Name: מבחן העדפת ריח למדידת הטיות הדוניות של חוש הריח במודלים של דיכאון בעכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-11T13:40:00.000+00:00
Duration: 6 min 27 s
Description: למדו פרוטוקול לבחינת העדפת ריח בעכברים לזיהוי הטיות הדוניות בדיכאון. השיטה מאפשרת הערכת פנוטיפים דמויי דיכאון וחקר מנגנונים עצביים קשורים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

כל הליכי הטיפול והניסוי בבעלי חיים פעלו בהתאם להנחיות הלאומיות והאירופיות (2010/63/EU) ואושרו על ידי משרד המחקר הצרפתי (APAFiS: #16380-2018080217358599_v1; APAFIS #51636-2024101718013761_v4). עכברים זכרים ונקבות C57BL/6JRj (דגם UCMS) ועכברים זכרים C57BL/6NTac (מודל CORT) (בני 8 שבועות) שוכנו בחברה (4-5 עכברים לכלוב) והוחזקו בתנאים סטנדרטיים (23 ± 1 מעלות צלזיוס; לחות 40%) במחזור אור/חושך של 14/10 שעות (האורות דולקים ב-7 בבוקר) עם מזון ומים אד ליביטום.
1. מערך הניסוי
<ol>
	<li>התקנת ההיכל<ol>
		<li>הכינו את מערך הניסוי, המורכב מזירה דו-תאית (45 ס"מ × 50 ס"מ × 25 ס"מ) העשויה מקירות פרספקס אפורים ורצפה לבנה. חלקו את שני התאים (25 ס"מ × 45 ס"מ) בקיר פרספקס אפור (37 ס"מ × 25 ס"מ).</li>
		<li>הניחו צלחת פטרי מחוררת (60 מ"מ × 15 מ"מ עם 7 חורים בקוטר 5 מ"מ) בתחתית הקיר מכל תא.</li>
		<li>קיבעו אנכית את צלחות הפטרי על הקיר באמצעות דבק דו צדדי או דבק רגיש ללחץ (למשל, Blu-tack).</li>
		<li>הציבו מצלמה על גבי הזירה כדי לתעד את התנהגות החיות (2 מ' מעל הזירה) ולעקוב באופן אוטומטי אחר תנועותיהם במהלך הניסוי.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>בחירת ריחות<ol>
		<li>לפני הניסוי, בחר רשימה של ריחות בעלי ערכיות ניטרלית, חיובית ושלילית שייבדקו (ראה טבלה 1 לדוגמאות).</li>
		<li>בדוק שלכל הריחות שנבחרו יש לחץ אדים דומה. בנוסף, העריכו את הדיפוזיה ברחבי הזירה עבור ריחות מסוימים באמצעות גלאי פוטוניזציה (PID)26.</li>
		<li>בדוק כל ריח ביום נפרד. הערה: מומלץ לתכנן תחילה את השימוש בריחות ניטרליים, לאחר מכן ריחות מעוררי תיאבון, ולסיים בריחות המרתיעים כדי למזער את השפעות החקירה מיום אחד למשנהו. צו זה ממזער את השפעות ההעברה מיום מבחן אחד למשנהו. לחלופין, ניתן להשתמש במצגת אקראית, אך יש לבדוק את כל קבוצות הניסוי עם אותו רצף ריח.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>תכנון קבוצות ניסוי<ol>
		<li>חלקו עכברים לשתי קבוצות ניסוי לפחות: עכברי ביקורת ועכברים שיעברו את מודל הדיכאון. לשכן את בעלי החיים מאותה קבוצה באותם כלובים. זהירות: כל קבוצת ניסוי צריכה להכיל לפחות כ-7-8 אנשים כדי לקבל מובהקות סטטיסטית. יש למקם כלובים בקרבת מקום בבית החי כדי למזער את אפקט הכלוב.</li>
		<li>לגרום לפנוטיפ דמוי דיכאון בקבוצות עכברים רלוונטיות באמצעות מודל הדיכאון הנבחר. הערה: תיאור פרוטוקולים לגרימת התנהגויות דמויות דיכאון בעכברים הוא מעבר להיקף מאמר זה. עם זאת, מחקר זה מציג ניסויים המשתמשים בשני מודלים שונים (מתח מתון כרוני בלתי צפוי [UCMS] וקורטיקוסטרון [CORT])27,28 כתוצאות מייצגות עבור מבחן העדפת ריח זה. בקצרה, מודל UCMS מסתמך על חשיפה למגוון גורמי לחץ סביבתיים שונים במשך מספר שבועות, בעוד שמודל CORT מורכב ממתן כרוני של קורטיקוסטרון מומס במי השתייה של עכברים (כ-5 מ"ג/ק"ג/יום, תלוי כמה עכברים שותים).</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. שלב ההתרגלות
<ol>
	<li>הרגלה כללית וטיפול<ol>
		<li>עם ההגעה, השאירו את העכברים ללא הפרעה למשך שבוע אחד ללא החלפת מצעים. הוסף חומר כותנה משלים ואיגלו בכלוב כדי להפחית את הלחץ.</li>
		<li>לאחר שבוע אחד, טפלו בעדינות בכל העכברים מדי יום במשך 3-4 ימים, והרגילו אותם לטיפול בכוסות, רצוי בחדר הניסוי.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>תנאי הניסוי של הבדיקה<ol>
		<li>העבירו את העכבר לחדר הבדיקות ההתנהגותיות 30 דקות לפני תחילת הניסוי. הערה: באופן אידיאלי, חדר ההתנהגות צריך לכלול שני חלקים נפרדים המאפשרים לבעלי חיים להיות בחלק אחד בעוד שהעכבר שנבדק מתפקד בחלק השני.</li>
		<li>היזהרו שתנאי הדיור הסטנדרטיים נשמרים (23 ± 1 מעלות צלזיוס; לחות 40%), ואין צליל, תאורה או ריח מטרידים בחדר.</li>
		<li>בעזרת לוקסמטר, הגדר את התאורה לכ-40 לוקס בזירה. ודא שהתאורה הומוגנית בזירה.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>התרגלות לזירה<ol>
		<li>הוסף נייר סינון נקי (42.5 מ"מ) לשתי צלחות הפטרי (60 מ"מ × 15 מ"מ).</li>
		<li>השתמש בסרט שקוף כדי לחבר את מכסה צלחת הפטרי לתחתיתה (מכיוון שהיא תונח אנכית).</li>
		<li>ביום הראשון, הניחו בעדינות את כל העכברים מאותו כלוב דיור יחד לזירה למשך 10 דקות כדי להפחית את הניאופוביה. זהירות: הנח תמיד עכברים לזירה על ידי טיפול בכוס כדי למנוע לחץ עקב איסוף בזנב.</li>
		<li>למחרת, הכניסו כל עכבר בנפרד לזירה, ממש בין שני התאים, והקליטו את ההתנהגות למשך 10 דקות.</li>
		<li>חזור על הפעולה במשך 2-3 ימים ברציפות.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>קריטריון חקירה<ol>
		<li>הגדירו את שני האזורים (25 ס"מ ו-15 ס"מ) שבהם הונחו צלחות הפטרי ומדדו את הזמן שכל חיה מבלה בכל אזור.</li>
		<li>ממוצע מדדים אלה בכל שלבי ההתרגלות האישיים.</li>
		<li>אם הזמן הממוצע המושקע בכל אחד מהאזורים גבוה מ- 50 שניות, הקריטריון מתקיים. אם לא, חזור על מפגשי הרגלה עד שתגיע לקריטריון, או אל תכלול את בעל החיים בניתוח. הערה: ניתן לבצע מקסימום שני מפגשי הרגלה ביום (בוקר ואחר הצהריים).</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. שלב הבדיקה
<ol>
	<li>הכנת הריח<ol>
		<li>ביום הבדיקה הכינו את הריח עם הדילול הנכון מתחת למכסה המנוע הכימי. מדללים את הריח בשמן מינרלי או במים מזוקקים, תלוי במבנה הכימי. כדי למנוע זיהום, אחסן שמן מינרלי בחדר מאוורר נפרד הרחק מריחות. הערה: מומלץ להשתמש בבקבוק חדש של שמן מינרלי בעת התחלת ניסוי חדש.</li>
		<li>אחסן את תמיסת הריח בבקבוקון זכוכית. הימנע ממיכלי צינורות פלסטיק שעלולים להוסיף זיהום ריח.</li>
		<li>ממש לפני שכל עכבר נבדק, אספו 200 מיקרוליטר מתמיסת הריח עם מיקרופיפטה באמצעות קצות מסנן, והניחו אותה על נייר הסינון באחת משתי צלחות הפטרי.</li>
		<li>הניחו לנייר הסינון השני בצלחת הפטרי השנייה להישאר ללא מגע.</li>
		<li>העבירו את צלחות הפטרי לחדר הבדיקות וקבעו אותן אנכית על קיר הזירה. זהירות: אין להכין ולזרוק את תמיסות הריח בחדר הניסוי כדי למנוע זיהום ריח. החלף כפפות באופן קבוע במהלך הניסוי. אם יש חשד שהכפפות עלולות להיות מזוהמות במהלך מניפולציה של ריח, החלף אותן לפני שאתה תופס את העכברים לבדיקה.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>מבחן התנהגותי<ol>
		<li>הנח כל עכבר בנפרד בזירה, ממש בין שני התאים.</li>
		<li>הקלטה למשך 10 דקות.</li>
		<li>הסר את העכבר מהזירה.</li>
		<li>הסר את הריח צלחת פטרי.</li>
		<li>נקו את הזירה בתמיסת חיטוי (למשל, אתנול 70%) וייבשו אותה.</li>
		<li>זרוק את נייר הסינון וחזור על הכנת הריח לעכבר הבא.</li>
		<li>באופן אידיאלי, בדוק רק ריח אחד ביום. עדיף להשתמש תחילה בריחות ניטרליים, לאחר מכן בריחות חיוביים ולבסוף בריחות שליליים (ראה איור 1). זהירות: בצע גם את שלבי ההרגלה וגם את שלבי הבדיקה בערך באותה שעה ביום במהלך ימי הניסוי (באופן אידיאלי בין 9 בבוקר ל-3 אחר הצהריים). אם מספר בעלי החיים דורש פרק זמן ארוך יותר, היו קשובים לבחון קבוצות ניסוי שונות לסירוגין כדי למנוע הטיה בשעות היום. אם יש צורך בזכרים ונקבות להיבדק באותו ניסוי, העדיפו לבדוק מין אחד אחרי השני. הערה: השתמש בכלי פטרי נקיים בכל יום של הבדיקה כדי למנוע זיהום ריח. יש לציין כי ניתן לעשות שימוש חוזר בכלי פטרי מחוררים למספר ניסויים לאחר ניקוי נכון וטיהור ריחות.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
4. ניתוח נתונים
<ol>
	<li>מעקב אחר התנהגות<ol>
		<li>השתמש בתוכנית מעקב אוטומטית כדי לתעד את מיקום העכבר במהלך הבדיקות.</li>
