Name: שיטת צינור צנטריפוגה כפולה פשוטה להשגת פלזמה עשירה בטסיות דם מדם סוסים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-15T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 10 s
Description: למדו שיטת צינור צנטריפוגה כפולה פשוטה להכנת פלזמה עשירה בטסיות דם מדם סוסים לטיפול בהפרעות מוסקולוסקלטיות. הפרוטוקול מבטיח סטריליות ועקביות בהפחתת לויקוציטים לשימוש קליני שגרתי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

מחקר זה נערך בהתאם לפרוטוקולים הפנימיים להכנה ושימוש ב-PRP בסוסים בבית החולים הווטרינרי של אוניברסיטת קלדס, מניזאלס, קולומביה. מחקר זה לא דרש אישור של הוועדה הפנימית לטיפול בבעלי חיים מכיוון שהנתונים התקבלו מסוסים צולעים שטופלו קלינית במוסד שלנו. נתונים משישה סוסים קריאוליים קולומביאניים, שלוש סוסות ושלושה סוסים, עם גיל ממוצע של 7.4 (± 2.6) שנים שימשו לפיתוח פרוטוקול זה. בעלי הסוסים עודכנו על אופי המחקר וחתמו על טופס הסכמה מדעת. כל הסוסים שנכללו במחקר היו בריאים מבחינה קלינית למעט בעיית השרירים והשלד שטופלה. נכללו רק בעלי חיים עם ספירת טסיות בסיס גדולה מ-100 ×-103/מ"ל של דם מלא. חשוב לציין שסוסים עם ריכוזי טסיות נמוכים יותר עשויים להיחשב טרומבוציטופניים14. בנוסף, בעלי חיים אלה הפגינו ספירת דם תקינה, פרמטרים ביוכימיים קליניים של כבד וכליות וערכי ניתוח שתן בטווח הנורמלי עבור מיני הסוסים.
1. הגבלת סוסים וחיטוי עור
<ol>
	<li>למען בטיחותם של הסוס והווטרינר, רסנו את הסוס (Eqqus caballus) בצורה מאובטחת במצנח בדיקה קלינית או עם רסן (איור 1A), כתלות בהתנהגות החיה. לאחר מכן, גזוז אזור שיער בגודל 5 ס"מ על 5 ס"מ עם מכונת גילוח חשמלית באמצע השליש של צד אחד של הצוואר, מעל וריד הצוואר. הערה: חלק מהבעלים מעדיפים שהסוס לא ייחתך. מחקר מצביע על כך שגזירת שיער באתר ניקור הוורידים אינה הכרחית כדי למנוע זיהום חיידקי של P-PRP21. לכן, הליך זה נתון לשיקול דעתו של הווטרינר.</li>
	<li>בצע תכשיר עור לא סטרילי ראשוני על האזור הקצוץ של וריד הצוואר למשך 10 ס"מ לפחות באמצעות גזה לא סטרילית וכפפות למשך כ-3 דקות. מרחו כמה חתיכות גזה ספוגות בקצף חיטוי בתבנית מעגלית (איור 1B).</li>
	<li>הכן את אתר ניקור הוורידים באופן אספטי באמצעות כפפות סטריליות וגזה ספוגה בחומר חיטוי. שפשפו את העור באזור הצוואר בתנועות סיבוביות למשך כ-5 דקות. נקו את האזור עם גזה סטרילית ספוגה באלכוהול אתילי 95%.</li>
</ol>
2. איסוף דם אספטי
<ol>
	<li>מניחים 16 צינורות נתרן ציטראט בנפח 4.5 מ"ל, שנוקו בעבר בגזה ספוגה באלכוהול אתילי 95%, ברשת פלסטיק נקייה. הספגו את מכסי הגומי של צינורות הוואקום ב-95% אלכוהול אתילי, במיוחד בשקע לצימוד המחט. הערה: באופן כללי, נדרשים שמונה צינורות נתרן ציטראט של 4.5 מ"ל כדי להשיג 2.5 מ"ל PRP. מספר הצינורות המשמשים במקרה מסוים יהיה תלוי ברקמות הרכות או במפרק הספציפי המטופל.</li>
	<li>הכניסו באופן סטרילי מחט פרפר לתוך אתר הצוואר המחוטא (איור 2A) והצמידו צינורות נתרן ציטראט בנפח 4.5 מ"ל למחזיק (איור 2B). מנערים בעדינות את הצינורות ומניחים אותם ברשת פלסטיק. הערה: צינור נתרן ציטראט בנפח 4.5 מ"ל משמש להמוגרפיה אוטומטית ולהכנת פלזמה לאחר צנטריפוגה ספין קשה. פלזמה זו משמשת לאחר מכן כבקרה שלילית להשוואת גורם גדילה והעשרת ציטוקינים עם PRP.</li>
</ol>
3. רכש פלזמה עשירה בטסיות דם
<ol>
	<li>הנח את צינורות הנתרן ציטראט בנפח 4.5 מ"ל המכילים דם מלא לתוך רוטור מתנדנד בעל ארבעה מקומות בזווית של 90 מעלות בצנטריפוגה ספסל. צנטריפוגה את הצינורות בחום של 120 × גרם למשך 5 דקות בטמפרטורת החדר. לאחר צנטריפוגה, מקם את הצינורות של 4.5 מ"ל המכילים דם ציטראט ושני צינורות רגילים נוספים של 10 מ"ל במתלה והנח את המתלה בצד היד הלא דומיננטי של המפעיל בתוך מכסה זרימה למינרי מסוג II מעל וילון סטרילי ואטום. הערה: מחקר אחד מצביע על כך שקולט אדים מסוג II אינו חיוני למניעת זיהום חיידקי במהלך רכישת PRP21. במקום זאת, ניתן להכין PRP בחדר נקי ללא זרמי אוויר ואבק. בתרחיש זה, ניתן להניח את מתלה צינור הדם על שולחן מכוסה בווילון סטרילי ואטום.</li>
