Name: טכניקת הזרקה תת-רשתית טרנססקלרלית זעיר פולשנית אופטימלית בעכבר (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-25T13:10:00.000+00:00
Duration: 6 min 46 s
Description: למד טכניקת הזרקה תת-רשתית טרנססקלרלית זעיר פולשנית אופטימלית בעכבר. שיטה זו משפרת שיעורי הצלחה ניתוחיים ומפחיתה נזק רטינלי במחקר טרום-קליני של מחלות רטינה תורשתיות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

<ol><li>Trapani, I., Banfi, S., Simonelli, F., Surace, E. M., Auricchio, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+therapy+of+inherited+retinal+degenerations%3A+prospects+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Gene therapy of inherited retinal degenerations: prospects and challenges.</a> Hum Gene Ther. 26, 193-200 (2015).</li>
<li>Peng, Y., Tang, L., Zhou, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subretinal+Injection%3A+A+Review+on+the+Novel+Route+of+Therapeutic+Delivery+for+Vitreoretinal+Diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmic+Res%22%5BJournal%5D)">Subretinal Injection: A Review on the Novel Route of Therapeutic Delivery for Vitreoretinal Diseases.</a> Ophthalmic Res. 58, 217-226 (2017).</li>
<li>Simunovic, M. P., Xue, K., Jolly, J. K., MacLaren, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+and+Functional+Recovery+Following+Limited+Iatrogenic+Macular+Detachment+for+Retinal+Gene+Therapy%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Structural and Functional Recovery Following Limited Iatrogenic Macular Detachment for Retinal Gene Therapy.</a> JAMA Ophthalmol. 135, 234-241 (2017).</li>
<li>Parikh, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+Alternative+and+Validated+Injection+Method+for+Accessing+the+Subretinal+Space+via+a+Transcleral+Posterior+Approach%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">An Alternative and Validated Injection Method for Accessing the Subretinal Space via a Transcleral Posterior Approach.</a> J Vis Exp. (118), e54808(2016).</li>
<li>Testa, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-year+follow-up+after+unilateral+subretinal+delivery+of+adeno-associated+virus+in+patients+with+Leber+congenital+Amaurosis+type+2%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Three-year follow-up after unilateral subretinal delivery of adeno-associated virus in patients with Leber congenital Amaurosis type 2.</a> Ophthalmology. 120, 1283-1291 (2013).</li>
<li>Ghazi, N. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+of+retinitis+pigmentosa+due+to+MERTK+mutations+by+ocular+subretinal+injection+of+adeno-associated+virus+gene+vector%3A+results+of+a+phase+I+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Genet%22%5BJournal%5D)">Treatment of retinitis pigmentosa due to MERTK mutations by ocular subretinal injection of adeno-associated virus gene vector: results of a phase I trial.</a> Hum Genet. 135, 327-343 (2016).</li>
<li>Bennett, J., Anand, V., Acland, G. M., Maguire, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cross-species+comparison+of+in+vivo+reporter+gene+expression+after+recombinant+adeno-associated+virus-mediated+retinal+transduction%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Enzymol%22%5BJournal%5D)">Cross-species comparison of in vivo reporter gene expression after recombinant adeno-associated virus-mediated retinal transduction.</a> Methods Enzymol. 316, 777-789 (2000).</li>
<li>Muhlfriedel, R., Michalakis, S., Garcia Garrido, M., Biel, M., Seeliger, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimized+technique+for+subretinal+injections+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Optimized technique for subretinal injections in mice.</a> Methods Mol Biol. 935, 343-349 (2013).</li>
<li>Hejri, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+non-surgical+method+for+subretinal+delivery+by+trans-scleral+microneedle+injection%5BTitle%5D)+AND+%22Bioeng+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">A non-surgical method for subretinal delivery by trans-scleral microneedle injection.</a> Bioeng Transl Med. 10 (3), e10755(2025).</li>
<li>Sastry, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microscope-Integrated+OCT-Guided+Volumetric+Measurements+of+Subretinal+Blebs+Created+by+a+Suprachoroidal+Approach%5BTitle%5D)+AND+%22Transl+Vis+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Microscope-Integrated OCT-Guided Volumetric Measurements of Subretinal Blebs Created by a Suprachoroidal Approach.</a> Transl Vis Sci Technol. 10, 24(2021).</li>
