא מועיל לחקר סמנים מרובים לידי ביטוי על ידי תאים אלה.

ניתוח של microglia ומונוציטים הנגזרות מקרופאגים ממערכת העצבים המרכזית על ידי cytometry זרימה

ניתוח כמותי של תוכן התא בתוך בעצב מאתר קשה עקב מחסור הרקמה. פרוטוקול זה מתאר שיטה רקמות לעיכול, הכנה מספקת מספיק תאים לניתוח cytometry זרימה של אוכלוסיות תאים חיסוניים מרוב עצבים של עכברים בודדים.

ניתוח של תאים חיסוניים העצבים ממוגלה יחיד, גנגליון העזוב השורש של עכבר אחת באמצעות Cytometry זרימה

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לבידוד וטיהור מיקרוגליה ראשונית במודלים של בעלי חיים של מחלות דה-מיאלינציה, תוך שימוש במיון תאים המופעלים על ידי מגנטים.

בידוד של מיקרוגליה ראשונית של עכבר על ידי מיון תאים המופעלים מגנטית במודלים של בעלי חיים של Demyelination

כאן, אנו מציגים פרוטוקול להערכת תפקוד תאי החיסון לאחר שבץ איסכמי באמצעות ניתוח זרימה ציטומטרי במודל מיני שבץ. שיטה זו מאפשרת בחינה מפורטת של אינטראקציות נוירואימוניות וניתן להתאים אותה לחקר מחלות ניווניות אחרות, מה שמשפר את ההבנה שלנו לגבי תגובות חיסוניות בפתולוגיה של שבץ מוחי.

בידוד והערכה ציטומטרית של זרימה של אינטראקציות נוירואימוניות במודל עכברי מיני שבץ

פרוטוקול זה משלב זרימה ציטומטרית וריצוף RNA של תא בודד כדי לבודד ולאפיין מצבי תאי מיקרוגליה במוח הקטן של מוחות עכברים מוקדמים לאחר הלידה. הוא משתמש בדיסוציאציה אנזימטית, צנטריפוגה פרקול וצביעה חיסונית כדי לחשוף הטרוגניות של מיקרוגליה ולשפר את ההבנה של תפקידיהם בהתפתחות המוח הקטן ובמחלות.

זרימה ציטומטרית וניתוח תא בודד לאפיון הפעלת מיקרוגליה בהתפתחות מוח מוקדמת של עכבר לאחר לידה

למדו לזהות מיקרוגליה ומקרופאגים חודרים בחוט השדרה הפגוע באמצעות ציטומטריית זרימה מתקדמת. שיטה זו מאפשרת הבחנה מדויקת בין תאי חיסון שונים ומיפוי פנוטיפים M1 ו-M2 לחקר דלקת עצבית.

זיהוי מיקרוגליה ומקרופאגים חודרים היקפיים בחוט השדרה הפגוע באמצעות ציטומטריית זרימה

גלה סרטונים נוספים