	<li>צנטריפוגה ראשונה: לבישת מסכת פנים וכפפות סטריליות, הנח מזרק לואר סטרילי של 10 מ"ל יחד עם מחט סטרילית (21 G 5/8 אינץ') בצד היד הדומיננטי בחלק הפנימי של מכסה המנוע הלמינר. הערה: מרגע זה ואילך, היד הדומיננטית עם הכפפה תמיד נשארת סטרילית, בעוד שיש להסיר את מכסי הגומי של צינורות הנתרן ציטראט באמצעות היד הלא דומיננטית עם הכפפה.</li>
	<li>הכניסו את המחט הסטרילית לכל צינור דם מצויט צנטריפוגה 3 מ"מ מעל מעיל האפי (איור 3A) ושאבו בעדינות 50% מחלק הפלזמה, תוך הימנעות ממערבולות נוזלים ושאיבת דם. לאחר שנשאבים 10 מ"ל פלזמה מארבעה צינורות של 4.5 מ"ל, מחלקים אותה בצינורות רגילים סטריליים של 5-10 מ"ל (איור 3B). הערה: הסר את מכסי הגומי של צינורות אלה ביד הלא דומיננטית והנח אותם מעל אתר סטרילי של הווילון או החזק אותם כדי למנוע זיהום חיידקי.</li>
	<li>צנטריפוגה שנייה: סגור שוב את הצינורות עם פקקי הגומי והנח אותם במצב מאוזן ברוטור מתנדנד בעל ארבעה מקומות בזווית של 90 מעלות בצנטריפוגה העליונה וסובב את הצינורות הללו ב -240 × גרם למשך 5 דקות בטמפרטורת החדר. הערה: הבחירה בכוח הצנטריפוגה היחסי (RCF או g) מבוססת על מחקר מכונן14 שתיאר לראשונה שיטה זו להשגת PRP מדם סוסים. יתר על כן, שיטה זו הוערכה לשחזור על ידי מחברים אחרים22.</li>
	<li>הנח את הצינורות במתלה ומקם אותם בצד הלא דומיננטי בתוך מכסה הזרימה הלמינרי מסוג II, על גבי הווילון הסטרילי והאטום שהונח בעבר.</li>
	<li>השתמשו ביד הלא דומיננטית כדי להסיר את מכסי הגומי וביד הדומיננטית הסטרילית כדי לשאוב לאט את 75% הראשונים של הפלזמה באמצעות מחט עמוד שדרה 18 G ו-90 מ"מ שמחוברת למזרק סטרילי של 10 מ"ל (איור 3C). השליכו מזרק זה או שמרו אותו לשימושים ניסיוניים או קליניים אחרים מכיוון שהוא מכיל פלזמה דלה בטסיות דם (PPP). לאחר מכן, חבר את מחט עמוד השדרה הסטרילית ששימשה בעבר למזרק סטרילי של 5 או 10 מ"ל כדי לשאוב את הפלזמה שנותרה (25%) מהצינור הסטרילי הרגיל של 5-10 מ"ל. המקטע הזה ידוע בשם P-PRP (איור 3D). הערה: בתנאים קליניים וניסיוניים מסוימים, כמות של 0.5-1 מ"ל PRP משמשת להמוגרפיה אוטומטית ואחריה ניתוח גורם גדילה (TGF-β1 ו-PDGF-BB) על ידי בדיקת אימונוסורבנט מקושר לאנזים. מדידת מתווכים אלה עשויה להתבצע 3 שעות לאחר הפעלת P-PRP עם מלחי סידן או טרומבין23 או לאחר גרימת נזק לתאים על ידי שינוי טמפרטורה או תוספת של חומרי ניקוי לא יוניים24.</li>
	<li>עטפו את מזרק הלואר הסטרילי המכיל PRP בווילון סטרילי קטן ואטום עם מחט או מכסה סטרילי מחוברים כדי למנוע זיהום חיידקי של המוצר האורתוביולוגי (איור 4A). הערה: יש להכין את המבנה האנטומי של הסוס המיועד לטיפול להזרקה אספטית כמתואר בסעיף 1 לפרוטוקול זה. יש לרסן את הסוס ולהרגיע אותו כראוי כדי למזער את אי הנוחות ולהבטיח את שלומם של הסוס והווטרינר. יש לטפל במוצר ה-PRP באמצעות כפפות ומחטים סטריליות וניתן להפעיל אותו או לא על סמך העדפת המטפל (איור 4B).</li>
</ol>
4. ניתוח סטטיסטי
<ol>
	<li>אסוף נתונים על ספירת טסיות הלויקוציטים בדם מלא וב-PRP. הערכת נתוני נורמליות באמצעות מבחן קולמוגורוב-סמירנוב. אם הנתונים מופצים בדרך כלל (P &gt; 0.05), השווה ונתח את נתוני התא באמצעות מבחן t. אם נתוני ריכוז טסיות הדם והלויקוציטים אינם מופצים בדרך כלל (P &lt; 0.05), השווה ונתח נתונים באמצעות בדיקת Wilcoxon.</li>
	<li>קבע את ריכוז יעילות הטסיות והלויקוציטים ב-P-PRP לפי הנוסחאות הבאות25: יעילות איסוף טסיות = <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/67985/67985eq01.jpg" style="margin: auto;"> × 100 יעילות איסוף לויקוציטים = <img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/67985/67985eq02.jpg" style="margin: auto;"> × 100</li>
	<li>אסוף נתונים מריכוזי TGF-β1 ו-PDGF-BB בסופרנטנטים PRP בפלזמה (בקרה שלילית) (לאחר 3 שעות של הפעלה עם סידן גלוקונאט), וליזטים של PRP המתקבלים על ידי הוספת תמיסת דטרגנט לא יונית.</li>
	<li>השתמש במודל מעורב ליניארי כללי כדי להשוות את ריכוזי גורמי הגדילה בין פלזמה, סופרנטנטים PRP וליזאט PRP. במקרה של הבדלים סטטיסטיים משמעותיים, יש ליישם את מבחן הפוסט-הוק של Tukey.</li>
	<li>שקול את p &lt; ערכי 0.05 מובהקים סטטיסטית עבור כל הבדיקות.</li>
</ol>

