Name: לקטילציה ליזין ספציפית לאתר באמצעות התרחבות קוד גנטי ב-E. coli ובתאים יונקים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-02-24T13:25:00.000+00:00
Duration: 5 min 58 s
Description: חקור שילוב ספציפי של לקטיל-ליזין בחלבונים באמצעות הרחבת קוד גנטי ב-E. coli ובתאי יונקים. שיטה זו מאפשרת חקר השפעות המודיפיקציה על תפקוד חלבונים ומטבוליזם.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Zhang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+regulation+of+gene+expression+by+histone+lactylation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Metabolic regulation of gene expression by histone lactylation.</a> Nature. 574 (7779), 575-580 (2019).</li>
<li>Yu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histone+lactylation+drives+oncogenesis+by+facilitating+m6A+reader+protein+YTHDF2+expression+in+ocular+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Genome+Biol%22%5BJournal%5D)">Histone lactylation drives oncogenesis by facilitating m6A reader protein YTHDF2 expression in ocular melanoma.</a> Genome Biol. 22 (1), 85(2021).</li>
<li>Pan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Demethylzeylasteral+targets+lactate+by+inhibiting+histone+lactylation+to+suppress+the+tumorigenicity+of+liver+cancer+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Res%22%5BJournal%5D)">Demethylzeylasteral targets lactate by inhibiting histone lactylation to suppress the tumorigenicity of liver cancer stem cells.</a> Pharmacol Res. 181, 106270(2022).</li>
<li>Xu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Royal+jelly+acid+suppresses+hepatocellular+carcinoma+tumorigenicity+by+inhibiting+H3+histone+lactylation+at+H3K9la+and+H3K14la+sites%5BTitle%5D)+AND+%22Phytomedicine%22%5BJournal%5D)">Royal jelly acid suppresses hepatocellular carcinoma tumorigenicity by inhibiting H3 histone lactylation at H3K9la and H3K14la sites.</a> Phytomedicine. 118, 154940(2023).</li>
<li>Chai, P., Zhao, F., Jia, R., Zhou, X., Fan, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactate%2Flactylation+in+ocular+development+and+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Lactate/lactylation in ocular development and diseases.</a> Trends Mol Med. 31 (12), 1073-1076 (2025).</li>
<li>Wang, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relationship+and+clinical+significance+of+lactylation+modification+in+digestive+system+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell+Int%22%5BJournal%5D)">The relationship and clinical significance of lactylation modification in digestive system tumors.</a> Cancer Cell Int. 24 (1), 246(2024).</li>
<li>Yang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactylome+analysis+suggests+lactylation-dependent+mechanisms+of+metabolic+adaptation+in+hepatocellular+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Metab%22%5BJournal%5D)">Lactylome analysis suggests lactylation-dependent mechanisms of metabolic adaptation in hepatocellular carcinoma.</a> Nat Metab. 5 (1), 61-79 (2023).</li>
<li>Chen, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactate-lactylation+hands+between+metabolic+reprogramming+and+immunosuppression%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Lactate-lactylation hands between metabolic reprogramming and immunosuppression.</a> Int J Mol Sci. 23 (19), 11943(2022).</li>
<li>Sun, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+diapause-like+colorectal+cancer+cells+induced+by+smc4+attenuation+are+characterized+by+low+proliferation+and+chemotherapy+insensitivity%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metab%22%5BJournal%5D)">The diapause-like colorectal cancer cells induced by smc4 attenuation are characterized by low proliferation and chemotherapy insensitivity.</a> Cell Metab. 35 (9), 1563-1579 (2023).</li>
<li>Yang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+positive+feedback+loop+between+inactive+VHL-triggered+histone+lactylation+and+PDGFR%CE%B2+signaling+drives+clear+cell+renal+cell+carcinoma+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Biol+Sci%22%5BJournal%5D)">A positive feedback loop between inactive VHL-triggered histone lactylation and PDGFRβ signaling drives clear cell renal cell carcinoma progression.</a> Int J Biol Sci. 18 (8), 3470-3483 (2022).</li>
<li>Li, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor-derived+lactate+promotes+resistance+to+bevacizumab+treatment+by+facilitating+autophagy+enhancer+protein+Rubcnl+expression+through+histone+H3+lysine+18+lactylation+%28H3K18la%29+in+colorectal+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Autophagy%22%5BJournal%5D)">Tumor-derived lactate promotes resistance to bevacizumab treatment by facilitating autophagy enhancer protein Rubcnl expression through histone H3 lysine 18 lactylation (H3K18la) in colorectal cancer.</a> Autophagy. 20 (1), 114-130 (2024).</li>