		<li>הגדר אזורים נפרדים בזירה לניתוח (ראה איור 1):<ol>
			<li>הגדירו "אזור ריח" (25 ס"מ ×-15 ס"מ), האזור שבו מניחים את צלחת הפטרי עם נייר הסינון הספוג בריח (כלומר, האזור הקרוב ביותר לריח המייצג כשליש מתא פני השטח).</li>
			<li>הגדירו "אזור בקרה" (25 ס"מ × 15 ס"מ), סימטרי ל"אזור הריח ", אך ללא תוספת ריח בצלחת הפטרי.</li>
			<li>הגדר "אזור מאחורי ריח" (25 ס"מ × 30 ס"מ), כלומר, שאר התא הוא המקום שבו מונחת צלחת פטרי הריח.</li>
			<li>הגדר "אזור שליטה מאחורי" (25 ס"מ × 30 ס"מ), סימטרי ל"אזור השליטה מאחורי ", המורכב משאר התא ללא ריח. הערה: מעקב אחר נקודת המרכז של גוף העכבר מספיק כדי לנתח את העדפת הריח של החיה. עם זאת, מעקב אחר האף של כל עכבר באופן ספציפי יכול להמחיש בצורה מדויקת יותר את חקירת הריח על ידי החיה.</li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
	<li>קריאות של התגובה הנהנתנית<ol>
		<li>באמצעות המעקב האוטומטי, אספו את המידע הבא עבור כל עכבר וכל יום של הבדיקה, כולל שלבי התרגלות:<ol>
			<li>רשום את המרחק הכולל שהועבר בזירה (m).</li>
			<li>רשום את הזמן שהושקע בכל אזור בזירה/ים.</li>
			<li>רשום את מספר הכניסות בכל אזור בזירה.</li>
		</ol>
		</li>
		<li>השתמש במרחק הכולל שנסע כדי להעריך את ההשפעות התנועתיות העיקריות.</li>
		<li>כדי להעריך את ההבדלים בהעדפת הריח כלפי ריחות שונים, השתמש בקריאות העיקריות:<ol>
			<li>השתמש בזמן שבילה באזור הריח.</li>
			<li>השתמש במספר הכניסות באזור הריח.</li>
			<li>השתמש במדד העדפות, המחושב כזמן השהות באזור הריח מנורמל לזמן שהושקע באזור זה במהלך ההתרגלות (נורמליזציה מתבצעת על עכברים מכל הקבוצות). הממוצע מתייחס לממוצע האריתמטי של הזמן שהושקע באזור הריח, ו-sd מתייחס לסטיית התקן שלו. 
			<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/68391/68391eq001v2.jpg" style="margin: auto;"></li>
			<li>השתמש באינדקס חקר ריח, המחושב כממוצע הערכים המנורמלים של מרחק תנועה, זמן שהייה באזור הריח ומספר הכניסות באזור הריח כדלקמן: 
			<img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/68391/68391eq002.jpg" style="margin: auto;"> 
			<img alt="Equation 3" src="/files/ftp_upload/68391/68391eq003v2.jpg" style="margin: auto;"> הערה: ניתן להתאים מדד העדפה זה במידת הצורך, למשלample, על ידי השוואת זמני שהייה באזור הריח לעומת אזור הבקרה. אם הקבוצות מראות הבדלים משמעותיים בחקירת "אזור הריח" במהלך ההתרגלות, ניתן לבצע נורמליזציה ביחס לקבוצת הביקורת בלבד, ולא לכל הקבוצות גם יחד.</li>
		</ol>
		</li>
		<li>ייצג חזותית את הקריאות הללו עבור עכברי ביקורת ועכברים דמויי דיכאון כממוצע ± שגיאת תקן של הממוצע (SEM).</li>
		<li>השתמש במדידות חוזרות וניתוח דו-כיווני של שונות (ANOVA) ואחריו מבחני פוסט הוק (כאן מבחן ההבדל הפחות משמעותי של פישר לא מתוקן) כדי להסביר את שתי קבוצות הניסוי, ריחות (גורם מדידה חוזר) וגורמי אפקט אינטראקציה. גורם האינטראקציה מציין אם ההבדלים בין הקבוצות עקביים בכל הריחות המוצגים.</li>
		<li>לאמת נורמליות והומוסקדסטיות באמצעות מבחנים מותאמים (מבחן שפירו-וילק, מבחן בארטלט). המובהקות הסטטיסטית נקבעה על *p &lt; 0.05, **p &lt; 0.01, ***p &lt; 0.001, ****p &lt; 0.0001.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol><li>American Psychiatric Association. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Diagnostic+and+Statistical+Manual+of+Mental+Disorders%22">Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders</a>. , American Psychiatric Association. Washington, DC. (2013).</li>
<li>Bigot, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+emotional-response+model+of+bipolar+disorders+integrating+recent+findings+on+amygdala+circuits%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Biobehav+Rev%22%5BJournal%5D)">An emotional-response model of bipolar disorders integrating recent findings on amygdala circuits.</a> Neurosci Biobehav Rev. 118, 358-366 (2020).</li>
<li>Leppänen, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emotional+information+processing+in+mood+disorders%3A+a+review+of+behavioral+and+neuroimaging+findings%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Emotional information processing in mood disorders: a review of behavioral and neuroimaging findings.</a> Curr Opin Psychiatry. 19 (1), 34-39 (2006).</li>
<li>Parker, G., Paterson, A., Romano, M., Graham, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Altered+sensory+phenomena+experienced+in+bipolar+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Altered sensory phenomena experienced in bipolar disorder.</a> Am J Psychiatry. 174 (12), 1146-1150 (2017).</li>
<li>Pignatelli, M., Beyeler, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Valence+coding+in+amygdala+circuits%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Behav+Sci%22%5BJournal%5D)">Valence coding in amygdala circuits.</a> Curr Opin Behav Sci. 26, 97-106 (2019).</li>
<li>Zych, A. D., Gogolla, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expressions+of+emotions+across+species%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Expressions of emotions across species.</a> Curr Opin Neurobiol. 68, 57-66 (2021).</li>
<li>Ache, B. W., Young, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Olfaction%3A+diverse+species%2C+conserved+principles%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Olfaction: diverse species, conserved principles.</a> Neuron. 48 (3), 417-430 (2005).</li>
<li>Athanassi, A., Dorado Doncel, R., Bath, K. G., Mandairon, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relationship+between+depression+and+olfactory+sensory+function%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Senses%22%5BJournal%5D)">Relationship between depression and olfactory sensory function: a review.</a> Chem Senses. 46, bjab044(2021).</li>
<li>Jacobs, L. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+PROUST+hypothesis%3A+the+embodiment+of+olfactory+cognition%5BTitle%5D)+AND+%22Anim+Cogn%22%5BJournal%5D)">The PROUST hypothesis: the embodiment of olfactory cognition.</a> Anim Cogn. 26 (1), 59-72 (2023).</li>
<li>Kontaris, I., East, B. S., Wilson, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+and+neurobiological+convergence+of+odor%2C+mood+and+emotion%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Behav+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Behavioral and neurobiological convergence of odor, mood and emotion: a review.</a> Front Behav Neurosci. 14, 35(2020).</li>
<li>Reep, R. L., Finlay, B. L., Darlington, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+limbic+system+in+mammalian+brain+evolution%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Behav+Evol%22%5BJournal%5D)">The limbic system in mammalian brain evolution.</a> Brain Behav Evol. 70 (1), 57-70 (2007).</li>
<li>Soudry, Y., Lemogne, C., Malinvaud, D., Consoli, S. -M., Bonfils, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Olfactory+system+and+emotion%3A+common+substrates%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Ann+Otorhinolaryngol+Head+Neck+Dis%22%5BJournal%5D)">Olfactory system and emotion: common substrates.</a> Eur Ann Otorhinolaryngol Head Neck Dis. 128 (1), 18-23 (2011).</li>