<ol><li>Pérez Fraile, A., González-Cubero, E., Martínez-Flórez, S., Olivera, E. R., Villar-Suárez, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regenerative+medicine+applied+to+musculoskeletal+diseases+in+equines%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+Sci%22%5BJournal%5D)">Regenerative medicine applied to musculoskeletal diseases in equines: a systematic review.</a> Vet Sci. 10 (12), 666(2023).</li>
<li>Boone, L., Peroni, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Introduction+to+equine+biologic+and+regenerative+therapies%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+Clin+North+Am+Equine+Pract%22%5BJournal%5D)">Introduction to equine biologic and regenerative therapies.</a> Vet Clin North Am Equine Pract. 39 (3), 419-427 (2023).</li>
<li>Carmona, J. U., Gómez, W. A., López, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Could+platelet-rich+plasma+be+a+clinical+treatment+for+horses+with+laminitis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Equine+Vet+Sci%22%5BJournal%5D)">Could platelet-rich plasma be a clinical treatment for horses with laminitis.</a> J Equine Vet Sci. 61, 46-57 (2018).</li>
<li>Gilger, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+biologics+and+stem+cells+in+equine+ophthalmology%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+Clin+North+Am+Equine+Pract%22%5BJournal%5D)">Use of biologics and stem cells in equine ophthalmology.</a> Vet Clin North Am Equine Pract. 39 (3), 541-552 (2023).</li>
<li>Pereira, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+three+methods+of+platelet-rich+plasma+for+treatment+of+equine+distal+limb+skin+wounds%5BTitle%5D)+AND+%22J+Equine+Vet+Sci%22%5BJournal%5D)">Evaluation of three methods of platelet-rich plasma for treatment of equine distal limb skin wounds.</a> J Equine Vet Sci. 72, 1-7 (2019).</li>
<li>Camargo Garbin, L., Lopez, C., Carmona, J. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+critical+overview+of+the+use+of+platelet-rich+plasma+in+equine+medicine+over+the+last+decade%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Vet+Sci%22%5BJournal%5D)">A critical overview of the use of platelet-rich plasma in equine medicine over the last decade.</a> Front Vet Sci. 8, 641818(2021).</li>
<li>Jiménez-Aristizabal, R. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+cytokine+and+growth+factor+release+from+equine+platelet-rich+fibrin+clots+obtained+with+two+different+centrifugation+protocols%5BTitle%5D)+AND+%22Cytokine%22%5BJournal%5D)">Long-term cytokine and growth factor release from equine platelet-rich fibrin clots obtained with two different centrifugation protocols.</a> Cytokine. 97, 149-155 (2017).</li>
<li>McCarrel, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Equine+platelet-rich+plasma%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+Clin+North+Am+Equine+Pract%22%5BJournal%5D)">Equine platelet-rich plasma.</a> Vet Clin North Am Equine Pract. 39 (3), 429-442 (2023).</li>
<li>Garbin, L. C., Olver, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platelet-rich+products+and+their+application+to+osteoarthritis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Equine+Vet+Sci%22%5BJournal%5D)">Platelet-rich products and their application to osteoarthritis.</a> J Equine Vet Sci. 86, 102820(2020).</li>
<li>Anitua, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+platelet+rich+plasma-derived+extracellular+vesicles+for+regenerative+medicine%3A+a+systematic-narrative+review%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Advances in platelet rich plasma-derived extracellular vesicles for regenerative medicine: a systematic-narrative review.</a> Int J Mol Sci. 24 (17), 13043(2023).</li>
<li>Dohan Ehrenfest, D. M., Rasmusson, L., Albrektsson, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Classification+of+platelet+concentrates%3A+from+pure+platelet-rich+plasma+%28P-PRP%29+to+leucocyte-+and+platelet-rich+fibrin+%28L-PRF%29%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Classification of platelet concentrates: from pure platelet-rich plasma (P-PRP) to leucocyte- and platelet-rich fibrin (L-PRF).</a> Trends Biotechnol. 27 (3), 158-167 (2009).</li>
<li>Dohan Ehrenfest, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Classification+of+platelet+concentrates+%28platelet-rich+plasma-PRP%2C+platelet-rich+fibrin-PRF%29+for+topical+and+infiltrative+use+in+orthopedic+and+sports+medicine%3A+current+consensus%2C+clinical+implications+and+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Muscles+Ligaments+Tendons+J%22%5BJournal%5D)">Classification of platelet concentrates (platelet-rich plasma-PRP, platelet-rich fibrin-PRF) for topical and infiltrative use in orthopedic and sports medicine: current consensus, clinical implications and perspectives.</a> Muscles Ligaments Tendons J. 4 (1), 3-9 (2014).</li>
