Name: קביעת ביומסה מיקרוביאלית בקרקע באמצעות PCR טיפות דיגיטליות (ddPCR) (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-04-24T14:20:00.000+00:00
Duration: 7 min 46 s
Description: למד לכמת ביומסה מיקרוביאלית בקרקע באמצעות PCR טיפות דיגיטליות. שיטה זו מאפשרת כימות מוחלט של גנים 16S ו-18S rRNA בחיידקים ובפטריות, ומספקת הערכה רגישה של פחמן ביומסה מיקרוביאלית.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Jobbágy, E. G., Jackson, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+vertical+distribution+of+soil+organic+carbon+and+its+relation+to+climate+and+vegetation%5BTitle%5D)+AND+%22Ecol+Appl%22%5BJournal%5D)">The vertical distribution of soil organic carbon and its relation to climate and vegetation.</a> Ecol Appl. 10 (2), 423-436 (2000).</li>
<li>Sanderman, J., Hengl, T., Fiske, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Soil+carbon+debt+of+12%2C000+years+of+human+land+use%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Soil carbon debt of 12,000 years of human land use.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 114 (36), 9575-9580 (2017).</li>
<li>He, Y., Li, J., Siemann, E., Li, B., Xu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plant+invasion+increases+soil+microbial+biomass+carbon%3A+meta-analysis+and+empirical+tests%5BTitle%5D)+AND+%22Glob+Change+Biol%22%5BJournal%5D)">Plant invasion increases soil microbial biomass carbon: meta-analysis and empirical tests.</a> Glob Change Biol. 31 (3), e70109(2025).</li>
<li>de Menezes, A. B., Richardson, A. E., Thrall, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Linking+fungal-bacterial+co-occurrences+to+soil+ecosystem+function%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Linking fungal-bacterial co-occurrences to soil ecosystem function.</a> Curr Opin Microbiol. 37, 135-141 (2017).</li>
<li>Wang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ddPCR+surpasses+classical+qPCR+technology+in+quantitating+bacteria+and+fungi+in+the+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ecol+Resour%22%5BJournal%5D)">ddPCR surpasses classical qPCR technology in quantitating bacteria and fungi in the environment.</a> Mol Ecol Resour. 22 (7), 2587-2598 (2022).</li>
<li>Djemiel, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biogeographical+patterns+of+the+soil+fungal%3Abacterial+ratio+across+France%5BTitle%5D)+AND+%22mSphere%22%5BJournal%5D)">Biogeographical patterns of the soil fungal:bacterial ratio across France.</a> mSphere. 8 (5), e0036523(2023).</li>
<li>Bailey, V. L., Smith, J. L., Bolton, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fungal-to-bacterial+ratios+in+soils+investigated+for+enhanced+C+sequestration%5BTitle%5D)+AND+%22Soil+Biol+Biochem%22%5BJournal%5D)">Fungal-to-bacterial ratios in soils investigated for enhanced C sequestration.</a> Soil Biol Biochem. 34 (7), 997-1007 (2002).</li>
<li>Vance, E. D., Brookes, P. C., Jenkinson, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microbial+biomass+measurements+in+forest+soils%3A+the+use+of+the+chloroform+fumigation-incubation+method+in+strongly+acid+soils%5BTitle%5D)+AND+%22Soil+Biol+Biochem%22%5BJournal%5D)">Microbial biomass measurements in forest soils: the use of the chloroform fumigation-incubation method in strongly acid soils.</a> Soil Biol Biochem. 19 (6), 697-702 (1987).</li>
<li>Frostegård, Å, Bååth, E., Tunlio, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shifts+in+the+structure+of+soil+microbial+communities+in+limed+forests+as+revealed+by+phospholipid+fatty+acid+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Soil+Biol+Biochem%22%5BJournal%5D)">Shifts in the structure of soil microbial communities in limed forests as revealed by phospholipid fatty acid analysis.</a> Soil Biol Biochem. 25 (6), 723-730 (1993).</li>
<li>Cao, Z., Li, D., Han, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+fungal+to+bacterial+ratio+in+soil+food+webs%2C+and+its+measurement%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Ecol+Sin%22%5BJournal%5D)">The fungal to bacterial ratio in soil food webs, and its measurement.</a> Acta Ecol Sin. 31 (20), 6050-6058 (2011).</li>
<li>Frossard, A., Hammes, F., Gessner, M. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flow+cytometric+assessment+of+bacterial+abundance+in+soils%2C+sediments+and+sludge%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Flow cytometric assessment of bacterial abundance in soils, sediments and sludge.</a> Front Microbiol. 7, 903(2016).</li>
<li>Joergensen, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+hitchhiker%E2%80%99s+guide%3A+Estimates+of+microbial+biomass+and+microbial+gene+abundance+in+soil%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Fertil+Soils%22%5BJournal%5D)">A hitchhiker’s guide: Estimates of microbial biomass and microbial gene abundance in soil.</a> Biol Fertil Soils. 60 (4), 457-470 (2024).</li>