<li>Blanc, V. F., Jacob, J. L., Milot, J., Cyrenne, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+oculorespiratory+reflex+revisited%5BTitle%5D)+AND+%22Can+J+Anaesth%22%5BJournal%5D)">The oculorespiratory reflex revisited.</a> Can J Anaesth. 35, 468-472 (1988).</li>
<li>Dewar, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+oculocardiac+reflex%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+R+Soc+Med%22%5BJournal%5D)">The oculocardiac reflex.</a> Proc R Soc Med. 69, 373-374 (1976).</li>
<li>Katzung, B. G. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKatzung%2C+BG+%22Basic+%26amp%3B+clinical+pharmacology%22">Basic &amp; clinical pharmacology</a>. , 9th ed, Lange Medical Books/McGraw Hill. New York, USA. (2004).</li>
<li>Mai, X., Huang, S., Chen, W., Ng, T. K., Chen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+Optical+Coherence+Tomography+to+a+Mouse+Model+of+Retinopathy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Application of Optical Coherence Tomography to a Mouse Model of Retinopathy.</a> J Vis Exp. (179), e63421(2022).</li>
<li>L'Abbate, D., Prescott, K., Geraghty, B., Kearns, V. R., Steel, D. H. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biomechanical+considerations+for+optimising+subretinal+injections%5BTitle%5D)+AND+%22Surv+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Biomechanical considerations for optimising subretinal injections.</a> Surv Ophthalmol. 69, 722-732 (2024).</li>
<li>Huang, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subretinal+injection+in+mice+to+study+retinal+physiology+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Subretinal injection in mice to study retinal physiology and disease.</a> Nat Protoc. 17, 1468-1485 (2022).</li>
<li>Stockslager, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+method+for+automated+measurement+of+glass+micropipette+tip+geometry%5BTitle%5D)+AND+%22Precis+Eng%22%5BJournal%5D)">Optical method for automated measurement of glass micropipette tip geometry.</a> Precis Eng. 46, 88-95 (2016).</li>
<li>Li, Q., Rycaj, K., Chen, X., Tang, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+stem+cells+and+cell+size%3A+A+causal+link%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Cancer+Biol%22%5BJournal%5D)">Cancer stem cells and cell size: A causal link.</a> Semin Cancer Biol. 35, 191-199 (2015).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>הזרקת נתרן כלורי 0.9%, USP</td><td>הוספירה</td><td>PAA130066</td><td></td></tr><tr><td>1% תמיסת עיניים אטרופין סולפט, USP</td><td>אקורן</td><td>NDC 17478-215-05</td><td></td></tr><tr><td>30&deg; סכין יהלום</td><td>צרפת</td><td>K2-6560</td><td></td></tr><tr><td>AmScope 6W LED תאורת צוואר אווז כפולה</td><td>AmScope</td><td>לד-11CR</td><td></td></tr><tr><td>מספריים זוויתיים של ואנאס</td><td>רובוז</td><td>RS-5618</td><td></td></tr><tr><td>תמיסת השקיה סטרילית BSS</td><td>אלקון</td><td>289010-0902</td><td></td></tr><tr><td>טיפות עיניים מרחיבות ציקלומידריל</td><td>אלקון</td><td>0065-0359-02</td><td>0.2% ציקלופנטולאט, 1% פנילפרין</td></tr><tr><td>epT.I.P.S. MicroloaderTM קצות פיפטה</td><td>אפנדורף</td><td>5242 956.003</td><td></td></tr><tr><td>מיקרו-מזרק FemtoJet 4i</td><td>אפנדורף</td><td>E5252000021</td><td>מוצר שהופסק</td></tr><tr><td>משחת עיניים לסיכה GenTeal Tears</td><td>אלקון</td><td>16027802</td><td></td></tr><tr><td>מחטי מיקרו-הזרקה מזכוכית</td><td>קלונברי סיינטיפיק</td><td>B100-58-50</td><td>30&deg; שיפוע. קוטר: 50 ומיקרו; M חיצוני, 29 ומיקרו; M פנימי</td></tr><tr><td>תמיסת איזופלורן</td><td>קובטרוס</td><td>29405</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופ הדמיית רשתית MICRON IV עם OCT מונחה תמונה</td><td>פניקס</td><td>לא ישים</td><td></td></tr><tr><td>סטריאומיקרוסקופ SteREO Discovery.V8</td><td>צייס</td><td>495015-0001-000</td><td></td></tr><tr><td>שטרן-קסטרובייחו מלקחיים עם שיניים נעילה</td><td>צרפת</td><td>K5-2552</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים עם שיניים</td><td>רובוז</td><td>RS-5172</td><td></td></tr><tr><td>חוטי ניקוי טונגסטן למחטים מד 23 שניות</td><td>המילטון</td><td>18306</td><td></td></tr><tr><td>Ultracell PVA Eye Spears</td><td>BVI רפואי</td><td>40400-8</td><td></td></tr><tr><td>מזרקי אינסולין Ultra-Fine2015&nbsp;</td><td>ב.ד.</td><td>328438</td><td>3/10 מ"ל, 8 מ"מ (5/16 אינץ'), 31 גרם</td></tr></tbody></table>

