Name: הכנת התפשטות כרומוזומים מיוטיים מביציות עכבר להערכת סינפסה ורקומבינציה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-18T15:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 24 s
Description: למדו את שיטת הכנת התפשטות כרומוזומים מיוטיים מביציות עכבר להערכת סינפסה ורקומבינציה. שיטה זו מאפשרת חקר מפורט של תהליכי חלוקת התא בביולוגיה התפתחותית.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>0.45 & mu; מסנן מזרק m</td><td>מיליפור סיגמא</td><td>SLHAR33SB</td><td>לייצור פיפטה שמופעלת בפה</td></tr><tr><td>0.5 M EDTA, pH 8.0</td><td>קורנינג</td><td>46-034-CI&nbsp;</td><td>עבור HEB</td></tr><tr><td>מזרק סטרילי 1 מ"ל עם מחט 25 גייג', 16 מ"מ</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>14-817-125&nbsp;</td><td>לקרעת שחלות</td></tr><tr><td>צלחת פטרי בגודל 100 על 15 מ"מ</td><td>VWR</td><td>25384-302&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>פיפטות פסטר חד-פעמיות מזכוכית בורוסיליקט 14.6 ס"מ</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>13-678-20B&nbsp;</td><td>לייצור פיפטה שמופעלת בפה</td></tr><tr><td>צלחת פטרי 35 על 10 מ"מ</td><td>קורנינג</td><td>351008</td><td></td></tr><tr><td>40 מ"מ x 0.45 מ"מ #3 פיני נירוסטה לאנטומולוגיה</td><td>אמזון</td><td>B0CSSPW5S7</td><td>להצמדת עכברים עובריים לניתוח</td></tr><tr><td>חומצה אצטית, קרחונית</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>A38-212</td><td>עבור הקיבוע של קרנוי</td></tr><tr><td>מכלולי צינורות שאפירטור לפיפטות מיקרוקפילריות מכוילים</td><td>מיליפור סיגמא</td><td>A5177-5EA</td><td>לייצור פיפטה שמופעלת בפה</td></tr><tr><td>B.P.I. Watch Glass</td><td>NDS Technologies&nbsp;</td><td>1580-00</td><td>חלופה נוספת להשתמש בצלחת עובר בקוטר 30 מ"מ על עומק 12 מ"מ (Electron Microscopy Sciences SKU: 70543-30)</td></tr><tr><td>חומצה בורית</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>BP168-1</td><td>להתאמת pH של HEB, PFA</td></tr><tr><td>אלבומין סרום בקר</td><td>מיליפור סיגמא</td><td>A7906-100G</td><td>עבור ADB</td></tr><tr><td>מיכל CO2</td><td></td><td></td><td>לאינקובטור</td></tr><tr><td>שקופיות מיקרוסקופ קורנינג</td><td>מיליפור סיגמא</td><td>CLS294875X25</td><td>אורך x רוחב 75 מ"מ x 25 מ"מ, צד אחד מטושטש</td></tr><tr><td>מגלשות מיקרוסקופ קורנינג, מצופות בצד אחד, קצה אחד</td><td>VWR</td><td>294875X25</td><td></td></tr><tr><td>כיסוי זכוכית מלבני. 60 x 24 מ"מ, #1.5</td><td>VWR</td><td>48393-251</td><td></td></tr><tr><td>צלחת ניתוח</td><td>מדעי מיקרוסקופיית אלקטרונים</td><td>70540</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופ דיסקציה</td><td></td><td></td><td>כל דגם סטנדרטי</td></tr><tr><td>מספריים לניתוח, קצה חד, 4.5 אינץ'</td><td>VWR</td><td>82027-578</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים דקים וחדים בקצה</td><td>VWR</td><td>76548-836</td><td></td></tr><tr><td>גימסה סטיין</td><td>מיליפור סיגמא</td><td>GS500-500</td><td>לצביעת ממרחי קיאזמטה</td></tr><tr><td>עט מחסום מים הידרופובי של ImmEdge</td><td>מעבדות וקטור</td><td>H-4000</td><td></td></tr><tr><td>חממה</td><td></td><td></td><td>כל דגם סטנדרטי עם טכנולוגיית CO2 וציפוי מים</td></tr><tr><td>תחנת עבודה IVF</td><td>K-Systems</td><td></td><td>כל דגם עם משטח חימום</td></tr><tr><td>פתרון Kodak Photo-Flo 200</td><td>BH Photo & וידאו</td><td>1464510</td><td>לשטיפות שקופיות</td></tr><tr><td>מתנול</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>A412-4</td><td>עבור הקיבוע של קרנוי</td></tr><tr><td>צנצנת צביעת קופלין של MP Biomedicals</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>ICN17006201</td><td></td></tr><tr><td>סרום רגיל של עז</td><td>גיבקו</td><td>16210-072</td><td>עבור ADB</td></tr><tr><td>פרפורמלדהיד, דרגת EM, פריל מטוהר</td><td>מדעי מיקרוסקופיית אלקטרונים</td><td>19200</td><td></td></tr><tr><td>פרמונט</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>SP15-100</td><td>for&nbsp; שקופיות התקנה לפריסות כיאזמטה</td></tr><tr><td>התקנת אנטי-פייד זכוכית ProLong עם כתם NucBlue</td><td>תרמו-סיינטיפיק</td><td>P36985</td><td>להרכבת שקופיות עם צבעי חיסון</td></tr><tr><td>צינור סיליקון, קוטר פנימי: 0.125", קוטר חיצוני: 0.25"</td><td>VWR</td><td>89068-474</td><td>לייצור