Name: הכנה והדמיה חיה של ספרואידים מתחדשים של הידרה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-02-20T14:10:00.000+00:00
Duration: 7 min 4 s
Description: למד את פרוטוקול ההכנה והדמיה החיה של ספרואידים מתחדשים של Hydra באמצעות מיקרוסקופיית דיסק מסתובב ולייט-שיט. שיטה זו מאפשרת מעקב אחר תהליכי ההתחדשות והיווצרות האורגניזציה בזמן אמת.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Bode, P. M., Bode, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Formation+of+pattern+in+regenerating+tissue+pieces+of+hydra+attenuata%3A+I.+Head-body+proportion+regulation%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Formation of pattern in regenerating tissue pieces of hydra attenuata: I. Head-body proportion regulation.</a> Dev Biol. 78 (2), 484-496 (1980).</li>
<li>Fütterer, C., Colombo, C., Jülicher, F., Ott, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphogenetic+oscillations+during+symmetry+breaking+of+regenerating+hydra+vulgaris+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Europhys+Lett%22%5BJournal%5D)">Morphogenetic oscillations during symmetry breaking of regenerating hydra vulgaris cells.</a> Europhys Lett. 64 (1), 137(2003).</li>
<li>Weevers, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanochemical+patterning+localizes+the+organizer+of+a+luminal+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Adv%22%5BJournal%5D)">Mechanochemical patterning localizes the organizer of a luminal epithelium.</a> Sci Adv. 11 (26), eadu2286(2025).</li>
<li>Oreopoulos, J., Berman, R., Browne, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chapter+9+-+Spinning-disk+confocal+microscopy%3A+present+technology+and+future+trends%5BTitle%5D)+AND+%22Meth+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Chapter 9 - Spinning-disk confocal microscopy: present technology and future trends.</a> Meth Cell Biol. 123, 153-175 (2014).</li>
<li>Stelzer, E. H. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Light+sheet+fluorescence+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Meth+Primers%22%5BJournal%5D)">Light sheet fluorescence microscopy.</a> Nat Rev Meth Primers. 1 (1), 73(2021).</li>
<li>Moos, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Open-top+multisample+dual-view+light-sheet+microscope+for+live+imaging+of+large+multicellular+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Meth%22%5BJournal%5D)">Open-top multisample dual-view light-sheet microscope for live imaging of large multicellular systems.</a> Nat Meth. 21 (5), 798-803 (2024).</li>
<li>Soriano, J., Colombo, C., Ott, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hydra+molecular+network+reaches+criticality+at+the+symmetry-breaking+axis-defining+moment%5BTitle%5D)+AND+%22Phys+Rev+Lett%22%5BJournal%5D)">Hydra molecular network reaches criticality at the symmetry-breaking axis-defining moment.</a> Phys Rev Lett. 97 (25), 258102(2006).</li>
<li>Livshits, A., Shani-Zerbib, L., Maroudas-Sacks, Y., Braun, E., Keren, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+inheritance+of+the+actin+cytoskeletal+organization+determines+the+body+axis+in+regenerating+hydra%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Structural inheritance of the actin cytoskeletal organization determines the body axis in regenerating hydra.</a> Cell Rep. 18 (6), 1410-1421 (2017).</li>
<li>Hanson, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automatic+monitoring+of+neural+activity+with+single-cell+resolution+in+behaving+hydra%5BTitle%5D)+AND+%22Sc+Rep%22%5BJournal%5D)">Automatic monitoring of neural activity with single-cell resolution in behaving hydra.</a> Sc Rep. 14 (1), 5083(2024).</li>
<li>Escobar, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Terminal+differentiation+precedes+functional+circuit+integration+in+the+peduncle+neurons+in+regenerating+hydra+vulgaris%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Dev%22%5BJournal%5D)">Terminal differentiation precedes functional circuit integration in the peduncle neurons in regenerating hydra vulgaris.</a> Neural Dev. 19 (1), 18(2024).</li>
<li>Ferenc, J., Tsiairis, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studying+Mechanical+Oscillations+During+Whole-Body+Regeneration+in+Hydra%5BTitle%5D)+AND+%22Whole-Body+Regenerat%22%5BJournal%5D)">Studying Mechanical Oscillations During Whole-Body Regeneration in Hydra.</a> Whole-Body Regenerat. 2450, 619-633 (2022).</li>
<li>Bossert, P., Galliot, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+to+use+hydra+as+a+model+system+to+teach+biology+in+the+classroom%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">How to use hydra as a model system to teach biology in the classroom.</a> Int J Dev Biol. 56 (6-8), 637-652 (2012).</li>
<li>Jemielita, M., Taormina, M. J., Delaurier, A., Kimmel, C. B., Parthasarathy, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparing+phototoxicity+during+the+development+of+a+zebrafish+craniofacial+bone+using+confocal+and+light+sheet+fluorescence+microscopy+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biophotonics%22%5BJournal%5D)">Comparing phototoxicity during the development of a zebrafish craniofacial bone using confocal and light sheet fluorescence microscopy techniques.</a> J Biophotonics. 6 (11-12), 920-928 (2013).</li>