<li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactate+modulates+cellular+metabolism+through+histone+lactylation-mediated+gene+expression+in+non-small+cell+lung+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oncol%22%5BJournal%5D)">Lactate modulates cellular metabolism through histone lactylation-mediated gene expression in non-small cell lung cancer.</a> Front Oncol. 11, 647559(2021).</li>
<li>Chen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+regulation+of+homologous+recombination+repair+by+MRE11+lactylation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Metabolic regulation of homologous recombination repair by MRE11 lactylation.</a> Cell. 187 (2), 294-311 (2024).</li>
<li>Li, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glycometabolic+reprogramming-induced+XRCC1+lactylation+confers+therapeutic+resistance+in+ALDH1A3-overexpressing+glioblastoma%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metab%22%5BJournal%5D)">Glycometabolic reprogramming-induced XRCC1 lactylation confers therapeutic resistance in ALDH1A3-overexpressing glioblastoma.</a> Cell Metab. 36 (8), 1696-1710.e10 (2024).</li>
<li>Liberti, M. V., Locasale, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+warburg+effect%3A+How+does+it+benefit+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Biochem+Sci%22%5BJournal%5D)">The warburg effect: How does it benefit cancer cells.</a> Trends Biochem Sci. 41 (3), 211-218 (2016).</li>
<li>Varner, E. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+lactoyl-CoA+%28lactyl-CoA%29+by+liquid+chromatography+mass+spectrometry+in+mammalian+cells+and+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Open+Biol%22%5BJournal%5D)">Quantification of lactoyl-CoA (lactyl-CoA) by liquid chromatography mass spectrometry in mammalian cells and tissues.</a> Open Biol. 10 (9), 200187(2020).</li>
<li>Chen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+regulation+of+homologous+recombination+repair+by+MRE11+lactylation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Metabolic regulation of homologous recombination repair by MRE11 lactylation.</a> Cell. 187 (2), 294-311.e21 (2024).</li>
<li>Chen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NBS1+lactylation+is+required+for+efficient+DNA+repair+and+chemotherapy+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">NBS1 lactylation is required for efficient DNA repair and chemotherapy resistance.</a> Nature. 631 (8021), 663-669 (2024).</li>
<li>Zong, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alanyl-trna+synthetase%2C+AARS1%2C+is+a+lactate+sensor+and+lactyltransferase+that+lactylates+p53+and+contributes+to+tumorigenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Alanyl-trna synthetase, AARS1, is a lactate sensor and lactyltransferase that lactylates p53 and contributes to tumorigenesis.</a> Cell. 187 (10), 2375-2392.e33 (2024).</li>
<li>Ju, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+alanyl-tRNA+synthetase+AARS1+moonlights+as+a+lactyltransferase+to+promote+YAP+signaling+in+gastric+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">The alanyl-tRNA synthetase AARS1 moonlights as a lactyltransferase to promote YAP signaling in gastric cancer.</a> J Clin Invest. 134 (10), e174587(2024).</li>
<li>Sun, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactylation+of+METTl16+promotes+cuproptosis+via+m6A-modification+on+FDX1+mRNA+in+gastric+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Lactylation of METTl16 promotes cuproptosis via m6A-modification on FDX1 mRNA in gastric cancer.</a> Nat Commun. 14 (1), 6523(2023).</li>
<li>Mao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia+induces+mitochondrial+protein+lactylation+to+limit+oxidative+phosphorylation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Res%22%5BJournal%5D)">Hypoxia induces mitochondrial protein lactylation to limit oxidative phosphorylation.</a> Cell Res. 34 (1), 13-30 (2024).</li>
<li>Lv, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitogenic+and+oncogenic+stimulation+of+K433+acetylation+promotes+PKM2+protein+kinase+activity+and+nuclear+localization%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell%22%5BJournal%5D)">Mitogenic and oncogenic stimulation of K433 acetylation promotes PKM2 protein kinase activity and nuclear localization.</a> Mol Cell. 52 (3), 340-352 (2013).</li>
<li>Okada, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lysine+acetylation+regulates+the+interaction+between+proteins+and+membranes%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Lysine acetylation regulates the interaction between proteins and membranes.</a> Nat Commun. 12 (1), 6466(2021).</li>
<li>Wan, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cyclic+immonium+ion+of+lactyllysine+reveals+widespread+lactylation+in+the+human+proteome%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Cyclic immonium ion of lactyllysine reveals widespread lactylation in the human proteome.</a> Nat Methods. 19 (7), 854-864 (2022).</li>
