Name: ב Vivo הדמיה של פעילות עצבית בזבובים בוגרים של דרוזופילה לא מורדמת (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-20T13:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 15 s
Description: חקור מנגנוני שכחה עצביים בדרוזופילה בוגרת באמצעות הדמיה חיה ללא הרדמה. שיטה זו מאפשרת לחקור פעילות נוירונים דופמינרגיים וקשרים בין זיכרון לשכחה תוך שמירה על גמישות קוגניטיבית.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

<ol><li>Nakai, J., Ohkura, M., Imoto, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+high+signal-to-noise+Ca2%2B+probe+composed+of+a+single+green+fluorescent+protein%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">A high signal-to-noise Ca2+ probe composed of a single green fluorescent protein.</a> Nat Biotechnol. 19 (2), 137-141 (2001).</li>
<li>Chen, T. W., Wardill, T. J., Sun, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasensitive+fluorescent+proteins+for+imaging+neuronal+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Ultrasensitive fluorescent proteins for imaging neuronal activity.</a> Nature. 499 (7458), 295-300 (2013).</li>
<li>Tian, L., Hires, S. A., Mao, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+neural+activity+in+worms%2C+flies+and+mice+with+improved+GCaMP+calcium+indicators%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Imaging neural activity in worms, flies and mice with improved GCaMP calcium indicators.</a> Nat Methods. 6 (12), 875-881 (2009).</li>
<li>Akerboom, J., Chen, T. W., Wardill, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+a+GCaMP+calcium+indicator+for+neural+activity+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Optimization of a GCaMP calcium indicator for neural activity imaging.</a> J Neurosci. 32 (40), 13819-13840 (2012).</li>
<li>Zhao, Y., Araki, S., Wu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+expanded+palette+of+genetically+encoded+Ca2%2B+indicators%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">An expanded palette of genetically encoded Ca2+ indicators.</a> Science. 333 (6051), 1888-1891 (2011).</li>
<li>Sun, F., Zeng, J., Jing, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+genetically+encoded+fluorescent+sensor+enables+rapid+and+specific+detection+of+dopamine+in+flies%2C+fish%2C+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">A genetically encoded fluorescent sensor enables rapid and specific detection of dopamine in flies, fish, and mice.</a> Cell. 174 (2), 481-496 (2018).</li>
<li>Li, Y., Tsien, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((pHTomato%2C+a+red%2C+genetically+encoded+indicator+that+enables+multiplex+interrogation+of+synaptic+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">pHTomato, a red, genetically encoded indicator that enables multiplex interrogation of synaptic activity.</a> Nat Neurosci. 15 (7), 1047-1053 (2012).</li>
<li>Wang, L., Wu, C., Peng, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+high-performance+genetically+encoded+fluorescent+indicator+for+in+vivo+cAMP+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">A high-performance genetically encoded fluorescent indicator for in vivo cAMP imaging.</a> Nat Commun. 13 (1), 5363(2022).</li>
<li>Jing, M., Zhang, P., Wang, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+genetically+encoded+fluorescent+acetylcholine+indicator+for+in+vitro+and+in+vivo+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">A genetically encoded fluorescent acetylcholine indicator for in vitro and in vivo studies.</a> Nat Biotechnol. 36 (8), 723-737 (2018).</li>
<li>Yu, D., Akalal, D. B. G. B., Davis, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+alpha%2Fbeta+mushroom+body+neurons+form+a+branch-specific%2C+long-term+cellular+memory+trace+after+spaced+olfactory+conditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Drosophila alpha/beta mushroom body neurons form a branch-specific, long-term cellular memory trace after spaced olfactory conditioning.</a> Neuron. 52 (5), 845-855 (2006).</li>
<li>Hige, T., Aso, Y., Modi, M. N., Rubin, G. M., Turner, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterosynaptic+plasticity+underlies+aversive+olfactory+learning+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Heterosynaptic plasticity underlies aversive olfactory learning in Drosophila.</a> Neuron. 88 (5), 985-998 (2015).</li>
<li>Berry, J. A., Phan, A., Davis, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dopamine+neurons+mediate+learning+and+forgetting+through+bidirectional+modulation+of+a+memory+trace%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Dopamine neurons mediate learning and forgetting through bidirectional modulation of a memory trace.</a> Cell Rep. 25 (3), 651-662 (2018).</li>
<li>Cervantes-Sandoval, I., Davis, R. L., Berry, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rac1+impairs+forgetting-induced+cellular+plasticity+in+mushroom+body+output+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Rac1 impairs forgetting-induced cellular plasticity in mushroom body output neurons.</a> Front Cell Neurosci. 14, 258(2020).</li>