<li>Fierer, N., Wood, S. A., Bueno de Mesquita, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+microbes+can%2C+and+cannot%2C+be+used+to+assess+soil+health%5BTitle%5D)+AND+%22Soil+Biol+Biochem%22%5BJournal%5D)">How microbes can, and cannot, be used to assess soil health.</a> Soil Biol Biochem. 153, 108111(2021).</li>
<li>Laine, M. B., Taipale, S. J., Tiirola, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+methods+for+assessing+fungi-to-bacteria+ratio+of+soil%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Fertil+Soils%22%5BJournal%5D)">Comparison of methods for assessing fungi-to-bacteria ratio of soil.</a> Biol Fertil Soils. 61 (5), 941-954 (2025).</li>
<li>De Filippis, F., Laiola, M., Blaiotta, G., Ercolini, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Different+amplicon+targets+for+sequencing-based+studies+of+fungal+diversity%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Environ+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Different amplicon targets for sequencing-based studies of fungal diversity.</a> Appl Environ Microbiol. 83 (17), e00905-e00917 (2017).</li>
<li>Liu, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FungiQuant%3A+A+broad-coverage+fungal+quantitative+real-time+PCR+assay%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Microbiol%22%5BJournal%5D)">FungiQuant: A broad-coverage fungal quantitative real-time PCR assay.</a> BMC Microbiol. 12, 255(2012).</li>
<li>Lofgren, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome-based+estimates+of+fungal+rDNA+copy+number+variation+across+phylogenetic+scales+and+ecological+lifestyles%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ecol%22%5BJournal%5D)">Genome-based estimates of fungal rDNA copy number variation across phylogenetic scales and ecological lifestyles.</a> Mol Ecol. 28 (4), 721-730 (2019).</li>
<li>Angly, F. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((W.+CopyRighter%3A+A+rapid+tool+for+improving+the+accuracy+of+microbial+community+profiles+through+lineage-specific+gene+copy+number+correction%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiome%22%5BJournal%5D)">W. CopyRighter: A rapid tool for improving the accuracy of microbial community profiles through lineage-specific gene copy number correction.</a> Microbiome. 2 (1), 11(2014).</li>
<li>Kembel, S. W., Wu, M., Eisen, J. A., Green, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incorporating+16S+gene+copy+number+information+improves+estimates+of+microbial+diversity+and+abundance%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Comput+Biol%22%5BJournal%5D)">Incorporating 16S gene copy number information improves estimates of microbial diversity and abundance.</a> PLoS Comput Biol. 8 (10), e1002743(2012).</li>
<li>Pan, P., Gu, Y., Sun, D. L., Wu, Q. L., Zhou, N. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microbial+diversity+biased+estimation+caused+by+intragenomic+heterogeneity+and+interspecific+conservation+of+16S+rRNA+genes%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Environ+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Microbial diversity biased estimation caused by intragenomic heterogeneity and interspecific conservation of 16S rRNA genes.</a> Appl Environ Microbiol. 89 (5), e0210822(2023).</li>
<li>Chacón-Vargas, K., Torres, J., Giles-Gómez, M., Escalante, A., Gibbons, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genomic+profiling+of+bacterial+and+fungal+communities+and+their+predictive+functionality+during+pulque+fermentation+by+whole-genome+shotgun+sequencing%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Genomic profiling of bacterial and fungal communities and their predictive functionality during pulque fermentation by whole-genome shotgun sequencing.</a> Sci Rep. 10 (1), 15115(2020).</li>
<li>Bahram, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metagenomic+assessment+of+the+global+diversity+and+distribution+of+bacteria+and+fungi%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Metagenomic assessment of the global diversity and distribution of bacteria and fungi.</a> Environ Microbiol. 23 (1), 316-326 (2021).</li>
<li>Smith, C. J., Osborn, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advantages+and+limitations+of+quantitative+PCR+%28Q-PCR%29-based+approaches+in+microbial+ecology%3A+Application+of+Q-PCR+in+microbial+ecology%5BTitle%5D)+AND+%22FEMS+Microbiol+Ecol%22%5BJournal%5D)">Advantages and limitations of quantitative PCR (Q-PCR)-based approaches in microbial ecology: Application of Q-PCR in microbial ecology.</a> FEMS Microbiol Ecol. 67 (1), 6-20 (2009).</li>
<li>Hindson, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-throughput+droplet+digital+PCR+system+for+absolute+quantitation+of+DNA+copy+number%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">High-throughput droplet digital PCR system for absolute quantitation of DNA copy number.</a> Anal Chem. 83 (22), 8604-8610 (2011).</li>