<li>Shao, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+code+expansion+reveals+site-specific+lactylation+in+living+cells+reshapes+protein+functions%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Genetic code expansion reveals site-specific lactylation in living cells reshapes protein functions.</a> Nat Commun. 16 (1), 227(2025).</li>
<li>Sun, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+encoding+of+%CE%B5-N-L-lactyllysine+for+detecting+delactylase+activity+in+living+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Commun+%28Camb%29%22%5BJournal%5D)">Genetic encoding of ε-N-L-lactyllysine for detecting delactylase activity in living cells.</a> Chem Commun (Camb). 58 (61), 8544-8547 (2022).</li>
<li>Ren, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expanding+the+scope+of+genetically+encoded+lysine+post-translational+modifications+with+lactylation%2C+%CE%B2-hydroxybutyrylation+and+lipoylation%5BTitle%5D)+AND+%22Chembiochem%22%5BJournal%5D)">Expanding the scope of genetically encoded lysine post-translational modifications with lactylation, β-hydroxybutyrylation and lipoylation.</a> Chembiochem. 23 (18), e202200302(2022).</li>
<li>Hu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+unnatural+cells+with+a+21st+amino+acid+as+a+living+epigenetic+sensor%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Engineering unnatural cells with a 21st amino acid as a living epigenetic sensor.</a> Nat Commun. 16 (1), 9388(2025).</li>
<li>Elsasser, S. J., Ernst, R. J., Walker, O. S., Chin, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+code+expansion+in+stable+cell+lines+enables+encoded+chromatin+modification%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Genetic code expansion in stable cell lines enables encoded chromatin modification.</a> Nat Methods. 13 (2), 158-164 (2016).</li>
<li>Zhu, W., Fan, C., Hou, Y., Zhang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactylation+in+tumor+microenvironment+and+immunotherapy+resistance%3A+New+mechanisms+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Lett%22%5BJournal%5D)">Lactylation in tumor microenvironment and immunotherapy resistance: New mechanisms and challenges.</a> Cancer Lett. 627, 217835(2025).</li>
<li>Mills, E. M., Barlow, V. L., Jones, A. T., Tsai, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+mammalian+cell+logic+gates+controlled+by+unnatural+amino+acids%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep+Methods%22%5BJournal%5D)">Development of mammalian cell logic gates controlled by unnatural amino acids.</a> Cell Rep Methods. 1 (6), 100073(2021).</li>
<li>Italia, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+encoded+protein+sulfation+in+mammalian+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Chem+Biol%22%5BJournal%5D)">Genetically encoded protein sulfation in mammalian cells.</a> Nat Chem Biol. 16 (4), 379-382 (2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>6*שלו, התג שלו נוגדן מונוקלונלי רקומביננטי</td><td>פרויטנטק</td><td>84814-1-RR</td><td>קבוצה של אימונוגלובולינים ספציפיים המיועדים ל-6&Times; התג שלו (פפטיד קצר המורכב משש שאריות היסטידין רצופות, HHHHHH) בחלבונים רקומביננטיים.</td></tr><tr><td>מערכת ACQUITY UPLC</td><td>מים</td><td></td><td>UltraPerformance Liquid Chromatography</td></tr><tr><td>אנטי-L-לקטיליזין ארנב mAb</td><td>PTM Biolabs</td><td>PTM-1401RM</td><td>קבוצה של אימונוגלובולינים ספציפיים המיועדים ל-L-Lactyl Lysine (Klac), שינוי פוסט-תרגומי (PTM) של חלבונים.</td></tr><tr><td>ערכת שיבוט חד-שלבי ClonExpress II</td><td>ואזימה&nbsp;</td><td>C112</td><td>בהתבסס על טכנולוגיית שיבוט DNA פשוטה, מהירה ויעילה, ניתן לשכפל מקטעי הinsert בכיוון לכל אתר של כל וקטור.</td></tr><tr><td>ציטומטר זרימה CytoFlex</td><td>בקמן קולטר</td><td></td><td>ציטומטר זרימה עם יכולת זיהוי רגישות גבוהה וניתוח רב-צבעוני</td></tr><tr><td>DH10B</td><td>ביוראביט</td><td>EC005H-S</td><td>סוג של תאים מיומנים לטרנספורמציית פלסמידים, שיבוט גנים וסקר כחול-לבן.</td></tr><tr><td>DH5&alpha;</td><td>ואזימה&nbsp;</td><td>C502</td><td>סוג של תאים מיומנים לטרנספורמציית פלסמידים, שיבוט גנים וסקר כחול-לבן.</td></tr><tr><td>מערכת EASY-nano LC 1200</td><td>תרמו פישר סיינטיפיק</td><td></td><td>כרומטוגרפיה ננו-נוזלית להפרדת דגימות מורכבות ברגישות גבוהה ורזולוציה גבוהה</td></tr><tr><td>ספקטרומטר המסה של Orbitrap Eclipse Tribrid</td><td>תרמו פישר סיינטיפיק</td><td></td><td>מערכת דגל מתקדמת לכרומטוגרפיה נוזלית טריברידית-ספקטרומטריית מסה (LC-MS)</td></tr><tr><td>Phanta Max Super-Fidelity DNA פולימראז</td><td>ואזימה&nbsp;</td><td>P505</td><td>אנזים יחיד באיכות גבוהה המשלב הגברה מהירה ונאמנות</td></tr><tr><td>פוליג'ט</td><td>SignaGen</td><td>SL100688</td><td>תגובת טרנפקציה של DNA פוליג'ט במבחנה נוסחה כמגיב טרנספקציה עוצמתי שמבטיח טרנספקציה יעילה וניתנת לשחזור עם פחות ציטוטוקסיות.</td></tr></tbody></table>