<li>Martinez-Cervantes, J., Shah, P., Phan, A., Cervantes-Sandoval, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+order+unimodal+olfactory+sensory+preconditioning+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">High order unimodal olfactory sensory preconditioning in Drosophila.</a> Elife. 11, 79107(2022).</li>
<li>Faber, T., Joerges, J., Menzel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Associative+learning+modifies+neural+representations+of+odors+in+the+insect+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Associative learning modifies neural representations of odors in the insect brain.</a> Nat Neurosci. 2 (1), 74-78 (1999).</li>
<li>Yu, D., Baird, G. S., Tsien, R. Y., Davis, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+calcium+transients+in+Drosophila+mushroom+body+neurons+with+camgaroo+reporters%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Detection of calcium transients in Drosophila mushroom body neurons with camgaroo reporters.</a> J Neurosci. 23 (1), 64-72 (2003).</li>
<li>Yu, D., Keene, A. C., Srivatsan, A., Waddell, S., Davis, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+DPM+neurons+form+a+delayed+and+branch-specific+memory+trace+after+olfactory+classical+conditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Drosophila DPM neurons form a delayed and branch-specific memory trace after olfactory classical conditioning.</a> Cell. 123 (5), 945-957 (2005).</li>
<li>Yu, D., Ponomarev, A., Davis, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Altered+representation+of+the+spatial+code+for+odors+after+olfactory+classical+conditioning%3A+Memory+trace+formation+by+synaptic+recruitment%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Altered representation of the spatial code for odors after olfactory classical conditioning: Memory trace formation by synaptic recruitment.</a> Neuron. 42 (3), 437-449 (2004).</li>
<li>Tully, T., Quinn, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Classical+conditioning+and+retention+in+normal+and+mutant+Drosophilamelanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Physiol+A%22%5BJournal%5D)">Classical conditioning and retention in normal and mutant Drosophilamelanogaster.</a> J Comp Physiol A. 157 (2), 263-277 (1985).</li>
<li>Quinn, W. G., Harris, W. A., Benzer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conditioned+behavior+in+Drosophilamelanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Conditioned behavior in Drosophilamelanogaster.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 71 (3), 708-712 (1974).</li>
<li>Quinn, W. G., Dudai, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Memory+phases+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Memory phases in Drosophila.</a> Nature. 262 (5569), 576-577 (1976).</li>
<li>Tempel, B. L., Bonini, N., Dawson, D. R., Quinn, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reward+learning+in+normal+and+mutant+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Reward learning in normal and mutant Drosophila.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 80 (5), 1482-1486 (1983).</li>
<li>Turner, G. C., Bazhenov, M., Laurent, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Olfactory+representations+by+Drosophila+mushroom+body+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Olfactory representations by Drosophila mushroom body neurons.</a> J Neurophysiol. 99 (2), 734-746 (2008).</li>
<li>de Belle, J. S., Heisenberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Associative+odor+learning+in+Drosophila+abolished+by+chemical+ablation+of+mushroom+bodies%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Associative odor learning in Drosophila abolished by chemical ablation of mushroom bodies.</a> Science. 263 (5147), 692-695 (1979).</li>
<li>Schwaerzel, M., Monastirioti, M., Scholz, H., Friggi-Grelin, F., Birman, S., Heisenberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dopamine+and+octopamine+differentiate+between+aversive+and+appetitive+olfactory+memories+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Dopamine and octopamine differentiate between aversive and appetitive olfactory memories in Drosophila.</a> J Neurosci. 23 (33), 10495-10502 (2003).</li>
<li>Kim, Y. C., Lee, H. G., Han, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((D1+dopamine+receptor+dDA1+is+required+in+the+mushroom+body+neurons+for+aversive+and+appetitive+learning+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">D1 dopamine receptor dDA1 is required in the mushroom body neurons for aversive and appetitive learning in Drosophila.</a> J Neurosci. 27 (29), 7640-7647 (2007).</li>
<li>Riemensperger, T., Völler, T., Stock, P., Buchner, E., Fiala, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Punishment+prediction+by+dopaminergic+neurons+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Punishment prediction by dopaminergic neurons in Drosophila.</a> Curr Biol. 15 (21), 1953-1960 (2005).</li>
<li>Mao, Z., Davis, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eight+different+types+of+dopaminergic+neurons+innervate+the+Drosophila+mushroom+body+neuropil%3A+Anatomical+and+physiological+heterogeneity%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neural+Circuits%22%5BJournal%5D)">Eight different types of dopaminergic neurons innervate the Drosophila mushroom body neuropil: Anatomical and physiological heterogeneity.</a> Front Neural Circuits. 3 (5), 1-17 (2009).</li>