<li>Le Geay, M., Mayers, K., Küttim, M., Lauga, B., Jassey, V. E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+digital+droplet+PCR+approach+for+the+quantification+of+soil+micro-organisms+involved+in+atmospheric+CO2+fixation%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Development of a digital droplet PCR approach for the quantification of soil micro-organisms involved in atmospheric CO2 fixation.</a> Environ Microbiol. 26 (6), e16666(2024).</li>
<li>Hansen, P. M., Semenova-Nelsen, T. A., Platt, W. J., Sikes, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recurrent+fires+do+not+affect+the+abundance+of+soil+fungi+in+a+frequently+burned+pine+savanna%5BTitle%5D)+AND+%22Fungal+Ecol%22%5BJournal%5D)">Recurrent fires do not affect the abundance of soil fungi in a frequently burned pine savanna.</a> Fungal Ecol. 42, 100852(2019).</li>
<li>Ovreås, L., Forney, L., Daae, F. L., Torsvik, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distribution+of+bacterioplankton+in+meromictic+Lake+Saelenvannet%2C+as+determined+by+denaturing+gradient+gel+electrophoresis+of+PCR-amplified+gene+fragments+coding+for+16S+rRNA%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Environ+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Distribution of bacterioplankton in meromictic Lake Saelenvannet, as determined by denaturing gradient gel electrophoresis of PCR-amplified gene fragments coding for 16S rRNA.</a> Appl Environ Microbiol. 63 (9), 3367-3373 (1997).</li>
<li>Whitman, W. B., Coleman, D. C., Wiebe, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prokaryotes%3A+The+unseen+majority%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Prokaryotes: The unseen majority.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 95 (12), 6578-6583 (1998).</li>
<li>Cheng, J. Y. W., Chan, C. K., Lee, C. T., Lau, A. P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Carbon+content+of+common+airborne+fungal+species+and+fungal+contribution+to+aerosol+organic+carbon+in+a+subtropical+city%5BTitle%5D)+AND+%22Atmos+Environ%22%5BJournal%5D)">Carbon content of common airborne fungal species and fungal contribution to aerosol organic carbon in a subtropical city.</a> Atmos Environ. 43 (17), 2781-2787 (2009).</li>
<li>Wood, D. E., Lu, J., Langmead, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+metagenomic+analysis+with+Kraken+2%5BTitle%5D)+AND+%22Genome+Biol%22%5BJournal%5D)">Improved metagenomic analysis with Kraken 2.</a> Genome Biol. 20 (1), 257(2019).</li>
<li>Rousk, J., Brookes, P. C., Bååth, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contrasting+soil+pH+effects+on+fungal+and+bacterial+growth+suggest+functional+redundancy+in+carbon+mineralization%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Environ+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Contrasting soil pH effects on fungal and bacterial growth suggest functional redundancy in carbon mineralization.</a> Appl Environ Microbiol. 75 (6), 1589-1596 (2009).</li>
<li>Xie, Z., Canalda-Baltrons, A., d’Enfert, C., Manichanh, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shotgun+metagenomics+reveals+interkingdom+association+between+intestinal+bacteria+and+fungi+involving+competition+for+nutrients%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiome%22%5BJournal%5D)">Shotgun metagenomics reveals interkingdom association between intestinal bacteria and fungi involving competition for nutrients.</a> Microbiome. 11 (1), 275(2023).</li>
<li>Větrovský, T., Baldrian, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+variability+of+the+16S+rRNA+gene+in+bacterial+genomes+and+its+consequences+for+bacterial+community+analyses%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">The variability of the 16S rRNA gene in bacterial genomes and its consequences for bacterial community analyses.</a> PLoS One. 8 (2), e57923(2013).</li>
<li>Doyle, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Absolute+quantification+of+prokaryotes+in+the+microbiome+by+16S+rRNA+qPCR+or+ddPCR%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Absolute quantification of prokaryotes in the microbiome by 16S rRNA qPCR or ddPCR.</a> Nat Protoc. 20, 3471-3476 (2025).</li>
<li>Frostegård, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+bias+related+to+the+extraction+of+DNA+directly+from+soils%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Environ+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Quantification of bias related to the extraction of DNA directly from soils.</a> Appl Environ Microbiol. 65 (12), 5409-5420 (1999).</li>