<li>Icha, J., Weber, M., Waters, J. C., Norden, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phototoxicity+in+live+fluorescence+microscopy%2C+and+how+to+avoid+it%5BTitle%5D)+AND+%22Bioessays%22%5BJournal%5D)">Phototoxicity in live fluorescence microscopy, and how to avoid it.</a> Bioessays. 39 (8), 1700003(2017).</li>
<li>Ravichandran, Y., Vogg, M., Kruse, K., Pearce, D. J. G., Roux, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topology+changes+of+hydra+define+actin+orientation+defects+as+organizers+of+morphogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Adv%22%5BJournal%5D)">Topology changes of hydra define actin orientation defects as organizers of morphogenesis.</a> Sci Adv. 11 (3), eadr9855(2025).</li>
<li>Maroudas-Sacks, Y., Garion, L., Suganthan, S., Popović, M., Keren, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Confinement+modulates+axial+patterning+in+regenerating+hydra%5BTitle%5D)+AND+%22PRX+Life%22%5BJournal%5D)">Confinement modulates axial patterning in regenerating hydra.</a> PRX Life. 2 (4), 043007(2024).</li>
<li>Bailles, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anisotropic+stretch+biases+the+self-organization+of+actin+fibers+in+multicellular+hydra+aggregates%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci%22%5BJournal%5D)">Anisotropic stretch biases the self-organization of actin fibers in multicellular hydra aggregates.</a> Proc Natl Acad Sci. 122 (32), e2423437122(2025).</li>
<li>Luu, P., Fraser, S. E., Schneider, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((More+than+double+the+fun+with+two-photon+excitation+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Comm+Biol%22%5BJournal%5D)">More than double the fun with two-photon excitation microscopy.</a> Comm Biol. 7 (1), 364(2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>20&times;/0.8 Plan-Apochromat objective</td><td>Zeiss</td><td>440640-9903-000</td><td>למיקרוסקופיית ספין-דיסק קונפוקלית</td></tr><tr><td>20x/1.0 W Plan-Apochromat water dipping objective</td><td>Zeiss</td><td>421452-9700-000</td><td>משמש כאובייקטיב גילוי ב-Zeiss Lightsheet 7</td></tr><tr><td>מחזיק מודפס ב-3D להתקנת תא FEP</td><td></td><td></td><td>התאמה אישית</td></tr><tr><td>לוח תמונה תחתית זכוכית 4 בארות (#1.5H)</td><td>Ibidi</td><td>80427</td><td></td></tr><tr><td>אגרוז</td><td>Carl Roth</td><td>3810.4</td><td></td></tr><tr><td>תבנית אלומיניום לתא FEP</td><td></td><td></td><td>התאמה אישית</td></tr><tr><td>סידן כלורי</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C4901</td><td></td></tr><tr><td>אוויר משומר</td><td>Durable</td><td>POWERCLEAN STANDARD 400</td><td></td></tr><tr><td>צלחת תרבית תאים (6 ס"מ)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>150288</td><td></td></tr><tr><td>D-(+)-גלוקוז</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G8769</td><td></td></tr><tr><td>רדיד FEP (עובי 127 מיקרומטר)</td><td>Adtech Polymer Engineering</td><td></td><td></td></tr><tr><td>FluoSpheres מוכפלי קרבוקסילט (0.2 מיקרומטר, אדום כהה)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>F8807</td><td></td></tr><tr><td>ניפוף זכוכית</td><td>Brand</td><td>701904</td><td></td></tr><tr><td>צינורית פסטר זכוכית (150 מ"מ)</td><td>VWR</td><td>612-1701</td><td></td></tr><tr><td>Hydra vulgaris</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>תוכנת הדמיה</td><td>Visitron</td><td>VisiView</td><td>למיקרוסקופיית ספין-דיסק קונפוקלית</td></tr><tr><td>מיקרוסקופ אור מהופך</td><td>Zeiss</td><td>Axio observer 7</td><td>למיקרוסקופיית ספין-דיסק קונפוקלית</td></tr><tr><td>מיקרוסקופ סדין אור</td><td>Leica</td><td>Viventis Deep LS2</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופ סדין אור</td><td>Zeiss</td><td>Lightsheet 7</td><td></td></tr><tr><td>אגרוז נקודת-התכה נמוכה</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>R0801</td><td></td></tr><tr><td>מגנזיום כלורי</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M8266</td><td></td></tr><tr><td>מגנזיום סולפט</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M2643</td><td></td></tr><tr><td>מיקרו-סקלפל</td><td>pfm medical</td><td>200300745</td><td></td></tr><tr><td>בלון פיפטה</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>פיפטור מעבר מוט בוכנה</td><td>Brand</td><td>701932</td><td></td></tr><tr><td>אשלגן כלורי</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P9333</td><td></td></tr><tr><td>מבער בנסן בטיחותי</td><td>INTEGRA Biosciences</td><td>FIREBOY plus</td><td></td></tr><tr><td>מצלמות sCMOS</td><td>Photometrics</td><td>Prime 95B</td><td>למיקרוסקופיית ספין-דיסק קונפוקלית</td></tr><tr><td>נתרן ביקרבונט</td><td>Fluka Analytical, Sigma-Aldrich</td><td>71630</td><td></td></tr><tr><td>נתרן ציטראט די-הידרט</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>W302600</td><td></td></tr><tr><td>נתרן פירובט</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P2256</td><td></td></tr><tr><td>יחידת סריקה קונפוקלית ספין-דיסק (חור 50 מיקרומטר)</td><td>Yokogawa</td><td>CSU-W1</td><td>למיקרוסקופיית ספין-דיסק קונפוקלית</td></tr><tr><td>סטרואוסקופ</td><td>Leica</td><td>M80</td><td></td></tr><tr><td>TES</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T1375</td><td></td></tr><tr><td>מכונת תרמופורמינג</td><td>Yuyao Jintai Machine Factory</td><td>Jintai JT-18</td><td></td></tr><tr><td>כלי תרבית רקמות (10 ס"מ)</td><td>VWR</td><td>734-2321</td><td></td></tr><tr><td>חיץ Tris-HCl</td><td>Roche Diagnostics</td><td>10812846001</td><td></td></tr></tbody></table>