<li>Liu, C., Plaçais, P. Y., Yamagata, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+subset+of+dopamine+neurons+signals+reward+for+odour+memory+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A subset of dopamine neurons signals reward for odour memory in Drosophila.</a> Nature. 488 (7412), 512-516 (2012).</li>
<li>Burke, C. J., Huetteroth, W., Owald, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Layered+reward+signaling+through+octopamine+and+dopamine+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Layered reward signaling through octopamine and dopamine in Drosophila.</a> Nature. 492 (7429), 433-437 (2012).</li>
<li>Tomchik, S. M., Davis, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamics+of+learning-related+cAMP+signaling+and+stimulus+integration+in+the+Drosophila+olfactory+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Dynamics of learning-related cAMP signaling and stimulus integration in the Drosophila olfactory pathway.</a> Neuron. 64 (4), 510-521 (2009).</li>
<li>Gervasi, N., Tchenio, P., Preat, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PKA+dynamics+in+a+Drosophila+learning+center%3A+Coincidence+detection+by+rutabaga+adenylyl+cyclase+and+spatial+regulation+by+dunce+phosphodiesterase%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">PKA dynamics in a Drosophila learning center: Coincidence detection by rutabaga adenylyl cyclase and spatial regulation by dunce phosphodiesterase.</a> Neuron. 65 (4), 516-529 (2010).</li>
<li>Séjourné, J., Plaçais, P. Y., Aso, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mushroom+body+efferent+neurons+responsible+for+aversive+olfactory+memory+retrieval+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Mushroom body efferent neurons responsible for aversive olfactory memory retrieval in Drosophila.</a> Nat Neurosci. 14 (7), 903-910 (2011).</li>
<li>Aso, Y., Sitaraman, D., Ichinose, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mushroom+body+output+neurons+encode+valence+and+guide+memory-based+action+selection+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Mushroom body output neurons encode valence and guide memory-based action selection in Drosophila.</a> Elife. 3, 04580(2014).</li>
<li>Pai, T. P., Chen, C. C., Lin, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+ORB+protein+in+two+mushroom+body+output+neurons+is+necessary+for+long-term+memory+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Drosophila ORB protein in two mushroom body output neurons is necessary for long-term memory formation.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 110 (19), 7898-7903 (2013).</li>
<li>Owald, D., Felsenberg, J., Talbot, C. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activity+of+defined+mushroom+body+output+neurons+underlies+learned+olfactory+behavior+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Activity of defined mushroom body output neurons underlies learned olfactory behavior in Drosophila.</a> Neuron. 86 (2), 417-427 (2015).</li>
<li>Perisse, E., Owald, D., Barnstedt, O., Talbot, C. B., Huetteroth, W., Waddell, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aversive+learning+and+appetitive+motivation+toggle+feed-forward+inhibition+in+the+Drosophila+mushroom+body%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Aversive learning and appetitive motivation toggle feed-forward inhibition in the Drosophila mushroom body.</a> Neuron. 90 (5), 1086-1099 (2016).</li>
<li>Aso, Y., Rubin, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dopaminergic+neurons+write+and+update+memories+with+cell-type-specific+rules%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Dopaminergic neurons write and update memories with cell-type-specific rules.</a> Elife. 5, 16135(2016).</li>
<li>Hige, T., Aso, Y., Rubin, G. M., Turner, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasticity-driven+individualization+of+olfactory+coding+in+mushroom+body+output+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Plasticity-driven individualization of olfactory coding in mushroom body output neurons.</a> Nature. 526 (7572), 258-262 (2015).</li>
<li>MacMillan, H. A., Nørgård, M., MacLean, H. J., Overgaard, J., Williams, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+critical+test+of+Drosophila+anaesthetics%3A+Isoflurane+and+sevoflurane+are+benign+alternatives+to+cold+and+CO2%5BTitle%5D)+AND+%22J+Insect+Physiol%22%5BJournal%5D)">A critical test of Drosophila anaesthetics: Isoflurane and sevoflurane are benign alternatives to cold and CO2.</a> J Insect Physiol. 101, 97-106 (2017).</li>
<li>Margulies, C., Tully, T., Dubnau, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deconstructing+memory+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Deconstructing memory in Drosophila.</a> Curr Biol. 15 (17), R700-R713 (2005).</li>
<li>Amiri, A., Karvandian, K., Ramezani, N., Amiri, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short-term+memory+impairment+in+patients+undergoing+general+anesthesia+and+its+contributing+factors%5BTitle%5D)+AND+%22Saudi+J+Anaesth%22%5BJournal%5D)">Short-term memory impairment in patients undergoing general anesthesia and its contributing factors.</a> Saudi J Anaesth. 14 (4), 454-458 (2020).</li>