<li>Kohli, P., Soler, Z. M., Nguyen, S. A., Muus, J. S., Schlosser, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+association+between+olfaction+and+depression%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Senses%22%5BJournal%5D)">The association between olfaction and depression: a systematic review.</a> Chem Senses. 41 (6), 479-486 (2016).</li>
<li>Bigot, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disrupted+basolateral+amygdala+circuits+supports+negative+valence+bias+in+depressive+states%5BTitle%5D)+AND+%22Transl+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Disrupted basolateral amygdala circuits supports negative valence bias in depressive states.</a> Transl Psychiatry. 14 (1), 382(2024).</li>
<li>Colle, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+olfactory+deficits+of+depressed+patients+are+restored+after+remission+with+venlafaxine+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Psychol+Med%22%5BJournal%5D)">The olfactory deficits of depressed patients are restored after remission with venlafaxine treatment.</a> Psychol Med. 52 (11), 2062-2070 (2022).</li>
<li>Harmer, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+acute+antidepressant+administration+on+negative+affective+bias+in+depressed+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Effect of acute antidepressant administration on negative affective bias in depressed patients.</a> Am J Psychiatry. 166 (10), 1178-1184 (2009).</li>
<li>Naudin, M., El-Hage, W., Gomes, M., Gaillard, P., Belzung, C., Atanasova, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((State+and+trait+olfactory+markers+of+major+depression%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">State and trait olfactory markers of major depression.</a> PLoS One. 7 (10), e46938(2012).</li>
<li>Croy, I., Hummel, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Olfaction+as+a+marker+for+depression%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurol%22%5BJournal%5D)">Olfaction as a marker for depression.</a> J Neurol. 264 (4), 631-638 (2017).</li>
<li>Root, C. M., Denny, C. A., Hen, R., Axel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+participation+of+cortical+amygdala+in+innate%2C+odour-driven+behaviour%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">The participation of cortical amygdala in innate, odour-driven behaviour.</a> Nature. 515 (7526), 269-273 (2014).</li>
<li>Pérez-Gómez, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Innate+predator+odor+aversion+driven+by+parallel+olfactory+subsystems+that+converge+in+the+ventromedial+hypothalamus%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Innate predator odor aversion driven by parallel olfactory subsystems that converge in the ventromedial hypothalamus.</a> Curr Biol. 25 (10), 1340-1346 (2015).</li>
<li>Saraiva, L. R., Kondoh, K., Ye, X., Yoon, K., Hernandez, M., Buck, L. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combinatorial+effects+of+odorants+on+mouse+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Combinatorial effects of odorants on mouse behavior.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 113 (23), E3300-E3306 (2016).</li>
<li>Kobayakawa, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Innate+versus+learned+odour+processing+in+the+mouse+olfactory+bulb%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Innate versus learned odour processing in the mouse olfactory bulb.</a> Nature. 450 (7169), 503-508 (2007).</li>
<li>Kermen, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topographical+representation+of+odor+hedonics+in+the+olfactory+bulb%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Topographical representation of odor hedonics in the olfactory bulb.</a> Nat Neurosci. 19 (7), 876-878 (2016).</li>
<li>Malkesman, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+female+urine+sniffing+test%3A+a+novel+approach+for+assessing+reward-seeking+behavior+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">The female urine sniffing test: a novel approach for assessing reward-seeking behavior in rodents.</a> Biol Psychiatry. 67 (9), 864-871 (2010).</li>
<li>Endres, T., Fendt, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aversion-+vs+fear-inducing+properties+of+2%2C4%2C5-trimethyl-3-thiazoline%2C+a+component+of+fox+odor%2C+in+comparison+with+those+of+butyric+acid%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Biol%22%5BJournal%5D)">Aversion- vs fear-inducing properties of 2,4,5-trimethyl-3-thiazoline, a component of fox odor, in comparison with those of butyric acid.</a> J Exp Biol. 212 (15), 2324-2327 (2009).</li>
<li>Jennings, L., Williams, E., Caton, S., Avlas, M., Dewan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estimating+the+relationship+between+liquid-+and+vapor-phase+odorant+concentrations+using+a+photoionization+detector+%28PID%29-based+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Senses%22%5BJournal%5D)">Estimating the relationship between liquid- and vapor-phase odorant concentrations using a photoionization detector (PID)-based approach.</a> Chem Senses. 48, bjac038(2023).</li>
<li>David, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurogenesis-dependent+and+-independent+effects+of+fluoxetine+in+an+animal+model+of+anxiety%2Fdepression%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Neurogenesis-dependent and -independent effects of fluoxetine in an animal model of anxiety/depression.</a> Neuron. 62 (4), 479-493 (2009).</li>
<li>Siopi, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gut+microbiota+changes+require+vagus+nerve+integrity+to+promote+depressive-like+behaviors+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Gut microbiota changes require vagus nerve integrity to promote depressive-like behaviors in mice.</a> Mol Psychiatry. 28, 3002-3012 (2023).</li>
<li>Athanassi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+unpredictable+mild+stress+alters+odor+hedonics+and+adult+olfactory+neurogenesis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Chronic unpredictable mild stress alters odor hedonics and adult olfactory neurogenesis in mice.</a> Front Neurosci. 17, 1224941(2023).</li>
<li>Hales, C. A., Stuart, S. A., Anderson, M. H., Robinson, E. S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modelling+cognitive+affective+biases+in+major+depressive+disorder+using+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Modelling cognitive affective biases in major depressive disorder using rodents.</a> Br J Pharmacol. 171 (20), 4524-4538 (2014).</li>
<li>Hinchcliffe, J. K., Stuart, S. A., Mendl, M., Robinson, E. S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Further+validation+of+the+affective+bias+test+for+predicting+antidepressant+and+pro-depressant+risk%3A+effects+of+pharmacological+and+social+manipulations+in+male+and+female+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Further validation of the affective bias test for predicting antidepressant and pro-depressant risk: effects of pharmacological and social manipulations in male and female rats.</a> Psychopharmacology. 234 (20), 3105-3116 (2017).</li>