פיפטה שמופעלת בפה</td></tr><tr><td>נתרן ציטראט דיהידראט</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>S279-500</td><td>עבור HEB, תמיסה היפוטונית</td></tr><tr><td>מערכת צביעת סלייד StainTray</td><td>מדעי מיקרוסקופיית אלקטרונים</td><td>71396-B</td><td>לשימוש כחדר לח. חייבים להשתמש במכסה השחור לצביעת אימונופלואורסנציה. ניתן לחלופין לרפד את תחתית קופסת סלייד אטומה או כלי טאפר עם מגבות נייר לחות לשימוש כחדר לחות &nbsp;</td></tr><tr><td>טיפים לחשפניות - 100</td><td>קופר כירורג'יה</td><td>MXL3-100</td><td>לפיפטה המופעלת בפה</td></tr><tr><td>טיפים לחשפניות - 150</td><td>קופר כירורג'יה</td><td>MXL3-150</td><td>לפיפטה המופעלת בפה</td></tr><tr><td>סוקרוזה</td><td>מיליפור סיגמא</td><td>S-8501</td><td>עבור HEB, תמיסה היפוטונית של סוכרוז</td></tr><tr><td>בסיס טריס</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>BP152-5</td><td>עבור HEB</td></tr><tr><td>טריטון X-100</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>BP151-100&nbsp;</td><td>עבור PFA, ADB ו-Triton-PBS</td></tr><tr><td>צנצנת הצביעה של United Scientific Coplin</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>S17495A</td><td>פלסטיק לבן אטום לשטיפות וחסימת שקופיות לאחר הוספת נוגדנים משניים רגישים לאור</td></tr><tr><td>שקופיות קונקויטי זכוכית של United Scientific Scientific</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>S139533</td><td>עובי 1.3 מ"מ, ספירת 2 בארות</td></tr><tr><td>Vannas Microdissection Scissors 5 מ"מ ישר</td><td>VWR</td><td>76457-358</td><td></td></tr><tr><td>Zeiss Axio Imager.Z2, Colibri 7</td><td>קרל צייס</td><td>000000-2624-307</td><td></td></tr><tr><td>תוכנת Zen Blue 3.11</td><td>קרל צייס</td><td></td><td>תוכנות לרכישת וניתוח תמונות</td></tr><tr><td>נוגדנים</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 AffiniPure F(ab')? Fragment Goat Anti-Mouse IgG, ספציפי לקטע Fc</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc.</td><td>115-546-071</td><td>השתמשו בדילול 1:1,000</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 AffiniPure F(ab')? Fragment Goat Anti-Rabbit IgG, Fc ספציפי לקטע</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc.</td><td>111-546-046</td><td>השתמשו בדילול 1:1,000</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647 AffiniPure F(ab')? Fragment Goat Anti-Human IgG, Fc&gamma; ספציפי לקטע</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc.</td><td>109-606-170</td><td>השתמשו בדילול 1:1,000</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647 AffiniPure עז אנטי-חזיר ים IgG, מקטע fc ספציפי</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc.</td><td>106-605-008</td><td>השתמשו בדילול 1:1,000</td></tr><tr><td>גינאי פיג נגד MLH3 pAb</td><td></td><td></td><td>יוצר בהתאמה אישית עם Thermo-Fisher, השתמש בדילול של 1:500</td></tr><tr><td>pAb נגד SYCP1 של גינאי פיג</td><td></td><td></td><td>מאת Christer H&ouml; &ouml; g (קוזנצובה ואח' 2005), השתמשו בדילול 1:200</td></tr><tr><td>pAb חלבון אנטי-צנטרומר אנושי</td><td>נוגדנים בע"מ.</td><td>15-234</td><td>השתמשו בדילול 1:1,000</td></tr><tr><td>עכבר נגד MLH1 mAb</td><td>BD ביוסיינסס</td><td>550838</td><td>שימוש בדילול 1:100</td></tr><tr><td>עכבר נגד SYCP3 mAb</td><td>אבקאם</td><td>ab97672</td><td>השתמשו בדילול 1:1,000</td></tr><tr><td>Rabbit Anti-HORMAD1 pAb</td><td>פרויטנטק</td><td>13917-1-AP</td><td>שימוש בדילול 1:500</td></tr><tr><td>Rabbit anti-MSH4 pAb</td><td>אבקלונל</td><td>A8556</td><td>שימוש בדילול 1:100</td></tr><tr><td>Rabbit anti-RAD51 pAb</td><td>מיליפור</td><td>PC130</td><td>שימוש בדילול 1:500</td></tr><tr><td>Rabbit anti-SYCP3 pAb</td><td>אבקאם</td><td>ab15093</td><td>השתמשו בדילול 1:1,000</td></tr><tr><td>Rhodamine Red-X (RRX) AffiniPure F(ab')? Fragment Goat Anti-Mouse IgG, ספציפי לקטע Fc</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc.</td><td>115-296-071</td><td>השתמשו בדילול 1:1,000</td></tr><tr><td>Rhodamine Red-X (RRX) AffiniPure F(ab')? Fragment Goat Anti-Rabbit IgG, Fc ספציפי לקטע</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc.</td><td>111-296-046</td><td>השתמשו בדילול 1:1,000</td></tr></tbody></table>