<li>Wang, R., Zhang, L., Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophysiological+activity+pattern+of+mouse+hippocampal+CA1+and+dentate+gyrus+under+isoflurane+anesthesia%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Electrophysiological activity pattern of mouse hippocampal CA1 and dentate gyrus under isoflurane anesthesia.</a> Front Cell Neurosci. , 18(2024).</li>
<li>Berry, J. A., Cervantes-Sandoval, I., Chakraborty, M., Davis, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sleep+facilitates+memory+by+blocking+dopamine+neuron-mediated+forgetting%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Sleep facilitates memory by blocking dopamine neuron-mediated forgetting.</a> Cell. 161, 1656-1667 (2015).</li>
<li>Delestro, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+large-scale+analysis+of+Drosophila+neuronal+calcium+traces+by+automated+tracking+of+single+somata%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">In vivo large-scale analysis of Drosophila neuronal calcium traces by automated tracking of single somata.</a> Sci Rep. 10, 1-15 (2020).</li>
<li>Moore, R. J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FicTrac%3A+A+visual+method+for+tracking+spherical+motion+and+generating+fictive+animal+paths%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">FicTrac: A visual method for tracking spherical motion and generating fictive animal paths.</a> J Neurosci Methods. 225, 106-119 (2014).</li>
<li>Seelig, J. D., Chiappe, M. E., Lott, G. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two-photon+calcium+imaging+from+head-fixed+Drosophila+during+optomotor+walking+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Two-photon calcium imaging from head-fixed Drosophila during optomotor walking behavior.</a> Nat Methods. 7 (7), 535-540 (2010).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0.102 מ"מ חוט פלטינה</td><td>Surepure Chemetals</td><td>2690</td><td></td></tr><tr><td>0.25 OD, 0.125 ID, צינורות סיליקון מרפאים פלטינה</td><td>VWR</td><td>89068-474</td><td></td></tr><tr><td>0.3 מ"מ ID צינורות סיליקון&nbsp;</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>11-189-14</td><td></td></tr><tr><td>תקעי בננה</td><td>אמזון</td><td></td><td></td></tr><tr><td>גיליון אקריליק שחור לתא 0.0125 במותג</td><td>דיוק</td><td>44250</td><td></td></tr><tr><td>סידן כלוריד</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>746495</td><td></td></tr><tr><td>רשת הלם נחושת</td> ספק <td></td><td></td>כוח <td>DC בהתאמה אישית</td></tr><tr><td>עבור נגד פלטינה</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>S35740</td><td></td></tr><tr><td>כלי Dremel 3000-1</td><td>Dremel</td><td>3000-N/18</td><td></td></tr><tr><td>Drosophila melanogaster / ;; uas-tdtom</td><td>BDSC</td><td>36328</td><td></td></tr><tr><td>Drosophila melanogaster / ; uas-gcamp6f;</td><td>BDSC</td><td>42747</td><td>קו uas זה שולב עם ;; uas-td-tom כדי ליצור מלאי המכיל את שתי ההחדרות</td></tr><tr><td>Drosophila melanogaster/ ;; MB077C-gal4</td><td>BDSC</td><td>68287</td><td></td></tr><tr><td>דבק אפוקסי&nbsp;</td><td>גורילה</td><td>4200102</td><td></td></tr><tr><td>מד זרימת גז 1.5 LPM</td><td>אמזון</td><td>B01N0UWZ2T</td><td></td></tr><tr><td>זכוכית 1 מ"ל פיפטה סרולוגית&nbsp;</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>50-232-9516</td><td></td></tr><tr><td>מגלשות זכוכית</td><td>פישר סיינטיפיק&nbsp;</td><td>12-550-A3</td><td></td></tr><tr><td>גלוקוז</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>G7528</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>H4034</td><td></td></tr><tr><td>צינורות מד היפודרמי 12TW</td><td>מיקרו-קבוצה</td><td>316H12TW</td><td></td></tr><tr><td>היפודרמי 22X מד צינורות</td><td>מיקרו-קבוצה</td><td>304H22X</td><td></td></tr><tr><td>מגנזיום כלוריד הקסהידרט</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>M9272</td><td></td></tr><tr><td>חומצה מיריסטית</td><td>אקרוס אורגני</td><td>156961000</td><td></td></tr><tr><td>מגנטים ניאודימיום 3X2 מ"מ</td><td>אמזון</td><td>B0CXSQ387M</td><td></td></tr><tr><td>P1000 טיפים</td><td>Genesee Scientific&nbsp;</td><td>23-165RL</td><td></td></tr><tr><td>P200 טיפים</td><td>Genesee Scientific&nbsp;</td><td>23-150RL</td><td></td></tr><tr><td>מחבר דחיפה פנאומטי 6 מ"מ OD</td><td>אמזון</td><td>B07ZHG8Y1Y</td><td></td></tr><tr><td>אשלגן כלורי</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>P3911</td><td></td></tr><tr><td>צינורות PTFE 6 מ"מ OD</td> סכיני גילוח <td>אמזון</td><td></td><td></td></tr><tr><td>&nbsp;</td><td>אמזון</td><td>B08LYD6645</td><td></td></tr><tr><td>נתרן ביקרבונט</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>S5761</td><td></td></tr><tr><td>נתרן כלורי</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>S271-500</td><td></td></tr><tr><td>נתרן פוספט דו-בסיסי</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>S0876</td><td></td></tr><tr><td>סוכרוז</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>S9378</td><td></td></tr><tr><td>טרהלוז</td><td>סיגמא-אולדריץ</td>' <td>T0167</td><td></td></tr></tbody></table>