<li>Giraldo, C. E., Álvarez, M. E., Carmona, J. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+sodium+citrate+and+acid+citrate+dextrose+solutions+on+cell+counts+and+growth+factor+release+from+equine+pure-platelet+rich+plasma+and+pure-platelet+rich+gel%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of sodium citrate and acid citrate dextrose solutions on cell counts and growth factor release from equine pure-platelet rich plasma and pure-platelet rich gel.</a> BMC Vet Res. 11, 60(2015).</li>
<li>Argüelles, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+single+and+double+centrifugation+tube+methods+for+concentrating+equine+platelets%5BTitle%5D)+AND+%22Res+Vet+Sci%22%5BJournal%5D)">Evaluation of single and double centrifugation tube methods for concentrating equine platelets.</a> Res Vet Sci. 81 (2), 237-245 (2006).</li>
<li>Carmona, J. U., López, C., Sandoval, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Review+of+the+currently+available+systems+to+obtain+platelet+related+products+to+treat+equine+musculoskeletal+injuries%5BTitle%5D)+AND+%22Recent+Patents+on+Regenerative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Review of the currently available systems to obtain platelet related products to treat equine musculoskeletal injuries.</a> Recent Patents on Regenerative Medicine. 3 (2), 148-159 (2013).</li>
<li>Jildeh, T. R., Su, C. A., Vopat, M. L., Brown, J. R., Huard, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+commercially+available+point-of-care+devices+to+concentrate+platelet-rich+plasma%5BTitle%5D)+AND+%22Cureus%22%5BJournal%5D)">A review of commercially available point-of-care devices to concentrate platelet-rich plasma.</a> Cureus. 14 (8), e28498(2022).</li>
<li>Arita, A., Tobita, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adverse+events+related+to+platelet-rich+plasma+therapy+and+future+issues+to+be+resolved%5BTitle%5D)+AND+%22Regen+Ther%22%5BJournal%5D)">Adverse events related to platelet-rich plasma therapy and future issues to be resolved.</a> Regen Ther. 26, 496-501 (2024).</li>
<li>Sutter, W. W., Kaneps, A. J., Bertone, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+hematologic+values+and+transforming+growth+factor-beta+and+insulin-like+growth+factor+concentrations+in+platelet+concentrates+obtained+by+use+of+buffy+coat+and+apheresis+methods+from+equine+blood%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Vet+Res%22%5BJournal%5D)">Comparison of hematologic values and transforming growth factor-beta and insulin-like growth factor concentrations in platelet concentrates obtained by use of buffy coat and apheresis methods from equine blood.</a> Am J Vet Res. 65 (7), 924-930 (2004).</li>
<li>Mirza, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gait+changes+vary+among+horses+with+naturally+occurring+osteoarthritis+following+intra-articular+administration+of+autologous+platelet-rich+plasma%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Vet+Sci%22%5BJournal%5D)">Gait changes vary among horses with naturally occurring osteoarthritis following intra-articular administration of autologous platelet-rich plasma.</a> Front Vet Sci. 3, 29(2016).</li>
<li>Peng, C., Yang, L., Labens, R., Gao, Y., Zhu, Y., Li, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systematic+review+and+meta-analysis+of+the+efficacy+of+platelet-rich+plasma+products+for+treatment+of+equine+joint+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Equine+Vet+J%22%5BJournal%5D)">A systematic review and meta-analysis of the efficacy of platelet-rich plasma products for treatment of equine joint disease.</a> Equine Vet J. 56 (5), 858-869 (2024).</li>
<li>Alvarez, M. E., Giraldo, C. E., Carmona, J. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+bacterial+contamination+in+equine+platelet+concentrates+obtained+by+the+tube+method+in+a+clean+laboratory+environment+under+three+different+technical+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Equine+Vet+J%22%5BJournal%5D)">Monitoring bacterial contamination in equine platelet concentrates obtained by the tube method in a clean laboratory environment under three different technical conditions.</a> Equine Vet J. 42 (1), 63-67 (2010).</li>
<li>Pereira, R. C. dF., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Avalia%C3%A7%C3%A3o+de+sete+protocolos+para+obten%C3%A7%C3%A3o+de+plasma+rico+em+plaquetas+na+esp%C3%A9cie+equina%5BTitle%5D)+AND+%22Ci%C3%AAncia+Rural%22%5BJournal%5D)">Avaliação de sete protocolos para obtenção de plasma rico em plaquetas na espécie equina.</a> Ciência Rural. (6), (2013).</li>