<li>Shi, P., Yang, A., Zhao, Q., Chen, Z., Ren, X., Dai, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+hypothesis+of+gender+differences+in+self-reporting+symptom+of+depression%3A+implications+to+solve+under-diagnosis+and+under-treatment+of+depression+in+males%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">A hypothesis of gender differences in self-reporting symptom of depression: implications to solve under-diagnosis and under-treatment of depression in males.</a> Front Psychiatry. 12, 589687(2021).</li>
<li>Alcalde, E., Rouquette, A., Wiernik, E., Rigal, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+do+men+and+women+differ+in+their+depressive+symptomatology%3F+A+gendered+network+analysis+of+depressive+symptoms+in+a+French+population-based+cohort%5BTitle%5D)+AND+%22J+Affect+Disord%22%5BJournal%5D)">How do men and women differ in their depressive symptomatology? A gendered network analysis of depressive symptoms in a French population-based cohort.</a> J Affect Disord. 353, 1-10 (2024).</li>
<li>Li, S., Zhang, X., Cai, Y., Zheng, L., Pang, H., Lou, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex+difference+in+incidence+of+major+depressive+disorder%3A+an+analysis+from+the+Global+Burden+of+Disease+Study+2019%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Gen+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Sex difference in incidence of major depressive disorder: an analysis from the Global Burden of Disease Study 2019.</a> Ann Gen Psychiatry. 22 (1), 53(2023).</li>
<li>Eid, R. S., Gobinath, A. R., Galea, L. A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex+differences+in+depression%3A+insights+from+clinical+and+preclinical+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Sex differences in depression: insights from clinical and preclinical studies.</a> Prog Neurobiol. 176, 86-102 (2019).</li>
<li>Commons, K. G., Cholanians, A. B., Babb, J. A., Ehlinger, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+rodent+forced+swim+test+measures+stress-coping+strategy%2C+not+depression-like+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Chem+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The rodent forced swim test measures stress-coping strategy, not depression-like behavior.</a> ACS Chem Neurosci. 8 (5), 955-960 (2017).</li>
<li>Reardon, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Depression+researchers+rethink+popular+mouse+swim+tests%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Depression researchers rethink popular mouse swim tests.</a> Nature. 571 (7766), 456-457 (2019).</li>
<li>Trunnell, E. R., Carvalho, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+forced+swim+test+has+poor+accuracy+for+identifying+novel+antidepressants%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Discov+Today%22%5BJournal%5D)">The forced swim test has poor accuracy for identifying novel antidepressants.</a> Drug Discov Today. 26 (12), 2898-2904 (2021).</li>
<li>Fendt, M., Brosch, M., Wernecke, K. E. A., Willadsen, M., Wöhr, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predator+odour+but+not+TMT+induces+22-kHz+ultrasonic+vocalizations+in+rats+that+lead+to+defensive+behaviours+in+conspecifics+upon+replay%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Predator odour but not TMT induces 22-kHz ultrasonic vocalizations in rats that lead to defensive behaviours in conspecifics upon replay.</a> Sci Rep. 8 (1), 11041(2018).</li>
<li>Horii, Y., Nagai, K., Nakashima, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Order+of+exposure+to+pleasant+and+unpleasant+odors+affects+autonomic+nervous+system+response%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Order of exposure to pleasant and unpleasant odors affects autonomic nervous system response.</a> Behav Brain Res. 243, 109-117 (2013).</li>
<li>Lecorps, B., Rödel, H. G., Féron, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short-term+thermal+responses+after+exposure+to+predator+odor+%28TMT%29+in+the+house+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Mamm+Biol%22%5BJournal%5D)">Short-term thermal responses after exposure to predator odor (TMT) in the house mouse.</a> Mamm Biol. 94, 25-29 (2019).</li>
<li>Lecorps, B., Rödel, H. G., Féron, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+anxiety+in+open+field+and+elevated+plus+maze+using+infrared+thermography%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Assessment of anxiety in open field and elevated plus maze using infrared thermography.</a> Physiol Behav. 157, 209-216 (2016).</li>
<li>Hsueh, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiogenic+control+of+affective+behavioural+state%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Cardiogenic control of affective behavioural state.</a> Nature. 615, 292-299 (2023).</li>
<li>Ouyang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ketamine+ameliorates+depressive-like+behaviors+in+mice+through+increasing+glucose+uptake+regulated+by+the+ERK%2FGLUT3+signaling+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Ketamine ameliorates depressive-like behaviors in mice through increasing glucose uptake regulated by the ERK/GLUT3 signaling pathway.</a> Sci Rep. 11 (1), 18181(2021).</li>
<li>Yamashita, A., Moriya, S., Nishi, R., Kaminosono, J., Yamanaka, A., Kuwaki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aversive+emotion+rapidly+activates+orexin+neurons+and+increases+heart+rate+in+freely+moving+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Brain%22%5BJournal%5D)">Aversive emotion rapidly activates orexin neurons and increases heart rate in freely moving mice.</a> Mol Brain. 14 (1), 104(2021).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>2,4,5-טרימתילתיאזול</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>W332518-100G-K</td><td></td></tr><tr><td>2-טרנס אוקטנל</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>52464-1 מ"ל</td><td></td></tr><tr><td>בלו-טאק</td><td>UHU</td><td>לא ישים</td><td></td></tr><tr><td>נייר סינון</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>11710125</td><td>42.5 מ"מ</td></tr><tr><td>בקבוקון זכוכית</td><td>דוטשר דומיניק</td><td>958983</td><td></td></tr><tr><td>שמן מינרלי</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>M5904-500 מ"ל</td><td></td></tr><tr><td>נולדוס אתוויז'ן</td><td>נולדוס אתוויז'ן</td><td>גירסה 17.5</td><td>לחלופין, ניתן להשתמש ב-Single Mouse Tracker בתוכנת הקוד הפתוח ICY או ב-Deeplabcut</td></tr><tr><td>צלחת פטרי</td><td>בז</td><td>351007</td><td>צלחת פטרי בגודל 60 מ"מ על 15 מ"מ עם 7 חורים בהתאמה אישית בקוטר 5 מ"מ</td></tr><tr><td>זירת פרספקס</td><td>בהתאמה אישית&nbsp;</td><td>לא ישים</td><td>זירת פרספקס בגודל 45 ס"מ על 50 ס"מ על 25 ס"מ מחולקת לשני חדרים על ידי קיר בגודל 37 ס"מ על 25 ס"מ באמצע.</td></tr></tbody></table>