ב vivo הדמיה של פעילות עצבית בזבובים בוגרים של דרוזופילה לא מורדמת

In Vivo Imaging of Neural Activity in Unanesthetized Drosophila Adult Flies

כאן, הדמיה in vivo של דרוזופילה בוגרת ללא הרדמה משמשת לחקירת התניה של חוש הריח המעורר פלסטיות בנוירון פלט גוף פטריות מאופיין היטב (MBON γ2α'1)12. אינדיקטור הסידן GCaMP6f2, יחד עם החלבון הפלואורסצנטי האדום TdTom, מתבטאים בתא עצב פלט MB, שהדנדריטים שלו מעצבבים את התא של אונות MB γ ו-α' והוא ממוקד גנטית ל-MBON γ2α'1 באמצעות קו ה-Gal4 המפוצל MB077C34 (איור 2A,B).
כדי לצפות בפלסטיות לאחר מיזוג ריח מרתיע, הזבוב מונח מתחת למיקרוסקופ קונפוקלי, כאשר בטנו ורגליו מיושרות לאמצע רשת ההלם ופיפטת העברת הריח מכוונת לעבר האנטנה של הזבוב. ראשית, תגובות ריח סידן נרשמו לפולס של 5 שניות של 4-מתיל ציקלוהקסנול (MCH) ואחריו דופק של 5 שניות של 3-אוקטנול (OCT), מופרד על ידי מרווח בין גירוי של 30 שניות. חמש דקות לאחר מכן, הזבובים אומנו על ידי הצגה בו-זמנית של דופק OCT (CS+) של דקה אחת יחד עם זעזועים של 12, 90 וולט. לוח זמנים אסוציאטיבי זה מייצר זיכרון התנהגותי מרתיע חזק. לבסוף, 5 דקות ו-15 דקות לאחר ההתניה תועדו תגובות סידן ל-MCH ו-OCT כמו לפני האימון. MBON γ2α'1 מגיב בעוצמה על ידי מעברי סידן הן ל-MCH והן ל-OCT לפני ההתניה (איור 2D-F). עם זאת, בהתאם לממצאים קודמים12, 5 דקות לאחר התניה תגובות סידן ל-CS+ (OCT) מדוכאות לחלוטין (איור 2D-F). בנוסף, התגובות ל-CS- (MCH), היו מוגברות באופן משמעותי. רבע שעה לאחר האימון הדגימה תוצאות דומות, שכן תגובת הסידן ל-CS+ הייתה מדוכאת באופן משמעותי ו-CS הוגבר. התוצאות האלה מצביעות על כך שעקבות הזיכרון שנצפו בשני הריחות נמשכים לפחות 15 דקות (איור 2D-F). תגובות אלה כומתו באמצעות תגובת הריח הממוצעת במהלך פעימת 5 שניות והושוו בתוך הזבוב. ניתן להמחיש את השינויים האלה בתגובות הריח גם על ידי ייצוג פסאודו-צבעוני של השינוי באימון הקרינה של GCaMP6 לפני ואחרי האימון המרתיע (איור 2E). לעומת זאת, הרדמת הזבוב במהלך ההכנה מראה פלסטיות מופחתת הן ל-CS+ והן ל-CS-. רק דיכאון חלקי ל-CS+ נצפה בבעלי חיים מורדמים, מכיוון שתגובות לאחר האימון עדיין קיימות. בנוסף, תגובות CS אינן שונות באופן משמעותי לאחר אימון (איור 2G,H). כדי להתבונן בזה טוב יותר, חישבנו את הפלסטיות המושרית כיחס של CS+/CS- והראינו שזבובים שאינם מורדמים מראים פלסטיות מוגברת באופן משמעותי בהשוואה לחיות מורדמות (איור 2I). תוצאות מייצגות אלו מצביעות על כך שפרוטוקול זה מתאים לחקר למידה וזיכרון תחת מיקרוסקופ ומבטיח את בריאות הזבוב במהלך הדמיה מנוירונים לאורך זמן. פרוטוקול זה הוא רב תכליתי מספיק וניתן ליישם אותו על סוגים אחרים של הדמיה in vivo ונוירונים אחרים מעניינים.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68332/68332fig01.jpg"> 
איור 1: הכנת הדמיה in vivo של דרוזופילה ללא שימוש בהרדמה. (A) פאנל עליון: תרשים הממחיש את השלבים הכרוכים בהכנת אספירטור. פנל תחתון: תרשים המציג את התא המוחזק במיקרומניפולטור במהלך מיקום הזבוב. הפרובוסקיס של הזבוב ממוקם בפתח צינורות מתכת המחוברים לוואקום במהירות של 500 מ"ל לדקה באמצעות שואב. לאחר מכן החדר ממוקם מעל הזבוב. (B) צידי העיניים ובית החזה מודבקים בחומצה מיריסטית באמצעות נגד פלטינה מותאם אישית. (C) חוטם הזבוב מוסר מצינור המתכת, והתא הפוך כדי לאפשר להדביק את הפרובוסקיס למקומו, ובכך למזער את התנועה במהלך ההקלטות. (ד) התא מחובר לבסיס מגלשה מזכוכית. סרט מוחל על החלק העליון של החדר, מכסה את האנטנות, ועל הצד האחורי כדי למנוע דליפת מי מלח. (E) שני חתכים אנכיים נעשים לאורך הקוטיקולה ליד העיניים המורכבות, ואחריהם חתך שלישי לאורך הקוטיקולה ליד בית החזה, מה שיוצר "חלון" למוח. (F) בין 100 ל-200 מיקרוליטר של מי מלח מתווספים לראש הזבוב באתר החתכים. (G) חלון הקוטיקולה מורם, נמשך ומנותק באמצעות מלקחיים חדים ועדינים כדי לחשוף את המוח. (H) רקמות שומן וקנה הנשימה מוסרות כדי לאפשר ויזואליה ברורה של תאי מוח תחת המיקרוסקופ. (I) הזבוב המוכן ממוקם מתחת למיקרוסקופ וממוקם כשגופו מיושר על גבי רשת ההלם. (J) תמונה פסאודו-צבעונית המציגה את דפוס הביטוי של MBON γ2α′1. אזור העניין מתואר בקו מקווקו המקיף את הסוכה הדנדריטית. סרגל קנה מידה: 50 מיקרומטר. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68332/68332fig01large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68332/68332fig02.jpg"> 