הכנה והדמיה חיה של ספרואידים מתחדשים של הידרה

Preparation and Live Imaging of Regenerating Hydra Spheroids

Hydra is renowned for its exceptional regenerative capacity. Remarkably, small regenerating fragments of Hydra tissue, called Hydra spheroids, can ...

preparation-and-live-imaging-of-regenerating-hydra-spheroids

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

ביולוגיה התפתחותית

סרטון זה מדגים טכניקה לביסוס תרבית תלת ממדית של תאי גלייה. תאי גלייה שמקורם במוח חולדה עטופים בתוך מטריצה פולימרית הניתנת להצלבה המכילה רכיבי מטריצה חוץ-תאיים. עם הדגירה במדיום גדילה, תאי הגליה מתרבים בתוך המטריצה התומכת ליצירת תרבית תלת ממדית.

הקמת תרבית תלת-ממדית של תאי גלייה שמקורם במוח חולדה

הידרה טרנסגנית יציבה מיוצרת על ידי הזרקת מיקרו של DNA פלסמיד לעוברים ואחריה אינטגרציה גנומית אקראית והתפשטות א-מינית כדי ליצור קו אחיד. הידרה טרנסגנית משמשת למעקב אחר תנועות תאים, ביטוי יתר של גנים, חקר תפקוד המקדם או הפלת ביטוי גנים באמצעות RNAi.

דור של הטרנסגניים הידרה על ידי Microinjection העובר

כאן אנו מתארים שיטה להפקת ספרואיד תלת מימדי התרבויות של תאי אפיתל באף אדם. Spheroids הם גירוי ואז לנהוג סיסטיק פיברוזיס Transmembrane מוליכות הרגולטור (CFTR)-יון התלויים, הפרשת נוזלים, לכימות בשינוי הגודל luminal ספרואיד כמדד עבור פונקציה CFTR.

דור של תאי אפיתל באף אדם Spheroids למחקר הרגולטור מוליכות Transmembrane תגובותיהם סיסטיק פיברוזיס

ליגתאי מטריקס ניתן להיות בתבנית על הידרואקרילאמיד הידרו כדי לאפשר את התרבות של תאים גזע האדם העובריים במושבות מוגבלים על מצעים תואמי. שיטה זו יכולה להיות משולבת עם מיקרוסקופ כוח המתיחה ביוכימיה ביוכימית לבחון את הגומלין בין הגיאומטריה רקמה, כוחות שנוצר התא, ואת מפרט הגורל.