מבחן העדפת ריח למדידת הטיות הדוניות של חוש הריח במודלים של דיכאון בעכברים

An Olfactory Preference Test for Measuring Olfactory Hedonic Biases in Mouse Models of Depression

כדי לוודא שעכברים דמויי דיכאון מציגים הטיית ריח שלילית14,29 וכי ניתן למדוד אותה באופן מהימן באמצעות הפרוטוקול של מבחן העדפת הריח שאנו מתארים כאן, הערכנו את התגובה ההדונית לריחות שונים בשני מודלים עכבריים שונים של דיכאון.
ראשית, השתמשנו במודל עכברי של סטרס כרוני מתון בלתי צפוי (UCMS) שנמשך 4 שבועות מותאםמ-28 (ראו קובץ משלים 1 לפרוטוקול מפורט) כדי לגרום לפנוטיפ דמוי דיכאון בעכברי C57BL/6JRj נקבות צעירות (איור 2A,B). עכברים נקבות אלה נבדקו במבחן העדפת הריח עם שתן של עכברים זכרים (MU, טהור) כריח מעורר תיאבון, ו-2,4,5-טרימתילתיאזול (TMT, 5% בשמן מינרלי) כריח מרתיע. בממוצע, כל עכבר בילה לפחות 50 שניות גם באזור ה"בקרה" וגם באזור ה"ריח" במהלך ההתרגלות, מה שמילא את הקריטריון (איור 2C). עם זאת, באמצעות התרגלות, עכברי UCMS בילו זמן רב יותר באופן משמעותי ב"אזור הבקרה" בהשוואה לבקרות, אך מכיוון שאין הבדל משמעותי לגבי האזור בו יתווסף הריח, ניתן לבטל את ההבדל הזה. בהתייחס למרחק, עכברי ביקורת נעו באופן משמעותי יותר מ-UCMS כאשר נחשפו ל-MU, אך לא במהלך התרגלות או בנוכחות TMT (איור 2D). לבסוף, כל הקריאות של התגובה ההדונית (זמן שהייה באזור הריח, מספר הכניסות באזור הריח ומדד ההעדפה) מראות הבדלים משמעותיים או נטייה סטטיסטית בין נקבות קונטרול ל-UCMS (איור 2E-G). ההשפעה הזו נראית גם דרך מדד חקר הריח העולמי, שהוא מדד משולב של תגובה נהנתנית ותנועתית (איור 2H). באופן עקבי, כל קריאה מדגימה אפוא הטיה נהנתנית שלילית בתגובה לגירוי ריח מעורר תיאבון ומרתיע כאחד. מעניין לציין שציון הרגשיות, המחושב כערך מנורמל של פנוטיפ דמוי חרדה ודיכאון בהתבסס על סוללה גדולה של מבחנים התנהגותיים14, נמצא בקורלציה חיובית עם מדד חקר הריח של MU ו-TMT (איור 2I), המראה קשר בין התגובה ההתנהגותית לריחות חיוביים ושליליים לבין פנוטיפ דמוי חרדה ודיכאון.
שנית, השתמשנו באותו פרוטוקול UCMS כדי לגרום לפנוטיפ דמוי דיכאון בעכברים זכרים הפעם. במהלך מבחן העדפת הריח, עכברים אלה נחשפו לשתן של נקבות עכברים (FU, טהור), שהוא מעורר תיאבון, ול-TMT כמו בעבר, כריח שלילי (איור 3A,B). אין הבדל בזמן שהושקע בארבעת האזורים במהלך ההתרגלות, וגם לא במרחק שעבר דרך המבחן (איור 3C,D). הזמן שהושקע באזור הריח מראה הפחתה משמעותית של חקר FU ו-TMT ב-UCMS בהשוואה לבקרות (איור 3E). בנוסף, עכברי UCMS נכנסים פחות באופן משמעותי לאזור הריח, או נוטים לעשות זאת, ומציגים אינדקס העדפה מופחת משמעותית הן עבור FU והן עבור TMT (איור 3F,G), המאשר הטיית ריח שלילית במצב דמוי דיכאון. באופן דומה, מדד חקר הריח מראה שינוי שלילי בתגובה התנהגותית ל-FU ו-TMT של עכברי UCMS בהשוואה לקבוצת הביקורת (איור 3H), אשר נוטים להיות בקורלציה חיובית עם ציון הרגשיות של החיות (איור 3I).
בניסוי שלישי, פנינו למודל אחר של דיכאון המסתמך על מתן כרוני של קורטיקוסטרון (CORT) במי השתייה של עכברי C57BL/6NTac זכרים, בעוד שעכברי ביקורת מקבלים רק את תמיסת הרכב (Veh) (10% 2-הידרוקסיפרופיל-בטא-ציקלודקסטרין) 27. לאחר ארבעה שבועות של טיפול ב-CORT או ב-VEH, העכברים הורגלו במשך ארבעה ימים, ואז נחשפו לריח ניטרלי (OCT: 2-trans octenal, 1% במים), לריח חיובי (PO: שמן בוטנים) ולריח שלילי (TMT: 2,4,5-trimethylthiazole, 5% בשמן מינרלי) (איור 4A,B). באמצעות התרגלות, לא היו הבדלים בין Veh ל-CORT (איור 4C). עם זאת, שתי הקבוצות בילו זמן רב יותר באופן משמעותי ב"אזור הריח "בהשוואה ל"אזור הבקרה". אין הבדלים עבור המרחק שנע, מלבד הריח החיובי (PO) שעבורו עכברי Veh נעו יותר מ-CORT (איור 4D). חשוב לציין שכמו עבור עכברי UCMS, הזמן שבילו באזור הריח הצטמצם משמעותית עבור עכברי CORT כאשר נחשפו לריח ניטרלי ומעורר תיאבון (איור 4E). חקר ריח מופחת נראה גם באמצעות הפחתה משמעותית או נטייה למספר נמוך יותר של כניסות באזור הריח (איור 4F). במקרה זה, ההבדלים בין הקבוצות מתגלים בהתאם לקריאה שנותחה, כנראה בשל המגבלות הקשורות למספר בעלי החיים בשימוש וכן אפקט רצפה פוטנציאלי שנגרם על ידי זמן החקירה הנמוך שנצפה לאחר תערוכת TMT. בסך הכל, מדד ההעדפה נמוך משמעותית בעכברי CORT עבור כל גירויי הריח בהשוואה ל-Veh (איור 4H). לבסוף, מדד חקר הריח עבור כל הריחות נמצא בקורלציה מובהקת עם ציון הרגשיות של החיות (איור 4I), מה שמדגים פעם נוספת שמבחן העדפת הריח הזה הוא כלי מתאים להערכת הטיה רגשית שלילית בכמה מודלים של דיכאון בעכברים.