איור 2: פלסטיות הנגרמת על ידי למידה ב-MBON γ2α′1 לאחר התניה של חוש הריח המרתיע. (A) דפוס ביטוי של מנהל ההתקן MB077C-splitGal4 המבטא GCaMP. המוחות נותחו והוכתמו באנטי-GFP והוכתמו באנטי-NC82. סרגל קנה מידה: 50 מיקרומטר. (B) תמונה פסאודו-צבעונית של MBON γ2α′1 המדגישה את גוף התא, תהליך הרחבה וסוכת דנדריטית. האזור הדנדריטי מייצג את האזור שממנו נאספו תגובות הסידן. סרגל קנה מידה: 50 מיקרומטר. (C) סכמטי של פרוטוקול האימון המרתיע. הזבובים נחשפו לפולסים של 5 שניות של MCH ו-OCT עם 30 שניות של אוויר נקי ביניהם. לאחר מרווח של 5 דקות, זבובים אומנו לשייך OCT ל-12 מכות חשמל של 90 וולט. הקלטות של תגובות סידן ל-MCH ו-OCT בוצעו 5 דקות ו-15 דקות לאחר האימון. (D) עקבות תגובת ריח ל-MCH (פאנל עליון) ו-OCT (פאנל תחתון) מוצגים לפני האימון, וב-5 דקות ו-15 דקות לאחר האימון. פסים שחורים עבים מציינים את עיתוי הצגת הריח. (E) תמונות פסאודו-צבעוניות של הסוכה הדנדריטית של MBON γ2α′1 לפני האימון, ו-5 דקות ו-15 דקות לאחר האימון, בתגובה הן ל-MCH והן ל-OCT. חיזוק הקרינה נצפה עבור CS- (MCH), בעוד שהפלואורסצנציה מבוטלת עבור CS+ (OCT). סרגל קנה מידה: 20 מיקרומטר. (F) תגובת הריח הממוצעת ל-MCH מוגברת באופן משמעותי לאחר 5 דקות ו-15 דקות לאחר האימון, בעוד שהתגובות ל-OCT (CS+) מדוכאות באופן משמעותי. מבחן זוגי Wilcoxon לא פרמטרי, N = 12. (G) עקבות תגובת ריח ל-MCH (פאנל עליון) ו-OCT (פאנל תחתון) מוצגים עבור זבובים מורדמים לפני ו-5 דקות לאחר האימון. פסים שחורים עבים מעידים על העברת ריח. (H) בחיות מורדמות, תגובות הריח הממוצעות ל-MCH אינן מראות חיזוק משמעותי לאחר האימון, והתגובות ל-OCT מציגות דיכוי חלקי בלבד בהשוואה לחיות שלא עברו הרדמה. (I) הפלסטיות הנגרמת על ידי אימון, המחושבת כיחס CS+/CS-, נמוכה משמעותית בזבובים מורדמים בהשוואה לאלה שהוכנו ללא הרדמה. מבחן זוגי Wilcoxon לא פרמטרי, N = 8-12. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68332/68332fig02large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
תיק משלים 1: Grid_holder (STL). STL של הרכיב המעוצב בהתאמה אישית המשמש להחזקת רשת החשמל. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68332/Grid_Holder.stl" target="_blank">אנא לחץ כאן להורדת קובץ זה.</a>
קובץ משלים 2: Grid_holder (OBJ). קובץ OBJ של הרכיב המעוצב בהתאמה אישית המשמש להחזקת רשת החשמל. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68332/Grid_holder.obj" target="_blank">אנא לחץ כאן להורדת קובץ זה.</a>
תיק משלים 3: Chamber_LaserCut. קובץ Adobe Illustrator המשמש לחיתוך לייזר של הרכיב העליון של תאי ההקלטה עבור זבובים זכרים ונקבות כאחד. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68332/Chamber_laserCut.ai" target="_blank">אנא לחץ כאן להורדת קובץ זה.</a>
תיק משלים 4: Recording_chamber (STL). STL של תא ההקלטה המעוצב בהתאמה אישית. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68332/Recording_chamber.stl" target="_blank">אנא לחץ כאן להורדת קובץ זה.</a>
תיק משלים 5: Recording_chamber (OBJ). קובץ OBJ של תא ההקלטה המעוצב בהתאמה אישית. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68332/Recording_chamber.obj" target="_blank">אנא לחץ כאן להורדת קובץ זה.</a>
תיק משלים 6: Recording_chamber_animation. סרטון MP4 המציג אנימציה של תא ההקלטה המורכב. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68332/Recordig_chamber_animation.mp4" target="_blank">אנא לחץ כאן להורדת קובץ זה.</a>