<li>Lee, E., Lim, H. J., Son, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discrepancies+in+qPCR-based+gene+quantification+and+their+dependencies+on+soil+properties%2C+inhibitor+presence%2C+and+DNA+extraction+kit+types%5BTitle%5D)+AND+%22RSC+Adv%22%5BJournal%5D)">Discrepancies in qPCR-based gene quantification and their dependencies on soil properties, inhibitor presence, and DNA extraction kit types.</a> RSC Adv. 15 (25), 19656-19664 (2025).</li>
<li>Buell, Z. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interrelationships+among+methods+of+estimating+microbial+biomass+across+multiple+soil+orders+and+biomes%5BTitle%5D)+AND+%22Soil+Biol+Biochem%22%5BJournal%5D)">Interrelationships among methods of estimating microbial biomass across multiple soil orders and biomes.</a> Soil Biol Biochem. 208, 109844(2025).</li>
<li>Carini, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relic+DNA+is+abundant+in+soil+and+obscures+estimates+of+soil+microbial+diversity%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Relic DNA is abundant in soil and obscures estimates of soil microbial diversity.</a> Nat Microbiol. 2 (3), 16242(2016).</li>
<li>Child, H. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+environmental+metagenomics+using+Oxford+nanopore+sequencing%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Genomics%22%5BJournal%5D)">Automated environmental metagenomics using Oxford nanopore sequencing.</a> BMC Genomics. 26 (1), 835(2025).</li>
<li>Paliaga, S., Laudicina, V. A., Muscarella, S. M., Said-Pullicino, D., Badalucco, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+different+methods+for+estimating+microbial+biomass+in+biochar-amended+soils%5BTitle%5D)+AND+%22Soil+Biol+Biochem%22%5BJournal%5D)">Comparison of different methods for estimating microbial biomass in biochar-amended soils.</a> Soil Biol Biochem. 203, 109733(2025).</li>
<li>Setia, R., Verma, S. L., Marschner, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+microbial+biomass+carbon+by+direct+extraction%3A+comparison+with+chloroform+fumigation-extraction%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Soil+Biol%22%5BJournal%5D)">Measuring microbial biomass carbon by direct extraction: comparison with chloroform fumigation-extraction.</a> Eur J Soil Biol. 53, 103-106 (2012).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Bettersizer S3 Plus&nbsp;</td><td>בטרסייז, סין</td><td>BT-803</td><td></td></tr><tr><td>צנטריפוגה</td><td>תרמוסנטיפיק&nbsp;</td><td>SL16&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>כלורופורם&nbsp;</td><td>תרמו-סיינטיפיקי</td><td>L14759. AU&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>לוחות ddPCR 96-באר</td><td>ביו-רד, ווטפורד, בריטניה</td><td>12001925</td><td></td></tr><tr><td>שמן קורא טיפות ddPCR &nbsp;</td><td>ביו-רד, ווטפורד, בריטניה</td><td>1863004</td><td></td></tr><tr><td>Dessicator&nbsp;</td><td>דייוויסיל</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מחזיק תחמושת DG8</td><td>ביו-רד, ווטפורד, בריטניה</td><td>1863051</td><td></td></tr><tr><td>מחסניות DG8 לגנרטור טיפות QX200/QX100</td><td>ביו-רד, ווטפורד, בריטניה</td><td>1864008</td><td></td></tr><tr><td>אטמי DG8 לגנרטור טיפות QX200/QX100</td><td>ביו-רד, ווטפורד, בריטניה</td><td>Q33265</td><td></td></tr><tr><td>ערכת DNeasy Power Soil pro&nbsp;</td><td>קיאגן, גרמניה</td><td>47017</td><td></td></tr><tr><td>ערכת בדיקה רחבה (BR) דו-גדילית (dsDNA)</td><td>Invitrogen, גרמניה</td><td>Q33230</td><td></td></tr><tr><td>FastPrep-24 5G&nbsp;</td><td>MP Biomedicals, בריטניה</td><td>116005500</td><td></td></tr><tr><td>GridION&nbsp;</td><td>אוקספורד ננופור טכנולוגיות, בריטניה</td><td>GRD-MK1CAPX</td><td></td></tr><tr><td>K2SO4</td><td>מרק, בריטניה</td><td>7778-80-5</td><td></td></tr><tr><td>חרוזים מגנטיים מסוג Mag-Bind</td><td>אומגה ביו-טק, ארה"ב</td><td>M1378-01</td><td></td></tr><tr><td>תא זרימת MinION</td><td>אוקספורד ננופור טכנולוגיות, בריטניה</td><td>FLO-MIN114</td><td></td></tr><tr><td>תנור עמום</td><td>קרבוליט&nbsp;</td><td>AAF1100</td><td></td></tr><tr><td>ערכת ברקודינג מקורית 24</td><td>אוקספורד ננופור טכנולוגיות, בריטניה</td><td>SQK-NBD114.24</td><td></td></tr><tr><td>אטם חום ללוח PCR, נייר כסף, ניתן לחדור ו-nbsp;</td><td>ביו-רד, ווטפורד, בריטניה</td><td>1814040</td><td></td></tr><tr><td>חותם לוחות PCR PX1</td><td>ביו-רד, ווטפורד, בריטניה</td><td>1814000</td><td></td></tr><tr><td>פלואורומטר קיוביט</td><td>Invitrogen, גרמניה</td><td>Q33226</td><td></td></tr><tr><td>מערכת ה-PCR הדיגיטלית QX200 Droplet</td><td>ביו-רד, ווטפורד, בריטניה</td><td>1864001</td><td></td></tr><tr><td>QX200 ddPCR EvaGreen Supermix</td><td>ביו-רד, ווטפורד, בריטניה</td><td>186-4033</td><td></td></tr><tr><td>שמן ייצור טיפות QX200 עבור EvaGreen&nbsp;</td><td>ביו-רד, ווטפורד, בריטניה</td><td>1864005</td><td></td></tr><tr><td>QXDx Droplet Generator&nbsp;</td><td>ביו-רד, ווטפורד, בריטניה</td><td>12001049</td><td></td></tr><tr><td>SENSOQUEST LABCYCLER&nbsp;</td><td>ג'נפלו, גרמניה</td><td>1120280125</td><td></td></tr></tbody></table>