לקטילציה ליזין ספציפית לאתר באמצעות התרחבות קוד גנטי ב-e. coli ובתאים יונקים

Site-Specific Lysine Lactylation via Genetic Code Expansion in E. coli and Mammalian Cells

תחילה הערכנו את הספציפיות של Klac לחלבונים ב-E. coli. הגן של אנולאז 1 האנושי (hENO1) תוכנן להכיל קודון ענבר עצור בשארית K89 (hENO1-89TAG), ומבנה זה הובע במשותף עם KlacRS האורתוגונלי וזוג tRNA קוגנאטי שלו ב-E. coli. בהיעדר תוספת של 1 mM Klac, לא זוהה hENO1 באורך מלא; לעומת זאת, כאשר נוספו 1 mM Klac למדיום הגידול, hENO1 באורך מלא המכיל Klac במיקום 89 (hENO1-89Klac) הופק בתפוקה של ~1.2 mg/L (איור 1A). נוכחות hENO1 באורך מלא ושילוב סלקטיבי של Klac אושרו על ידי אימונובל...

לקטילציה ליזין ספציפית לאתר באמצעות התרחבות קוד גנטי ב-E. coli ובתאים יונקים

Lactylation is a recently discovered post-translational modification (PTM) with diverse biological functions. Since its initial identification in 2019 as ...

site-specific-lysine-lactylation-via-genetic-code-expansion-e-coli

Research

JoVE Journal

Biochemistry

ביוכימיה

הפעילות של decarboxylase ועין מתנהלת ליזין מנוטר על ידי מגיבים המצע L-ליזין לבין המוצר קדברין עם חומצה 2,4,6 trinitrobenzensulfonic-לטופס adducts כי יש מסיסות ההפרש ב טולואן.

Assay למדידת פעילות Escherichia coli ועין מתנהלת ליזין Decarboxyase

התיקוף של פעילות אנזימטית מעורבת הביוכימיים ניתן הובהר באמצעות ניתוח השלמה תפקודי (FCA). מתואר בכתב היד הזה הוא assay FCA הוכחת הפעילות האנזימטית של אנזימים מעורבים במטבוליזם של חומצות אמינו, תגובה מחמירה חיידקים וביוסינטזה פפטידוגליקן חיידקים.

השלמת אנליזה פונקציונלית (FCA): תרגיל מעבדה ומומש כדי להשלים את הוראת הביוכימיים

פרוטוקול ביטוי קל לשימוש ונטול תאים לשילוב ספציפי לשאריות של אנלוגים של חומצות אמינו לא קנוניות בחלבונים, כולל ניתוח במורד הזרם, מוצג למחקרים רפואיים, פרמצבטיים, מבניים ופונקציונליים.