לבסוף, אנו יכולים לשלול את האפשרות שההבדלים שנצפו עשויים להיגרם מירידה בפעילות התנועה, ולא מהטיות רגשיות. ואכן, התנועה אינה שונה בין קבוצות במהלך ההתרגלות כאשר מעריכים את המרחק הכולל שנע (איור 2D, איור 3D, איור 4D). בנוסף, בהתבסס על הניתוח הסטטיסטי, ירידה כללית במעורבות במשימה או אפקט חידוש אינם יכולים להסביר גם את ההטיות הללו. למעשה, מצאנו השפעה משמעותית של גורם הריח בניתוח מדד ההעדפה, ללא אינטראקציה משמעותית בין קבוצות ניסוי וריחות. תוצאות אלה מוכיחות כי עכברים דמויי דיכאון אכן מבצעים את המשימה, וכי החקירה המופחתת שלהם היא ספציפית לכל רמז ריח.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68391/68391fig1v2.jpg"> 
איור 1: סכימה כללית של ציר הזמן וההגדרה של מבחן העדפת הריח. עכברים מורגלים תחילה לזירה. ביום הראשון להתרגלות, עכברים מאותו כלוב דיור מונחים יחד כדי להפחית את הניאופוביה. למחרת, הם מוצבים בנפרד בזירה. לאחר ההתרגלות מוסיפים ריח לאחד החדרים. ריחות ניטרליים נבדקים תחילה בעדיפות רבה, ואחריהם ריחות חיוביים ולבסוף ריחות שליליים. לצורך ניתוח, ניתן לחלק את הזירה לארבעה אזורים שונים. נוצר עם Biorender. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68391/68391fig1v2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68391/68391fig2v2.jpg"> 
איור 2: הטיית ריח שלילית במודל דיכאון של עכברת UCMS. (א,ב) ציר הזמן וקבוצות הניסוי של המחקר: עכברי ביקורת ו-UCMS (Unpredictable Chronic Mild Stress) נבדקים במבחן העדפת הריח עם ריח חיובי (MU: שתן עכבר זכר, טהור) וריח שלילי (TMT: 2,4,5-trimethylthiazole, 5% בשמן מינרלי). נוצר עם Biorender. (C) עכברי UCMS בילו בממוצע יותר זמן באופן משמעותי ב"אזור הבקרה" ופחות זמן ב"אזור הריח האחורי" בהשוואה לבקרות במהלך ההתרגלות (קבוצה: F(1, 12) = 74.03, p &lt; 0.0001; אזור: F(2.434, 29.21) = 7.688, p = 0.0012; אינטראקציה: F(3, 36) = 5.148, p = 0.0046). (D) המרחק הכולל שנע פחת באופן משמעותי ב-UCMS כאשר נחשפו ל-MU, אך לא עבור Habituation (Hab) ו-TMT (קבוצה: F(1, 12) = 4.664, p = 0.0518; ריח: F(1.871, 22.45) = 4.846, p = 0.0195; אינטראקציה: F(2, 24) = 4.797, p = 0.0177). (E) עכברי UCMS בילו פחות זמן באופן משמעותי בחקר MU ו-TMT (קבוצה: F(1, 12) = 24.39, p = 0.0003; ריח: F(1, 12) = 59.69, עמ' &lt; 0.0001; אינטראקציה: F(1, 12) = 2.267, p = 0.1580). (F) עכברי UCMS נכנסו פחות מאזור הריח או נטו (קבוצה: F(1, 12) = 9.279, p = 0.0102; ריח: F(1, 12) = 5.100, p = 0.0433; אינטראקציה: F(1, 12) = 1.649, p = 0.2233). (G) מדד ההעדפה ל-MU ו-TMT מופחת באופן משמעותי בעכברי UCMS (קבוצה: F(1, 12) = 24.39, p = 0.0003; ריח: F(1, 12) = 59.69, עמ' &lt; 0.0001; אינטראקציה: F(1, 12) = 2.267, p = 0.1580). (H) מדד חקר הריח עבור MU ו-TMT מופחת באופן משמעותי בעכברי UCMS (F(1, 12) = 14.71, p = 0.0024; ריח: F(1, 12) = 0, p &gt; 0.9999; אינטראקציה: F(1, 12) = 0.02630, p = 0.8739). (I) מדד חקר הריח עבור MU ו-TMT נמצא בקורלציה חיובית עם ציון הרגש של בעלי החיים (MU: Pearson R2 = 0.4837, F(1,12) = 11.24, **p = 0.0058; TMT: פירסון R2 = 0.5340, F(1,12) = 13.75, **p = 0.0030). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68391/68391fig2v2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68391/68391fig3v2.jpg"> 
איור 3: הטיית ריח שלילית במודל דיכאון של עכבר זכר UCMS. (א,ב) ציר הזמן וקבוצות הניסוי של המחקר: עכברי ביקורת ועכברים זכרים UCMS נבדקים במבחן העדפת הריח עם ריח חיובי (FU: שתן של עכברים, טהור) ושלילי (TMT: 2,4,5-trimethylthiazole, 5% בשמן מינרלי). נוצר עם Biorender. (C) אין הבדלים בממוצע בזמן המושקע באזורים השונים של הזירה באמצעות התרגלות (קבוצה: F(1, 13) = 3.921, p = 0.0693; זונר = F(1.688, 21.94) = 34.57, p &lt; 0.0001; אינטראקציה: F(3, 39) = 0.7385, p = 0.5355). (D) אין הבדלים במרחק הכולל שנע בין בקרות ל-UCMS (קבוצה: F(1, 13) = 2.313, p = 0.1522; ריח: F(1.722, 22.38) = 1.746, p = 0.1998; אינטראקציה: F(2, 26) = 0.8806, p = 0.4266). (E) הזמן המושקע בחקר אזור הריח עם FU ו-TMT מצטמצם משמעותית בעכברי UCMS (קבוצה: F(1, 13) = 6.808, p = 0.0216; ריח: F(1, 13) = 16.21, p = 0.0014; אינטראקציה: F(1, 13) = 0.3304, p = 0.5753). (F) עכברי UCMS נכנסו לאזור הריח פחות פעמים באופן משמעותי עבור TMT, ונטו ל-FU (קבוצה: F(1, 13) = 6.572, p = 0.0236; ריח: F(1, 13) = 3.784, p = 0.0737; אינטראקציה: F(1, 13) = 0.2145, p = 0.6509). (G) מדד ההעדפה של עכברי UCMS מופחת באופן משמעותי עבור FU ו-TMT (קבוצה: F(1,13) = 6.808, p = 0.0216; ריח: F(1, 13) = 16.21, p = 0.0014; אינטראקציה: F(1, 13) = 0.3304, p = 0.5753); (H) מדד חקר הריח של UCMS מופחת באופן משמעותי עבור שני הריחות (קבוצה: F(1, 13) = 12.42, p = 0.0037; ריח: F(1, 13) = 0.002580, p = 0.9603; אינטראקציה: F(1, 13) = 0.5804, p = 0.4598). (I) מדד חקר הריח עבור FU ו-TMT נוטה להיות בקורלציה חיובית עם ציון הרגשיות של בעלי החיים (FU: Pearson R2 = 0.2573, F(1, 13) = 4.504, p = 0.0536; TMT: פירסון R2 = 0.2266, F(1, 13) = 3.809, p = 0.0729). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68391/68391fig3v2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68391/68391fig4v2.jpg"> 
איור 4: הטיית ריח שלילית במודל דיכאון של עכבר זכר CORT. (A,B) ציר הזמן וקבוצות הניסוי של המחקר: עכברים זכרים Veh ו-CORT נבדקים במבחן העדפת הריח עם ריח ניטרלי (OCT: טרנס-2-אוקטנל, 1% במים), חיובי (PO: שמן בוטנים, טהור) ושלילי (TMT: 2,4,5-טרימתילתיאזול, 5% בשמן מינרלי). עכברי Veh ו-CORT ניתנים עם תמיסת Vehicle ו-Vehicle + Corticosterone, בהתאמה, במשך כל תקופת הניסוי. נוצר עם Biorender. (C) זמן ממוצע שהושקע באזורים השונים של הזירה במהלך ההתרגלות (קבוצה: F(1, 10) = 0.07588, p = 0.7886; אזור: F(2.224, 22.24) = 6.939, p = 0.0036; אינטראקציה: F(3, 30) = 0.7033, p = 0.5575). (D) המרחק הכולל שנע במהלך מבחן ההתרגלות (Hab) והריחות השונים (קבוצה: F(1, 10) = 4.193, p = 0.0678; ריח: F(3, 30) = 11.80, p &lt; 0.0001; אינטראקציה: F(3, 30) = 1.489, p = 0.2375). (E) עכברי CORT מבלים פחות זמן באזור הריח מאשר Veh עבור OCT ו-PO (קבוצה: F(1, 10) = 5.094, p = 0.0476; ריח: F(2, 20) = 28.87, p &lt; 0.0001; אינטראקציה: F(2, 20) = 3.841, p = 0.0388). (F) עכברי CORT נכנסים פחות פעמים מאזור הריח או נטו בהשוואה ל-Veh (קבוצה: F(1, 10) = 6.832, p = 0.0259; ריח: F(2, 20) = 2.738, p = 0.0889; אינטראקציה: F(2, 20) = 0.2902, p = 0.7512). (G) חלקי CORT מציגים מדד העדפה נמוך יותר עבור OCT ו-PO (קבוצה: F(1, 10) = 5.895, p = 0.0356; ריח: F(2, 20) = 20.83, p &lt; 0.0001; אינטראקציה: F(2, 20) = 1.437, p = 0.2611). (H) מדד חקר הריח מופחת באופן משמעותי בעכברי UCMS עבור כל הריחות (קבוצה: F(1, 10) = 12.35, p = 0.0056; ריח: F(2, 20) = 0.04381, p = 0.9572; אינטראקציה: F(2, 20) = 0.3622, p = 0.7006). (I) מדד חקר הריח עבור כל ריח נמצא בקורלציה חיובית עם ציון הרגשיות של בעלי החיים (OCT: Pearson R2 = 0.5601, F(1, 10) = 12.73, **p = 0.0051; PO: פירסון R2 = 0.4495, F(1, 10) = 8.165, *p = 0.0170; TMT: פירסון R2 = 0.5061, F(1, 10) = 10.25, **p = 0.0095). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68391/68391fig4v2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>שם</td>
			<td>קיצור</td>
			<td>דילול</td>
			<td>ערכיות</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2,4,5-טרימתילתיאזול</td>
			<td>TMT</td>
			<td>5% בשמן מינרלי</td>
			<td>שלילי</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-טרנס-אוקטנלי</td>
			<td>אוקטובר</td>
			<td>1% במים</td>
			<td>נייטרלי</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>שתן של עכבר נקבה</td>
			<td>פו</td>
			<td>טהור</td>
			<td>חיובי</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>שתן עכבר זכר</td>
			<td>MU</td>
			<td>טהור</td>
			<td>חיובי</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>שמן בוטנים</td>
			<td>פו</td>
			<td>טהור</td>
			<td>חיובי</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
טבלה 1: דוגמאות לריחות עם ערכיות ניטרלית, חיובית ושלילית.
קובץ משלים 1: פרוטוקול למתח כרוני קל בלתי צפוי במשך 4 שבועות. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68391/Supplementary%20File%201.docx" target="_blank">אנא לחץ כאן להורדת קובץ זה.</a>