קביעת ביומסה מיקרוביאלית בקרקע באמצעות pcr טיפות דיגיטליות (ddpcr)

Determination of Microbial Biomass in Soil using Digital Droplet PCR (ddPCR)

קביעת ביומסה מיקרוביאלית בקרקע באמצעות PCR טיפות דיגיטליות (ddPCR)

Soil represents the largest terrestrial pool of organic carbon, yet more than 133 Gt of carbon has been lost from soils over the past two centuries. ...

determination-microbial-biomass-soil-using-digital-droplet-pcr

Research

JoVE Journal

Environment

סביבה

אנו מתארים בדיקה דיגיטלית של נקודת קצה לכימות חומצות גרעין עם קריאה פשוטה (אנלוגית). אנו מודדים פלואורסצנטיות בתפזורת של בדיקות דיגיטליות מבוססות טיפות באמצעות מכונת qPCR סטנדרטית במקום מכשור מיוחד ומאשרים את התוצאות שלנו במיקרוסקופיה.

Readout גורף פשוט של דיגיטלי מבחני כימות חומצות גרעין

כתב יד זה מתאר assay PCR דיגיטלית דופלקס, שניתן להשתמש בהם כדי לכמת spp אנטרוקוקוס זמנית. ואת סמנים גנטיים HF183 כאינדיקטורים לזיהום צואתי כללית אדם הקשורים במים פנאי.

Assay PCR דיגיטלי דופלקס כימות סימולטני של<em&gt; Spp אנטרוקוקוס.</em&gt; ואת מרקר HF183 הקשורים צואת האדם ווטרס

מתוארת שיטה רגישה ומדויקת לכימות מיקרו-רנ"א נטול תאים באמצעות כימיה מבוססת צבע וטכנולוגיית PCR דיגיטלית טיפות.