<li>Giraldo, C. E., Álvarez, M. E., Carmona, J. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+calcium+salts+and+bovine+thrombin+on+growth+factor+release+from+equine+platelet-rich+gel+supernatants%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+Comp+Orthop+Traumatol%22%5BJournal%5D)">Influence of calcium salts and bovine thrombin on growth factor release from equine platelet-rich gel supernatants.</a> Vet Comp Orthop Traumatol. 30 (1), 1-7 (2017).</li>
<li>Carmona, J. U., López, C., Ceballos-Márquez, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+release+and+denature+of+several+mediators+in+pure+platelet-rich+plasma+and+temperature-induced+platelet+lysates+derived+from+a+similar+bovine+platelet+concentrate%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+Med+Int%22%5BJournal%5D)">Temporal release and denature of several mediators in pure platelet-rich plasma and temperature-induced platelet lysates derived from a similar bovine platelet concentrate.</a> Vet Med Int. 2022, 2609508(2022).</li>
<li>Weibrich, G., Kleis, W. K., Hitzler, W. E., Hafner, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+the+platelet+concentrate+collection+system+with+the+plasma-rich-in-growth-factors+kit+to+produce+platelet-rich+plasma%3A+a+technical+report%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Oral+Maxillofac+Implants%22%5BJournal%5D)">Comparison of the platelet concentrate collection system with the plasma-rich-in-growth-factors kit to produce platelet-rich plasma: a technical report.</a> Int J Oral Maxillofac Implants. 20 (1), 118-123 (2005).</li>
<li>Cecerska-Heryć, E., Goszka, M., Serwin, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+the+regenerative+capacity+of+platelets+in+modern+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Cytokine+Growth+Factor+Rev%22%5BJournal%5D)">Applications of the regenerative capacity of platelets in modern medicine.</a> Cytokine Growth Factor Rev. 64, 84-94 (2022).</li>
<li>Bahadir, B., Sarikaya, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platelet-rich+plasma+in+the+management+of+rotator+cuff+tendinopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Jt+Dis+Relat+Surg%22%5BJournal%5D)">Platelet-rich plasma in the management of rotator cuff tendinopathy.</a> Jt Dis Relat Surg. 35 (2), 462-467 (2024).</li>
<li>Harrison, P., Alsousou, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+on+platelet+rich+plasma+-+new+editorial+policy+for+%26%2334%3Bplatelets%26%2334%5BTitle%5D)+AND+%22Platelets%22%5BJournal%5D)">Studies on platelet rich plasma - new editorial policy for &#34;platelets&#34.</a> Platelets. 31 (3), 281-282 (2020).</li>
<li>Chahla, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+call+for+standardization+in+platelet-rich+plasma+preparation+protocols+and+composition+reporting%3A+a+systematic+review+of+the+clinical+orthopaedic+literature%5BTitle%5D)+AND+%22J+Bone+Joint+Surg+Am%22%5BJournal%5D)">A call for standardization in platelet-rich plasma preparation protocols and composition reporting: a systematic review of the clinical orthopaedic literature.</a> J Bone Joint Surg Am. 99 (20), 1769-1779 (2017).</li>
<li>Ríos, D. L., López, C., Álvarez, M. E., Samudio, I. J., Carmona, J. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+over+time+of+two+platelet+gel+supernatants+on+growth+factor%2C+cytokine+and+hyaluronan+concentrations+in+normal+synovial+membrane+explants+challenged+with+lipopolysaccharide%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Musculoskelet+Disord%22%5BJournal%5D)">Effects over time of two platelet gel supernatants on growth factor, cytokine and hyaluronan concentrations in normal synovial membrane explants challenged with lipopolysaccharide.</a> BMC Musculoskelet Disord. 16, 153(2015).</li>
<li>Carmona, J. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+effects+of+platelet-rich+gel+supernatants+on+histology+and+chondrocyte+apoptosis+scores%2C+hyaluronan+release+and+gene+expression+of+equine+cartilage+explants+challenged+with+lipopolysaccharide%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet+Res%22%5BJournal%5D)">In vitro effects of platelet-rich gel supernatants on histology and chondrocyte apoptosis scores, hyaluronan release and gene expression of equine cartilage explants challenged with lipopolysaccharide.</a> BMC Vet Res. 12 (1), 135(2016).</li>
<li>Castillo-Franz, C., López, C., Carmona, J. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+the+catabolic+and+anabolic+gene+expression+effects+and+histology+changes+induced+by+platelet-rich+gel+supernatants+in+equine+suspensory+ligament+explants+challenged+with+lipopolysaccharide%5BTitle%5D)+AND+%22MLTJ-Muscles+Ligaments+and+Tendons%22%5BJournal%5D)">Evaluation of the catabolic and anabolic gene expression effects and histology changes induced by platelet-rich gel supernatants in equine suspensory ligament explants challenged with lipopolysaccharide.</a> MLTJ-Muscles Ligaments and Tendons. 11 (1), 1-14 (2021).</li>