ב Vivo הדמיה של פעילות עצבית בזבובים בוגרים של דרוזופילה לא מורדמת

In vivo imaging is crucial for studying neurobiology in Drosophila as it allows real-time visualization of neuronal activity, development, and plasticity ...

in-vivo-imaging-neural-activity-unanesthetized-drosophila-adult

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

פרוטוקול זה מתאר שיטה אמינה הרדמה והדמיה של...

בתחום ההדמיה vivo של הזחלים תסיסנית אינטקט ברזולוציה משנה הסלולר

סרטון זה מתאר הדמיית סידן in vivo בנוירונים דרוזופילה באמצעות GCaMP. סרטון הפרוטוקול המוצג מראה כיצד לתעד שינויים בפלואורסצנטיות GCaMP מנוירונים בגוף פטריות במהלך ניסוי מיזוג ריח.

דרוזופילה אין ויוו דימות סידן: שיטה לדימות פונקציונלי של פעילות עצבית

סרטון זה מדגים שיטה להדמיית סידן in vivo באמצעות חיישני סידן סינפטיים מקומיים בזבובים. הוא מתאר את השלבים להכנת הזבובים למיקרוסקופיה, ביצוע מיזוג חוש הריח, והדמיית זרימת סידן הנגרמת על ידי ריח.