שאריות ספציפיות התאגדות של חומצות אמינו Noncanonical לחלבוני דגם שימוש<em&gt; Coli Escherichia</em&gt; חינם-Cell מערכת-תמלול תרגום

ניתוחים הביוכימי ומבניים של חלבונים glycosylated דורשים כמויות גדולות יחסית של דגימות הומוגנית. כאן, אנו מציגים שיטה כימית יעילה עבור גליקוזילציה בייעודי לאתר של חומרים מטוהרים של חיידקים על ידי מיקוד תיולים Cys תגובתי.

מכוונת ציסטאין תיולים במבחנה גליקוזילציה בייעודי לאתר של חומרים

ביולוגיה סינתטית מאפשר ההנדסה של חלבונים עם מאפיינים חסרת תקדים באמצעות החדרת חומצות אמינו קאנונית co-translational. . הנה, הצגנו איך spectrally אדום-העביר גרסה של fluorophore GFP-סוג עם מאפייני ספקטרוסקופיות הרומן פלורסצנטיות, הנקרא חלבון פלואורסצנטי "זהב" (GdFP), מופק ב e. coli באמצעות הלחץ הסלקטיבי ההתאגדות (SPI).

הנדסת קרינה פלואורסצנטית 'הזהב' על-ידי הלחץ הסלקטיבי התאגדות של חומצות אמינו קאנונית, אנליזת חלבונים באמצעות ספקטרומטר מסה, קרינה פלואורסצנטית

הרחבת הקוד הגנטי מהווה כלי רב עוצמה כדי ללמוד מגוון רחב של תהליכים ביולוגיים, כולל חלבון acetylation. כאן אנחנו מדגימים פרוטוקול נתיישב לנצל בטכניקה זו ליצירת homogeneously acetylated חלבונים באתרים ספציפיים בתאים Escherichia coli .

פרוטוקול נתיישב לייצר חלבונים Site-Specifically Acetylated Escherichia Coli

הפרוטוקול מציג את Escherichia coli-המבוסס על הלחץ הסלקטיבי השתלבות של חומצות אמינו קאנונית (ncAAs) nisin פפטיד מיקרוביאלית lactococcal. ניתן לשנות את מאפייניו במהלך רקומביננטי ביטוי באמצעות החלפת עם ncAAs הרצוי בתקשורת צמיחה מוגדרים. השינויים הנובעים מכך באתריים ממופים על ידי הצמיחה עיכוב מבחני פלורסצנטיות מיקרוסקופ.

פפטידים מיקרוביאלית המיוצר על ידי ההתאגדות הלחץ הסלקטיבי של חומצות אמינו קאנונית

מחקר זה מציג אסטרטגיה חלופית לשיטה הקונבנציונלית הרעילה האנטי-אנלוגית בזיהוי מפיקי מיתר של חומצות אמינו באמצעות סמנים נדירים-מאוד עשירים להשגת דיוק, רגישות ותפוקה גבוהה בו זמנית.

זיהוי חומצת אמינו מפיקי יתר באמצעות נדירים-Codon-מסמנים עשירים

כאן אנו מציגים שיטה לבטא חלבוני histone אצטילאט באמצעות הרחבת קוד גנטי להרכיב נוקלאוזומים מחדש במבחנה.

אתר ספציפי ליסין אצטילציה של היסטונים עבור שחזור Nucleosome באמצעות הרחבת קוד גנטי ב Escherichia קולי

פרוטוקול זה מתאר שיטה מהירה ופשוטה לייצור ליסאט חיידקי לביטוי גנים ללא תאים, באמצעות זן מהונדס של Escherichia coli ודורש ציוד מעבדה סטנדרטי בלבד.

ייצור מהיר, זול ולא מסובך של ליסאט נטול תאים חיידקי

מאמר זה מספק פרוטוקול פשוט וברור לסימון אפקטורים המופרשים בסלמונלה באמצעות אתר הרחבת קוד גנטי (GCE) ספציפי ותמונה של לוקליזציה תת-תאית של חלבונים המופרשים בתאי HeLa באמצעות מיקרוסקופ שחזור אופטי סטוכסטי ישיר (dSTORM)...

הדמיה ברזולוציית על של חלבונים המופרשים על ידי חיידקים באמצעות הרחבת קוד גנטי

חקור שילוב ספציפי של לקטיל-ליזין בחלבונים באמצעות הרחבת קוד גנטי ב-E. coli ובתאי יונקים. שיטה זו מאפשרת חקר השפעות המודיפיקציה על תפקוד חלבונים ומטבוליזם.

לקטילציה ליזין ספציפית לאתר באמצעות התרחבות קוד גנטי ב-E. coli ובתאים יונקים

גלה סרטונים נוספים