טכניקת הזרקה תת-רשתית טרנססקלרלית זעיר פולשנית אופטימלית בעכבר

Optimized Minimally Invasive Transscleral Subretinal Injection Technique in Mouse

הזרקה מוצלחת בטכניקה טרנססקלרלית זו יוצרת בלב תת-רשתית שניתן להבחין בו ב-OCT מיד לאחר הליך ההזרקה (איור 2A). בהתחשב באתגר הטכני של טכניקה זו, שלב ההדמיה הוא הכרחי לזיהוי בעלי חיים שהוזרקו בהצלחה. לחוקרים שמתכננים להשתמש בטכניקה זו לניסויים בריפוי גנטי, אנו ממליצים לבצע זריקות תרגול עם חלקיקי נגיף הקשורים לאדנו-(AAV) הנושאים גן מדווח פלואורסצנטי. חלקיקי AAV המועברים באמצעות טכניקה זו משיגים שטח התמרה גדול מאוד של RPE (איור 2B), קולטני אור (אי...

The conventional method of material delivery to the subretinal space in the mouse involves dual perforation of the neural retina, which causes extensive ...

optimized-minimally-invasive-transscleral-subretinal-injection

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

טכניקה ניתוחית זו ממחישה את הזריקה של וקטורים בריפוי גנטי ותאי גזע לתוך חלל subretinal של עין העכבר.

הזרקת subretinal של וקטורי ריפוי גנטי ותאי גזע לעיניים המאוסות

מקור: Park, S. W., et al. גישה לימבלית - הזרקה תת-רשתית של וקטורים נגיפיים לטיפול גנטי באפיתל פיגמנט רשתית של עכברים. J. Vis. Exp. (2015)הסרטון מתאר את השיטה להזרקה תת-רשתית של וקטורים נגיפיים לאפיתל פיגמנט הרשתית (RPE) במודל עכבר. הוא מפרט את ההליך מהרדמה והכנת עיניים ועד לאספקה מדויקת של וקטור לנטי-ויראלי, מה שמבטיח אינטגרציה וביטוי גנים ב-RPE.

הזרקה תת-רשתית של וקטורים נגיפיים לאפיתל פיגמנט הרשתית במודל עכבר

מקור: Parikh, S., et al. שיטת הזרקה חלופית ומאומתת לגישה לחלל התת-רשתית באמצעות גישה אחורית טרנסקלרלית. J. Vis. Exp. (2016)סרטון זה מדגים את ההליך להעברת צבע פלואורסצנטי לחלל התת-רשתית של עכבר. התהליך כולל הרדמת העכבר, הכנת העין, ביצוע חתכים מדויקים לגישה לחלל התת-רשתית והזרקת הצבע ליצירת היפרדות רשתית מבוקרת. טכניקה זו מאפשרת אספקה ממוקדת של הצבע, ומאפשרת הדמיה מפורטת וניתוח של מבני הרשתית.

אספקת צבע פלואורסצנטי לחלל התת-רשתית של עכבר

כאן אנו מציגים פרוטוקול מקובל על הקהילה בפורמט מולטימדיה להזרקה תת-רשתית של תאי RPE בחולדות ועכברים. גישה זו יכולה לשמש לקביעת פוטנציאל הצלה, פרופילי בטיחות ויכולות הישרדות של תאי RPE מושתלים עם השתלה במודלים של ניוון רשתית בבעלי חיים.