הכנת התפשטות כרומוזומים מיוטיים מביציות עכבר להערכת סינפסה ורקומבינציה

Preparation of Meiotic Chromosome Spreads from Mouse Oocytes for Assessment of Synapsis and Recombination

Three critical and interdependent processes define meiotic prophase I: homologous chromosomes must pair together, a proteinaceous structure called the ...

preparation-meiotic-chromosome-spreads-from-mouse-oocytes-for

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

ביולוגיה התפתחותית

ביציות נוטים aneuploidy בשל טעויות הפרדה כרומוזום במהלך ההבשלה meiotic. ביצים Aneuploid יכול לגרום לבעיות פוריות הפלות או הפרעות התפתחותיות כמו תסמונת דאון. כאן אנו מתארים שיטות להציג חומרים הבחירה לתוך ביציות ושיטות מחקר התבגרות meiotic ולהעריך ploidy.

הביצית Microinjection עכבר, הבשלה ו Ploidy הערכה

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לדלדול mRNA ספציפי בתיווך siRNA אחרי ניתוח immunofluorescence להעריך הרכבה ציר meiotic וארגון בביציות עכבר. פרוטוקול זה מתאים לדלדול במבחנה של תמלילים והערכה תפקודית של ציר שונה ו / או גורמים הקשורים MTOC בביציות.