<li>Argüelles, D., Carmona, J. U., Climent, F., Muñoz, E., Prades, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autologous+platelet+concentrates+as+a+treatment+for+musculoskeletal+lesions+in+five+horses%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+Rec%22%5BJournal%5D)">Autologous platelet concentrates as a treatment for musculoskeletal lesions in five horses.</a> Vet Rec. 162 (7), 208-211 (2008).</li>
<li>Carmona, J. U., Argüelles, D., Climent, F., Prades, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autologous+platelet+concentrates+as+a+treatment+of+horses+with+osteoarthritis%3A+a+preliminary+pilot+clinical+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Equine+Vet+Sci%22%5BJournal%5D)">Autologous platelet concentrates as a treatment of horses with osteoarthritis: a preliminary pilot clinical study.</a> J Equine Vet Sci. 27 (4), 167-170 (2007).</li>
<li>Dejnek, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Content+of+blood+cell+components%2C+inflammatory+cytokines+and+growth+factors+in+autologous+platelet-rich+plasma+obtained+by+various+methods%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Orthop%22%5BJournal%5D)">Content of blood cell components, inflammatory cytokines and growth factors in autologous platelet-rich plasma obtained by various methods.</a> World J Orthop. 13 (6), 587-602 (2022).</li>
<li>Giraldo, C. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+the+breed%2C+sex+and+age+on+cellular+content+and+growth+factor+release+from+equine+pure-platelet+rich+plasma+and+pure-platelet+rich+gel%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of the breed, sex and age on cellular content and growth factor release from equine pure-platelet rich plasma and pure-platelet rich gel.</a> BMC Vet Res. 9, 29(2013).</li>
<li>Zimmermann, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sample+preparation+technique+and+white+cell+content+influence+the+detectable+levels+of+growth+factors+in+platelet+concentrates%5BTitle%5D)+AND+%22Vox+Sang%22%5BJournal%5D)">Sample preparation technique and white cell content influence the detectable levels of growth factors in platelet concentrates.</a> Vox Sang. 85 (4), 283-289 (2003).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>10 מ"ל צינורות איסוף דם ורידי רגיל&nbsp;</td><td>BD Vacutainer, פרנקלין לייקס, ניו ג'רזי, ארה"ב</td><td>מספר סימוכין למוצר 366430</td><td>זו רק דוגמה, ניתן להשתמש בצינורות של מותגים אחרים.</td></tr><tr><td>4.5 מ"ל צינורות נתרן ציטראט (105 M/3. 2%)&nbsp;</td><td>BD Vacutainer, פרנקלין לייקס, ניו ג'רזי, ארה"ב</td><td>107451</td><td>זו רק דוגמה, ניתן להשתמש בצינורות של מותגים אחרים.</td></tr><tr><td>צנטריפוגת ספסל</td><td>Rotofix 32A, Hettich GmbH, טוטלינגן, גרמניה</td><td></td><td>ניתן להשתמש בצנטריפוגות ספסל אחרות.</td></tr><tr><td>מחט פרפר (21 גרם ופעמים; 0.75 אינץ') עם 12 אינץ'. צינורות ומחזיק מחובר מראש&nbsp;</td><td>סט איסוף דם Safety-Lok, שואב אבק BD, פרנקלין לייקס, ניו ג'רזי, ארה"ב</td><td>סימוכין 367296</td><td>זו רק דוגמה, ניתן להשתמש במחטי פרפר של מותגים אחרים.</td></tr><tr><td>תמיסת קצף כלורהקסידין בריכוז של 2.3-4%&nbsp;</td><td></td><td></td><td>המותג או השמות המסחריים של מוצרים אלה עשויים להשתנות ממדינה למדינה.</td></tr><tr><td>קולט אדים למינרי Class II</td><td>תרמו פישר סיינטיפיק, וולת'אם, מסצ'וסטס, ארה"ב</td><td></td><td>ניתן להשתמש בקולטי אדים למינאריים אחרים מסוג II</td></tr><tr><td>קוראת ELISA</td><td>תרמו פישר סיינטיפיק, וולת'אם, מסצ'וסטס, ארה"ב</td><td></td><td></td></tr><tr><td>אלכוהול אתילי ב-95%</td><td></td><td></td><td>המותג או השמות המסחריים של מוצרים אלה עשויים להשתנות ממדינה למדינה.</td></tr><tr><td>PDGF-BB דואוסט אנושי ELISA</td><td>מו"פ D Systems, Inc, מקינלי פלייס, מינסוטה, ארה"ב</td><td>DY220</td><td></td></tr><tr><td>TGF-בטא אנושי 1 DouSet ELISA</td><td>מו"פ D Systems, Inc, מקינלי פלייס, מינסוטה, ארה"ב</td><td>DY240</td><td></td></tr><tr><td>תמיסת קצף יוד פובידון ב-4-10%&nbsp;</td><td></td><td></td><td>המותג או השמות המסחריים של מוצרים אלה עשויים להשתנות ממדינה למדינה.</td></tr><tr><td>תוכנת SPSS 25.0</td><td>IBM Corp, SPSS, ניו יורק, ארה"ב</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מזרקי לואר סטריליים בנפחים שונים&nbsp;</td><td>Discardit Syringe, BD Vacutainer, פרנקלין לייקס, ניו ג'רזי, ארה"ב</td><td></td><td>זו רק דוגמה, ניתן להשתמש במזרקים של מותגים אחרים.</td></tr><tr><td>מחט עמוד שדרה סטרילית (18 גרם ופעמים; 90 מ"מ)&nbsp;</td><td>BD Quincke Spinel Needle, פרנקלין לייקס, ניו ג'רזי, ארה"ב</td><td></td><td>זו רק דוגמה, ניתן להשתמש במחטי עמוד שדרה של מותגים אחרים.</td></tr></tbody></table>