הקמת הגיאומטריה של האדם תא גזע עובריים המושבות על מצעים תואמי כדי לשלוט במכניקה ברמת רקמות

פרוטוקול זה מתאר את השימוש במי חמצן מקודד גנטית (H2O2)-biosensor בנוירונים זברה בתרבית וזחלים להערכת תפקידי האיתות הפיזיולוגיים של H2O2 במהלך התפתחות מערכת העצבים. זה יכול להיות מיושם על סוגי תאים שונים ושונה עם טיפולים ניסיוניים לחקור מינים חמצן תגובתי (ROS) בפיתוח כללי.

ROS הדמיית תאים חיים במהלך התפתחות עצבית

המחקר הנוכחי מתאר מתודולוגיות לתרבות, הקפאה, הפשרה, עיבוד, צביעה, תיוג ובחינה של ספרואידים ואורגנואידים שלמים תחת מיקרוסקופים שונים, בעוד שהם נשארים שלמים בהידרוג'ל בתוך מכשיר רב תכליתי.

תרבות, הקפאה, עיבוד והדמיה של אורגנואידים וספרואידים שלמים בעודם בהידרוג'ל

כאן, אנו מציגים פרוטוקול המאפשר ייצור מהיר, חזק וזול של ספרואידים סרטניים ואחריו אנקפסולציה הידרוג'ל. זה ישים באופן נרחב כפי שהוא אינו דורש ציוד מיוחד. זה יהיה שימושי במיוחד לחקר אינטראקציות ספרואידים-מטריצה ובניית פיזיולוגיה של רקמות חוץ גופיות או מודלים פתולוגיים.

ייצור ספרואידי גידול ואנקפסולציה בהידרוג'ל פוליאתילן גליקול לחקר אינטראקציות ספרואידים-מטריצה

אורגנואידים מחוללים מהפכה במידול רקמות מותאם אישית לפיתוח איברים, גילוי תרופות וחקר מחלות. הנדסת אורגנואידים מתקדמת ליצירת רקמות סינתטיות מורכבות. המטרה היא לשלב מורפוגנזה, טכנולוגיית אסמבלואידים וביומטריצות כדי לקדם את הנדסת הרקמות. פרוטוקול זה מסייע במידול אורגנוגנזה בכבד ובקביעת הנחיות לבניית רקמות סינתטיות.

טכניקות גידול במבחנה למידול אורגנוגנזה של כבד, בניית מכלולים ותכנון רקמות סינתטיות באמצעות קווי תאים אנושיים

במאמר זה, אנו מתארים שיטות שונות ליצירת ספרואידים רב-תאיים לביצוע מעקב אחר מיקרוסקופ תאים חיים מרובי פרמטרים. באמצעות מיקרוסקופ הדמיה פלואורסצנטי לכל החיים (FLIM), אוטופלואורסצנטיות תאית, צבעי צביעה וננו-חלקיקים, מודגמת הגישה לניתוח מטבוליזם של תאים, היפוקסיה ומוות תאי בסרטן תלת-ממדי חי (3D) ובספרואידים שמקורם בתאי גזע.

ייצור ומיקרוסקופ הדמיה לכל החיים של תאים חיים מרובי פרמטרים (FLIM) של ספרואידים רב-תאיים

מחקר זה מציג את בדיקת נדידת פצעי השריטה הדו-ממדית (2D) ואת בדיקת הנבטת הספרואידים התלת-ממדית (3D), יחד עם שיטות הניתוח שלהם במורד הזרם, כולל מיצוי RNA ואימונוציטוכימיה, כבדיקות מתאימות לחקר אנגיוגנזה במבחנה.

חקירת אנגיוגנזה ברמה תפקודית ומולקולרית על ידי מינוף בדיקת נדידת פצע השריטה ובדיקת הנבטת הספרואיד

אנו מציגים מודל נדידה תלת-ממדי של גליובלסטומה המשתמש בגליאומספירות מגנטיות שמקורן במטופלים שנוצרו מגידולים שאובחנו לאחרונה וחזרים. פלטפורמה זו מאפשרת המחשה של דינמיקת ההגירה הספציפית של מטופלים והערכת יעילות טיפולית. הבדיקה יכולה להיות מולטיפלקסית לאחר ההגירה כדי להעריך את מיקום החלבונים ודפוסי ביטוי.

בדיקת נדידת גליובלסטומה תלת-ממדית שכפולה עם מיקום ספרואידי מתווך ננו-חלקיקים מגנטיים בתנאים היפוקסיים

למד את פרוטוקול ההכנה והדמיה החיה של ספרואידים מתחדשים של Hydra באמצעות מיקרוסקופיית דיסק מסתובב ולייט-שיט. שיטה זו מאפשרת מעקב אחר תהליכי ההתחדשות והיווצרות האורגניזציה בזמן אמת.

הכנה והדמיה חיה של ספרואידים מתחדשים של הידרה

גלה סרטונים נוספים