Meiotic ציר ההערכה בעכבר ביציות על ידי השתקה בתיווך siRNA

מיוזה הוא תהליך התפתחותי שבו נוצרות גמטות דרך סבב אחד של שכפול ה-DNA, שני סיבובים רצופים של כרומוזום סגרגציה. מיוזה יונקים יכולים להיבדק על ידי ניצול טכניקה כדי להכין ממרחים כרומוזום meiotic. . הנה, נדגים שיטה של הכנת השטח-התפשטות גרעינים של העכבר spermatocytes.

הכנה של כרומוזום Meiotic מתפשטת העכבר Spermatocytes

Oogenesis ביונקים ידוע להיות מועדת לטעויות, במיוחד עקב כרומוזום missegregation. כתב יד זה מתאר שיטות הכנה כרומטין להפיץ prophase העכבר, מפה של אני, oocytes ביים השני. טכניקות יסוד אלה מאפשרים לימוד חלבוני כרומטין מכורך כרומוזום מורפולוגיה ברחבי oogenesis יונקים.

כרומטין להפיץ את ההכנות לניתוח של העכבר Oocyte התקדמות מן Prophase כדי מפה של השני

גרסאות גנטי המשויכים מחלות אנושיות מתחילים להיות חשפו, זה הופך יותר ויותר חשוב לפתח מערכות אשר במהירות והערכת החשיבות הביולוגית של משתנים אלה שזוהו. פרוטוקול זה מתאר שיטות להערכת תפקוד הגן האנושי במהלך המיוזה הנשי אני משתמש בעכבר oocytes.

באמצעות העכבר Oocytes כדי להעריך תפקוד הגן האנושי במהלך המיוזה אני

כפולות משטח גרעיני הם כלי הכרחי עבור לימוד אירועי כרומוזום במהלך meiosis. כאן אנו מדגימים שיטה כדי להכין ולדמיין כרומוזומים מיוטיים במהלך prophase הייתי מתוך הדגים הספרציטים.

הכנת כרומוזום מיוסטי כפולות מדגים בזימטציטים

שגיאה בהפרדת כרומוזומים היא תכונה נפוצה בביציות. לכן, חקר מחסום הרכבת הציר נותן רמזים חשובים על המנגנונים הדרושים לייצור ביצים בריאות. הפרוטוקול הנוכחי מתאר שלוש בדיקות משלימות להערכת שלמות מחסום הרכבת ציר בביציות עכבר.

הערכת שלמות מחסום הרכבת הציר בביציות עכבר

פרוטוקול זה מתאר טכניקה להערכת שינויים בכלי הדם האימהיים במהלך ההריון בעכברים. באמצעות שיטות סטריאולוגיות, שיפוץ העורקים הספירליים העשרוניים מוערך כמותית והתוצאות מאושרות איכותית באמצעות אימונוהיסטוכימיה.

הערכה של כלי דם אימהי שיפוץ במהלך ההריון ברחם העכבר

כאן אנו מציגים פרוטוקול לאפיון של ביציות Antral עכבר מבוססות על ארגון nucleolar.

בידוד ואפיון של עכבר Antral ביציות בהתבסס על ארגון הכרומטין nucleolar

כתב יד זה מתאר גישה ניסיונית מורפולוגית וביוכימית לאפיין ביציות סוסים. באופן ספציפי, העבודה הנוכחית מדגימה כיצד לאסוף ביציות של בוגר בוגרת ובוגרת על ידי אולטראסאונד מונחה איסוף ביצית (OPU) וכיצד לחקור הפרדה כרומוזום, מורפולוגיה ציר, acetylation היסטון גלובלי, ביטוי mRNA.

ניתוח של הפרדת כרומוזום, אצטון היסטון, ומורפולוגיה ציר ב סוס ביציות

למדו את שיטת הכנת התפשטות כרומוזומים מיוטיים מביציות עכבר להערכת סינפסה ורקומבינציה. שיטה זו מאפשרת חקר מפורט של תהליכי חלוקת התא בביולוגיה התפתחותית.

הכנת התפשטות כרומוזומים מיוטיים מביציות עכבר להערכת סינפסה ורקומבינציה

גלה סרטונים נוספים