שיטת צינור צנטריפוגה כפולה פשוטה להשגת פלזמה עשירה בטסיות דם מדם סוסים

A Simple Double Centrifugation Tube Method to Obtain Platelet-rich Plasma from Equine Blood

ספירת הטסיות הממוצעת (טסיות דם × 103/μL) הייתה גבוהה משמעותית ב-PRP מאשר בדם מלא (p &lt; 0.001). לעומת זאת, ריכוז הלויקוציטים הממוצע (לויקוציטים ×10 3/μL) ב-PRP היה נמוך משמעותית מזה שבדם מלא (p &lt; 0.001) (טבלה 1). באופן ספציפי, ספירת הטסיות ב-PRP הייתה גבוהה פי 2.41 מאשר בדם מלא, בעוד שריכוז הלויקוציטים ב-PRP היה נמוך פי 0.44. יעילות האיסוף עבור PLT ב-PRP הייתה 17%, בעוד שיעילות איסוף הלויקוציטים ב-PRP הייתה 3.1%.
ריכוזי TGF-β1 היו שונים באו...

Platelet-rich plasma (PRP) is widely utilized as a routine treatment for chronic musculoskeletal conditions in horses, such as osteoarthritis, ...

a-simple-double-centrifugation-tube-method-to-obtain-platelet-rich

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

Lysate טסיות הדם האנושי הוא מקור עשיר של גורמי גדילה תוסף חזק בתרבות התא. פרוטוקול זה מציג את תהליך הכנת מאגר גדול של lysate הטסיות על ידי אנוש החל פלזמה עשירה בטסיות, ביצוע מספר להקפיא להפשיר מחזורים depleting שברי הטסיות.