Depression is the single largest contributor to disability worldwide, affecting 280 million people annually. Beyond reduced activity and motivation, ...

an-olfactory-preference-test-for-measuring-olfactory-hedonic-biases

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

יסוד, המאפיינים הייחודיים של המערכת עדיין מכרסם הריח הובילו מחקר הגוברת בקרב ביולוגים. הערכה פשוטה יחסית של תפקידה הוא צריך גם אז. כאן אנו מתארים בדיקות רגישות לאפיון של רגישות העכבר העדפה הריח ו.

בדיקה התנהגותית חוש הריח של העכבר למבוגרים

ליקוי בתפקוד הריח הוא מאפיין שכיח בהפרעות ניווניות רבות כולל מחלות פרקינסון, אלצהיימר והנטינגטון. במאמר הנוכחי אנו מתארים קבוצה של מבחנים להערכת הבחנה וזיהוי חוש הריח בעכברים שניתן להשתמש בהם כדי למדוד יכולות ריח במודלים של עכברים של מחלות ניווניות.

מבחני חוש הריח למודלי עכבר של ניווניות מחלות

כתב יד זה מתאר פרוטוקול לבחינת מערכת הריח של מכרסמים. מבחן ההתרגלות/אי-השבתה של חוש הריח יאפשר לחוקרים לקבוע אם עכבר מתרגל לריח המוצג שוב ושוב והאם העכבר מפגין חוסר התרגלות כאשר מוצג לו ריח חדש.

בדיקה לריח אפליה והרגלה בעכברים

אנו מציגים מבחן ריח פשוט ובלתי מוטה בעכברים. עם פרוטוקול זה ניתן להעריך אפליה, העדפה, הימנעות ורגישות לריח חדש בהשוואה למים במפגשים התנהגותיים בודדים. שיטה זו מיועדת לנסיין יחיד והניתוח מבוסס על עיבוד וידאו בעזרת מחשב.

פשוט וחוש ריח בדיקה לעכברים בסיוע מחשב

מאמר זה מציג פרוטוקול עבור החקירה של שידור החברתית של העדפת מזון בעכברים. היתרונות ואת היישומים האפשריים עבור הליך זה, למשל, באיתור מוקדם שינויים במודלים של העכבר לספירה, מודגשים. לסיכום, נידונות פרשנות של התוצאות לאור פרטים קריטיים.

הערכה של שידור החברתית של התנהגויות העדפות מזון

כאן, אנחנו מאמנים עכברים בפעילות associative learning כדי לבדוק את ריח אפליה. פרוטוקול זה מאפשר גם במחקרים על למידה-induced שינויים מבניים במוח.

מבחן אובייקטיבי, לשחזור של למידה חוש הריח ואפליה בעכברים

מודל עכבר הייאוש הכרוני (CDM) של דיכאון מורכב ממפגשי שחייה כפויים חוזרים ונשנים ועוד שלב שחייה מושהה כקריאה. הוא מייצג מודל מתאים לגיוס מצב דמוי דיכאון כרוני יציב במשך 4 שבועות לפחות, ניתן לתיקון להערכת התערבויות טיפול תת-קרקעיות ואקוטיות.

מודלים בעלי חיים של דיכאון - מודל ייאוש כרוני (CDM)

מאמר זה מספק תיאור מפורט של פרוטוקול הטיית שיפוט עכברים חדשני. כמו כן, מוכחות עדויות לרגישותה של משימת חפירת חוש הריח למצב רגשי, ותועלתה נדונה בתחומי מחקר מגוונים.

הערכה של הטיית שיפוט עכברים באמצעות משימת חפירת חוש הריח

מערכות חוש הריח חרקים לספק הזדמנויות ייחודיות עבור odorant-Induced התגובות הקלטה בצורות של electroantennograms (EAG) והקלטות sensillum יחיד (SSR), אשר סיכם תגובות מכל קולטן נוירונים odorant (ORNs) הממוקם על האנטנה ועל מאלה שוכנו הפרט sensilla, בהתאמה.

מדידות אלקטרו ממערכת עש חוש הריח

Photolysis של תרכובות בכלוב מאפשר ייצור של עליות מהירה מקומי בריכוז של חומרים פעילים מבחינה פיזיולוגית שונים. כאן, אנו מראים כיצד ניתן להשיג תיקון-clamp הקלטות בשילוב עם photolysis המחנה בכלוב או בכלוב Ca לחקר התמרה חוש הריח של העכבר ניתק עצב ההרחה חושית.

פלאש Photolysis של תרכובות כלואה צילה של עצב סנסורי חוש הריח

למדו פרוטוקול לבחינת העדפת ריח בעכברים לזיהוי הטיות הדוניות בדיכאון. השיטה מאפשרת הערכת פנוטיפים דמויי דיכאון וחקר מנגנונים עצביים קשורים.

מבחן העדפת ריח למדידת הטיות הדוניות של חוש הריח במודלים של דיכאון בעכברים

גלה סרטונים נוספים