ביצוע subretinal זריקות במכרסמים כדי לספק תאי הרשתית פיגמנט האפיתל בהשעיה

הזרקה ישירה לעצב הראייה של החולדה שימושית למחקר רגנרטיבי. אנו מדגימים טכניקה זעיר פולשנית להזרקה ישירה לעצב הראייה של חולדה שאינה כרוכה בפתיחת הגולגולת. בשיטה זו, סיבוכים כירורגיים ממוזערים וההחלמה מהירה יותר.

טכניקה זעיר-פולשני להזרקה לתוך עצב העכברוש אופטי

הזרקה תת-רשתית היא טכניקה כירורגית להעברת גנים יעילה לאפיתל פיגמנט הרשתית בעין העכבר.  כאן אנו מתארים שיטה קלה וניתנת לשכפול להזרקה תת-רשתית של וקטורים נגיפיים לאפיתל פיגמנט רשתית בעכברי ניסוי.

הזרקת גישת subretinal Limbal של ויראלי וקטורים לטיפול גנטי בעכברים הרשתית פיגמנט האפיתל

זריקות תת-רשתית הן הטכניקה הנפוצה ביותר להעברת חומרים טיפוליים גדולים כגון חלבונים ווקטורים נגיפיים לקולטני האור ולאפיתל הפיגמנט ברשתית. שיטה חלופית בעכברים המכוונת בהצלחה לחלל התת-רשתית עם נזק אגבי מינימלי וזמני התאוששות מהירים מתוארת כאן.

שיטת הזרקה אלטרנטיבית והמאומתת עבור גישת שטח subretinal<i&gt; דרך</i&gt; בגישה אחורית Transcleral

הזרקת subretinal הוחל נרחב במחקרים פרה של טיפול בתאי גזע חלופי עבור ניוון מקולרי הקשור לגיל. במאמר זה דמיינו, נתאר טכניקה הזרקת subretinal פחות מסוכן, הדירים בדיוק ששונתה באמצעות הגישה הטרנס-scleral להעביר תאים לתוך עיניו חולדה.

פיתוחו של פרוטוקול מעודן עבור השתלת Subretinal טרנס-scleral של תאי אפיתל הפיגמנט ברשתית האנושי בעיניים עכברוש

כאן אנחנו מדגימים גישה מוזרה לשימוש טומוגרפיה אופטית קוהרנטית בתחום ספקטרלי ברזולוציה גבוהה (HR-SD-אוקטובר) כדי לסייע משלוח של סוכנים טיפול גנטי לחלל subretinal להעריך את פעולתה אמיתיות, לאפיין את קולט אור חיוניות.

טומוגרפיה אופטית קוהרנטית העכבר הרזולוציה על קוליים כדי לסייע הזרקה תוך-עיני במחקר ריפוי גנטי ברשתית

פרוטוקול זה מציג גישה טרנס-סקלרלית מונחית ראייה טרנס-אישונים להעברה בטוחה ומדויקת של שתלים תאיים תת-רשתית, עם שיעור נמוך של סיבוכים כירורגיים, במושתלי עכבר עם או בלי ניוון רשתית.

השתלה טרנס-סקלרלית מונחית אישונים של שתלים תת-רשתית במודל עכבר ניוון רשתית

מאמר זה מתאר שיטות להזרקה תת-רשתית בחולדות, תוך שימוש בהדמיה תוך ניתוחית כדי לשלוט הן באתר ההזרקה והן באזור היפרדות הרשתית.

הדמיה תוך ניתוחית של הזרקה תת-רשתית והיפרדות רשתית בחולדות

למד טכניקת הזרקה תת-רשתית טרנססקלרלית זעיר פולשנית אופטימלית בעכבר. שיטה זו משפרת שיעורי הצלחה ניתוחיים ומפחיתה נזק רטינלי במחקר טרום-קליני של מחלות רטינה תורשתיות.

טכניקת הזרקה תת-רשתית טרנססקלרלית זעיר פולשנית אופטימלית בעכבר

גלה סרטונים נוספים