25 ביולי 2025
מאמר זה מפרט פרוטוקול ממוטב עבור הזרקות תוך-קרדיוקרדיאליות מונחות אקו לב במודלים של חולדות של אוטם שריר הלב באמצעות מחט 29 G x 88 מ"מ. טכניקה זו מבטיחה אספקה חזקה, מדויקת וניתנת לשחזור של חומרים טיפוליים ישירות לאזור האוטם.
כדי להתחיל, השתמש באפליקטור סטרילי כדי למרוח ג'ל עיניים על שתי העיניים של חולדה מורדמת כדי למנוע יובש. לאחר הסרת שיער מלאה, יש לחטא את מקום ההזרקה על ידי החלפת חומר קרצוף כירורגי מתאים עם 70% אתנול. העבירו את החולדה מכרית החימום לפלטפורמת בעלי החיים של מערכת הדמיית האולטרסאונד.
מרחו כמות קטנה של ג'ל אלקטרודות כדי לחבר את כפות החולדה לאלקטרודות הפלטפורמה, ולשפר את איכות האות. לאחר מכן הכנס את בדיקת הטמפרטורה הרקטלית כדי לנטר את טמפרטורת הגוף ברציפות. כעת, רכוש את תמונות הבסיס או לפני ההזרקה הרצויות, כולל תצוגות ציר ארוך וציר קצר הן במצב B והן במצב M, כמו גם ארבע תמונות תא להערכה אנטומית ותפקודית.
להכנת מערכת ההזרקה, חבר מחט מנחה סטרילית בגודל 22 למזרק מיליליטר אחד. התקן את המזרק עם מחט ההנחיה על מהדק ההזרקה ואבטח אותו במקומו. לאחר מכן, יישר את מתמר האולטרסאונד עם תושבת ההזרקה כדי להבטיח שמחט ההנחיה נראית בשדה ההדמיה.
כוונן את מיקום המתמר באמצעות תושבת המתמר והחזקת clamp. מבלי להזיז את החולדה, סובב את פלטפורמת החיה עד שהחריץ במתמר מצביע לכיוון כתף ימין של החולדה. כדי לכוונן את ההדמיה, כוונן את ברגי המיקרומניפולטור על מסילת פלטפורמת החיה.
שמור על המתמר יציב כדי לשמור על יישור עם המחט. כעת, באמצעות מצב B של ציר ארוך parasternal והדמיית מצב M, דמיין את האזור האוטם. הערך את מידת האוטם, תנועת הקיר האזורית ואזורי דילול הקיר כדי לקבוע את היתכנות ההזרקה.
זהה את אזור האוטם ובחר אזור היפוקינטי ליד ליבת האוטם שעובי דופן דיאסטולי קצה גדול ממילימטר אחד. לאחר מכן, באמצעות מערכת המסילה, קדם את תושבת ההזרקה לכיוון פלטפורמת החיות. לאחר מכן כוונן את ברגי המיקרומניפולטור של תושבת ההזרקה כדי ליישר את קצה המחט עם המרכז המדויק של שדה המתמר.
כעת, כדי לקדם לאט את מחט ההנחיה ולנקב את העור, סובב את בורג המיקרומניפולטור בהזרקה על תושבת ההזרקה ואשר שקצה המחט נראה בשדה האולטרסאונד. לאחר מכן הפעל את תכונת מוביל המחט בתוכנת האולטרסאונד כדי לאשר את המסלול המתוכנן של מחט המנחה. קדם את מחט ההנחיה לעבר אתר ההזרקה שנבחר, ועצור עם השיפוע מילימטר עד שניים מהדופן הקדמית של החדר השמאלי.
לאחר שהמחט במקומה, הורה למפעיל אחד לייצב את מחט ההנחיה בבסיסה כדי לשמור על הדמיית אולטרסאונד מתמדת. בקש ממפעיל אחר לשחרר את מהדק המזרק, להסיר בזהירות את המזרק ולהחליף אותו במזרק המכיל את ההזרקה. לאחר מכן, חבר מחט באורך 88 מילימטר בגודל 29 למזרק המכיל את ההזרקה.