ב Vivo הדמיית סידן באמצעות חיישני סידן סינפטיים מקומיים בדרוזופילה מלנוגסטר

פרוטוקול זה מפרט שיטה יעילה המשמשת לביצוע הדמיה תא חי בהקשר של מוח זחל בשלמותה. גישות הדמיה תא חי הן לא יסולא בפז לחקר חלוקות תא גזע עצביים סימטריות כמו גם תהליכים עצביים והתפתחותיות אחרים, לחשוף באופן עקבי מנגנונים שהתעלמו בעבר.

הדמיה חיה של<em&gt; דרוזופילה</em&gt; הזחל Neuroblasts

כאן אנו מציגים רומן Ca 2 + גישת -imaging באמצעות כתב bioluminescent. גישה זו משתמשת בGFP-aequorin מבנה התמזגה אשר נקשר Ca 2 + ופולט אור, ומבטל את הצורך בעירור אור. באופן משמעותי בשיטה זו מאפשרת הדמיה ארוכה רציפה, גישה למבני מוח עמוקים ורזולוציה גבוהה זמנית.

בגישת ההדמיה התפקודי של מוח Vivo בהתבסס על סידן Bioluminescent המחוון GFP-aequorin

כאן אנחנו מדגימים כיצד מולקולה בודדת לוקליזציה מופעל צילום מיקרוסקופ יכול להתבצע על הטרמינל עצבים מוטוריים של חיים דרוזופילה melanogaster השלישי instar זחל.

אין ויוו מעקב אחר בתחנת האוטובוסים Presynaptic עצבים מוטוריים דרוזופילה מולקולה בודדת

מאמר זה מתאר פרוטוקול עבור ex-vivo סידן הדמיה של המוח דרוזופילה . בשיטה זו, תרכובות טבעי או סינתטי ניתן להחיל את המאגר כדי לבחון את היכולת שלהם להפעיל את המסוים הנוירונים במוח.

לשעבר Vivo הדמיית סידן להמחשת התגובות המוח איתות האנדוקרינית ב דרוזופילה

כאן אנו מציגים פרוטוקול שבו ניתן לדמיין את הסידן הטרום ו/או הפוסט-סינפטיות בהקשר של למידה וזיכרון של דרוזוהילה . בשנת הדמיה vivo סידן באמצעות synaptically חיישנים סידן מקומי משולב עם הפרדיגמה הקלאסית מיזוג ריח כגון הפלסטיות הסינפטית הבסיסית בבסיס סוג זה של למידה אסוציאטיבית עשוי להיקבע.

ב-Vivo סידן הדמיה אופטית של למידה הנגרמת הפלסטיות הסינפטית בדרוזופילה מלאנוסטר

אנו מציגים שיטה המותאמת במיוחד כדי לדמות את המוח כולו של Drosophila הבוגר במהלך ההתנהגות בתגובה לגירויים. הראש ממוקם כדי לאפשר גישה אופטית לכל המוח, בעוד הזבוב יכול להזיז את רגליו ואת האנטנות, את קצה הפרובוסיס, והעיניים יכולות לקבל גירויים חושיים.

הכנת מלנוגאסטר דרוזופילה למבוגרים להדמיית מוח שלמה במהלך תגובות התנהגות וגירויים

כאן, אנו מציגים פרוטוקול להדמיית סידן ex vivo בדרוזופילה למבוגרים המבטאים GCaMP6 לניטור פעילויות אפילפטיפורמיות. הפרוטוקול מספק כלי רב ערך לחקר אירועים איקטליים בדרוזופילה בוגרת באמצעות הדמיית סידן ex vivo , המאפשר לחקור את המנגנונים הפוטנציאליים של אפילפסיה ברמה התאית.

אקס ויוו הדמיית סידן למודל דרוזופילה לאפילפסיה

אנו מציגים פרוטוקולי הדמיית סידן עבור נוירון ריח של זחל דרוזופילה, באמצעות דבק רקמות מקומי לקיבוע. שיטה זו משפרת את היציבות, ומאפשרת ניסויים אמינים in vivo ו-ex-vivo. סקריפטים מותאמים אישית של R מנתחים אותות סידן, ומספקים פלטפורמה יעילה למחקר נוירופיזיולוגי מפורט.

הדמיית סידן in vivo ו-ex-vivo של נוירון במעגל הריח בזחל Drosophila melanogaster בכוכב השלישי

חקור מנגנוני שכחה עצביים בדרוזופילה בוגרת באמצעות הדמיה חיה ללא הרדמה. שיטה זו מאפשרת לחקור פעילות נוירונים דופמינרגיים וקשרים בין זיכרון לשכחה תוך שמירה על גמישות קוגניטיבית.

ב Vivo הדמיה של פעילות עצבית בזבובים בוגרים של דרוזופילה לא מורדמת

גלה סרטונים נוספים