במחזור כימות MicroRNA שימוש DNA מחייבת כימיה דיי PCR דיגיטלי אגל

זיהוי מהיר ומדויק של פתוגנים באתר, במיוחד קרקע בתפו פתוגנים צמח, הוא חיוני כדי למנוע התפשטות של מחלות בתחום עיצוב והפקת inoculum. השיטה שפותחה כאן באמצעות מערכת זיהוי PCR נייד בזמן אמת מאפשר האבחון באתר בתנאי שדה.

זיהוי מולקולרי באתר של קרקע בתפו Phytopathogens באמצעות מערכת ה-PCR נייד בזמן אמת

כאן, אנו מתארים את פרוטוקול להשיג אמפליקון רצף נתונים של קרקע, rhizosphere, microbiomes endosphere השורש. מידע זה יכול לשמש כדי לחקור את הרכב ואת הרב-גוניות של צמח-הקשורים קהילות מיקרוביאלי, מתאים לשימוש עם מגוון רחב של מיני צמחים.

לחקור את השורש Microbiome: שליפת נתונים הקהילה חיידקי מן האדמה, Rhizosphere, Endosphere שורש

מתוארים כאן הוא הליך סטנדרטי הפעלה פשוטה עבור הפרופיל microbiome באמצעות רצף מטאגנמית של 16S וניתוח באמצעות כלים זמינים בחופשיות. פרוטוקול זה יסייע לחוקרים החדשים לשדה microbiome, כמו גם אלה הדורשים עדכונים על שיטות להשיג פרופיל חיידקי ברזולוציה גבוהה יותר.

אנליזה microbiota באמצעות שני שלבים PCR ו-הדור הבא של 16 rRNA גן רצף

כאן אנו מציגים פרוטוקול למדידת מספר עותק דנ"א מיטוכונדריאלי מוחלט (mt)DNA ורמות הטרופלזמה של מחיקת mtDNA בתאים בודדים.

מדידת מספר עותק דנ"א מיטוכונדריאלי חד-תאי והטרופלזמה באמצעות תגובת שרשרת דיגיטלית של טיפות פולימראז

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לפיתוח ותיקוף של שיטות מעבדה טובות בזיהוי תואם של וקטורים נגיפיים הקשורים באדנו בדמעות אנושיות על ידי תגובת שרשרת פולימראז דיגיטלית טיפתית לתמיכה בפיתוח קליני של וקטורים של ריפוי גנטי.

בדיקת תגובת שרשרת של פולימראז דיגיטלי טיפתי לזיהוי וקטורים נגיפיים הקשורים לאדנו במחקרי שפיכה ביולוגית של דמעות

כימות מדויק של עותקים גנומיים וקטוריים הקשורים לנגיף אדנו (AAV) הוא קריטי, אך פרוטוקול סטנדרטי טרם נקבע. פרוטוקול זה מתאר שיטה מתוקפת להכנת דגימות AAV מטוהרות וביצוע תגובת שרשרת פולימראז טיפתית דיגיטלית (dd_PCR) כדי לכמת באופן אמין את טיטר הגנום הנגיפי.

כימות גנומים נגיפיים הקשורים באדנו בדגימות וקטוריות מטוהרות על ידי תגובת שרשרת של פולימראז טיפתי דיגיטלי

צורות אמינות ומדויקות של ניתוח DNA שניתן לפרוס בשטח הן קריטיות לתעשיות רבות. מאמר זה מציע שתי שיטות לניתוח מיקרוביאלי סביבתי בשטח: 1) בידוד DNA מיקרוביאלי מדגימות סביבתיות באמצעות ערכת שדה חילוץ ביולוגית, ו-2) ניתוח DNA באמצעות יחידת qPCR בשטח.

ניתוח DNA מיקרוביאלי בשטח באמצעות ערכת שדה חילוץ ביולוגית ויחידת qPCR שדה

למד לכמת ביומסה מיקרוביאלית בקרקע באמצעות PCR טיפות דיגיטליות. שיטה זו מאפשרת כימות מוחלט של גנים 16S ו-18S rRNA בחיידקים ובפטריות, ומספקת הערכה רגישה של פחמן ביומסה מיקרוביאלית.

קביעת ביומסה מיקרוביאלית בקרקע באמצעות PCR טיפות דיגיטליות (ddPCR)

גלה סרטונים נוספים