אבטח את המזרק על תושבת ההזרקה. הכנס ידנית את המחט דרך מחט ההנחיה הנייחת, ובצע התאמות קלות עם ברגי המיקרומניפולטור לאורך ציר ה-x במידת הצורך. המשך לקדם את המחט באופן ידני עד שהשיפוע נראה בחלל בית החזה באולטרסאונד.
לאחר שהמחט בגודל 29 נראית באולטרסאונד, קדם אותה לתוך שריר הלב של הדופן הקדמית של החדר השמאלי באמצעות ברגי המיקרומניפולטור לשליטה מדויקת. ודא שהאורך המלא של שיפוע המחט מוטבע בשריר הלב. הזרקו לאט את ההזרקה לשריר הלב.
אשר הזרקה מוצלחת על ידי התבוננות בנקודה אקוגנית בהירה וצפופה באתר ההזרקה הנעה עם תנועת הדופן של דופן החדר הקדמי השמאלי. לבסוף, הסר את המזרק והמחטים מתושבת ההזרקה כדי למנוע דקירות מחט בשוגג. הרם בזהירות את החולדה ממשטח החי והנח אותה על כרית חימום להתאוששות.
הדמיית ביולומינסנציה חשפה דליפה חלקית של תאי הגזע שהוזרקו עקב נסיגת מחט מוקדמת המצוינת על ידי אות זוהר מפוזר בחלל בית החזה. הזרקה תוך-קרדיורדיאלית מוצלחת אושרה על ידי אות זוהר מרוכז באזור אמצע הקודקוד השמאלי. הדמיה מחוץ לגוף של לבבות חתוכים הראתה את האות הביולוגי החזק ביותר בפרוסת אמצע הקודקוד עם אותות חלשים יותר בחלקים הקודקודיים והאמצעיים.
הדמיה שלאחר המוות של הלב הראתה הידרוג'ל סגול גלוי בסמוך לאזור האוטם, המאשר לידה ממוקדת. הדמיה פלואורסצנטית של רקמת הלב הראתה כי העוקב האדום היה מוגבל לאזור האוטם, מה שאישר אספקה מקומית. צביעה אדומה של סיריוס אישרה כי העוקב הועבר לאזור בעובי דופן ביניים בין ליבת האוטם לשריר הלב הבריא.
הדמיית דופלר צבעונית אישרה שהמחט הונחה כהלכה בתוך שריר הלב ללא זרימת דם נראית לעין לפני ההזרקה. במהלך ההזרקה, הדופן הקדמית נותרה שלמה ללא זרימת דם חיצונית. לאחר משיכת המחט, ההזרקה שנשמרה נראתה בתוך שריר הלב ולא נצפה דימום.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים
מאמר זה מפרט פרוטוקול מותאם להזרקות תוך-שריריות של השריר הלבבי בהנחיית אקו-לב במודלים של אוטם שריר הלב בחולדות, תוך שימוש במחט 29 G x 88 mm. טכניקה זו מבטיחה הולכה חסונה, מדויקת וניתנת לשחזור של חומרים טיפוליים ישירות לאזור סביב האוטם (peri-infarct zone).
הזרקה תוך-שרירית של השריר הלבבי בהנחיית אקו-קרדיוגרפיה במודלים של אוטם בשריר הלב בחולדות נותנת מענה לצורך קריטי בהגשה מדויקת וניתנת לשחזור של טיפולים רגנרטיביים במחקר קרדיווסקולרי פרה-קליני. על ידי מתן אפשרות למתן ממוקד ופולשני באופן מינימלי לאזור שסביב האוטם (peri-infarct zone), שיטה זו משפרת את הרלוונטיות התרגומית ותומכת בקבלת החלטות מוצקה בתהליכי הפיתוח. התאימות של הפרוטוקול למחקרים אורכיים ולפלטפורמות דימות סטנדרטיות ממצבת אותו כנכס ניתן להרחבה עבור פורטפולי מו"פ ארגוניים.
פרוטוקול הזרקה זה, המונחה על ידי אקו-קרדיוגרפיה, משתלב ברצף של שלבי הגילוי והזיהוי המוקדם (discovery-to-lead identification) של טיפולים רגנרטיביים ללב במוסבי פרה-קליניקה.