Ookluc: קו פלסמודיום ברגהיי לזיהוי תרכובות חוסמות שידור

המחקר שלנו נועד לזהות ולאפיין תרכובות חוסמות העברה וגנים חיוניים בשלבי המין של פלסמודיום באמצעות מערכת תפוקה גבוהה כדי לתמוך באסטרטגיות חדשות להפסקת העברת מלריה. פרוטוקול זה מטפל בהיעדר שיטות סטנדרטיות בעלות תפוקה גבוהה לזיהוי תרכובות חוסמות שידור על ידי שימוש בקו P.berghei טרנסגני עם זיהוי אוטומטי של שלב זוהר של התפתחות טפיל לאחר הפריה. פרוטוקול זה מאפשר סינון של השלבים המיניים של פלסמודיום, מזהה תרכובות חוסמות העברה מוקדמות ותומך בקביעת IC50 מדויקת, ומציע יתרונות על פני שיטות קונבנציונליות.

כדי להתחיל, הכינו את דגימות התרכובת על ידי דילול מלאי התרכובת למילימולרית אחת באמצעות מדיום אוקינט. הכן את דגימות העבודה על ידי דילול מלאי מילי-מולרי זה במדיום אוקינט ביחס של 1 ל-100 כדי להשיג ריכוז סופי של 10 מיקרומולר. לבדיקה אחת, הכינו נפח סופי של 200 מיקרוליטר של דגימת עבודה בשכפול.