הכנת lysate משולב טסיות דם האדם (pHPL) כתוסף יעיל עבור בעלי חיים סרום ללא בתרביות תאים האדם גזע

סרטון זה מדגים את הכנת הפלזמה העשירה בטסיות (PRP) באיכות גבוהה על ידי בדיקת ספירת טסיות דם, איסוף וצנטריפוגה של דם ובידוד טסיות דם. PRP זה משמש ביישומים טיפוליים להתחדשות וריפוי רקמות.

הכנת פלזמה עשירה בטסיות דם מדם היקפי אנושי

אנו מתארים מתודולוגיה לעיבוד דם מלא כדי להשיג מגוון רכיבים להמשך ניתוח. ביצענו אופטימיזציה של פרוטוקול יעיל המאפשר עיבוד מהיר ותפוקה גבוהה בו-זמנית של דגימות דם מלא בסביבה לא קלינית.

פלזמה מהירה ובידוד של מרכיבי דם שלמים בדגימות שהתקבלה מהגדרה מבוססת-קהילה

Leucocyte-Platelet Rich Fibrin (L-PRF) מייצג תכשיר שאושר על ידי ה-FDA של תרכיזי טסיות אוטולוגיים בעל ארכיטקטורת פיברין ייחודית, טסיות מועשרות וגורמי גדילה בשפע. כאן, אנו מציגים פרוטוקול ליצירת L-PRF בצד הכיסא וכן מעריכים את תכונותיו המכניות כולל בדיקות חד ציריות ובדיקת חוזק שימור תפרים.

אפיון של יקוציט-טסיות העשיר הפיברין, רומן ביולוגי

אנו מתארים שיטה פשוטה עבור בידוד של טסיות נשטף מן הדם האנושי ואחריו מדידות צימות טסיות דם הנגרמת אגוניסט ידי turbidimetry. כדוגמא אנחנו מיישמים שיטה זו לחקר התגובה אגרגציה של טסיות אדם קולגן לאחר דגירה מראש עם מעכב ערוץ Pannexin1 בריליאנט בלו FCF.

Turbidimetry על אדם שנשטף טסיות: השפעת מעכבי Pannexin1 FCF הכחול המבריק על צבירה מושרת קולגן

בנייר זה, אנו מתארים שיטה להערכת Willebrand פון אנדותל מקדם שחרור, טסית דם עוקבות של לכידת תחת גזירה נוזלים בתגובה לגירויים דלקתיות באמצעות מערכת קאמרית זרימה במבחנה .

חוקרים פון Willebrand גורם פתופסיולוגיה באמצעות מודל קאמרית זרימה של פון Willebrand פקטור-טסיות מחרוזת היווצרות

כאן, דמו של העכבר נאסף. בנוכחות אנטי-מקריש טסיות היו מטוהרים על ידי המדיום iohexol באמצעות מהירות נמוכה צנטריפוגה. טסיות הדם הופעלו עם תרומבין. כדי לחקור אם הם היו מעשי האיכות של טסיות מטוהר נותחו על ידי cy, מיקרוסקופ זרימה.

טיהור של טסיות מתוך דם העכבר

פרוטוקול זה מפרט הכנה קלינית ליישום של דגימות PBMC ופלזמה באיכות גבוהה באתר הניסוי הקליני שניתן להשתמש בהן לניתוח סמנים ביולוגיים תרגומיים.

הכנת כדורי תאים מונונוקולריים בדם היקפי ופלזמה מהגרלת דם אחת באתרי ניסוי קליני לניתוח סמנים ביולוגיים

היווצרות טסיות דם מעודדות נקשרה עם סיכון מוגבר לפקקת. מוצג כאן פרוטוקול מדויק לבידוד טסיות דם שטופות מדם אדם, שנועד לכמת את החשיפה של פוספטידיל-סרין ושחרור מיקרו-שלפוחית, שהם מאפיינים ייחודיים של טסיות מעודדות.

אפיון טסיות מעודדות קרישה על ידי מדידת חשיפה לפוספטידיל-סרין ושחרור מיקרו-שלפוחיות מטסיות אדם מטוהרות

חילוף החומרים של טסיות הדם מעניין, במיוחד בכל הנוגע לתפקיד של היפראקטיביות והיפראקטיביות של טסיות דם בדימום והפרעות פקקת. בידוד טסיות הדם מפלזמה הכרחי לכמה בדיקות מטבוליות; מוצגת כאן שיטה לבידוד מטבוליטים תוך-תאיים מטסיות דם שטופות.

הכנת טסיות דם אנושיות שטופות למחקרי שטף מטבולי כמותי

למדו שיטת צינור צנטריפוגה כפולה פשוטה להכנת פלזמה עשירה בטסיות דם מדם סוסים לטיפול בהפרעות מוסקולוסקלטיות. הפרוטוקול מבטיח סטריליות ועקביות בהפחתת לויקוציטים לשימוש קליני שגרתי.

שיטת צינור צנטריפוגה כפולה פשוטה להשגת פלזמה עשירה בטסיות דם מדם סוסים

גלה סרטונים נוספים