Name: המחשת הפעלת הגנום הזיגוטי בתאים בודדים של עוברים מוקדמים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-04-03T13:10:00.000+00:00
Duration: 7 min 30 s
Description: למד הדמיה ישירה של הפעלת הגנום הזיגוטי ברזולוציית תא בודד בעוברי Xenopus laevis באמצעות תיוג 5-EU וכימיה קליקית. פרוטוקול זה מאפשר מעקב אחר דינמיקת השעתוק בתקופת המעבר ממטופל לזיגוטי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Kojima, M. L., Hoppe, C., Giraldez, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+maternal-to-zygotic+transition%3A+Reprogramming+of+the+cytoplasm+and+nucleus%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Genet%22%5BJournal%5D)">The maternal-to-zygotic transition: Reprogramming of the cytoplasm and nucleus.</a> Nat Rev Genet. 26 (4), 245-267 (2025).</li>
<li>Vastenhouw, N. L., Cao, W. X., Lipshitz, H. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+maternal-to-zygotic+transition+revisited%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">The maternal-to-zygotic transition revisited.</a> Development. 146 (11), dev161471(2019).</li>
<li>Jukam, D., Shariati, S. A. M., Skotheim, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zygotic+genome+activation+in+vertebrates%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">Zygotic genome activation in vertebrates.</a> Dev Cell. 42 (4), 316-332 (2017).</li>
<li>Palfy, M., Joseph, S. R., Vastenhouw, N. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+timing+of+zygotic+genome+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Genet+Dev%22%5BJournal%5D)">The timing of zygotic genome activation.</a> Curr Opin Genet Dev. 43, 53-60 (2017).</li>
<li>Chen, H., Einstein, L. C., Little, S. C., Good, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatiotemporal+patterning+of+zygotic+genome+activation+in+a+model+vertebrate+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">Spatiotemporal patterning of zygotic genome activation in a model vertebrate embryo.</a> Dev Cell. 49 (6), 852-866.e7 (2019).</li>
<li>Chen, H., Good, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nascent+transcriptome+reveals+orchestration+of+zygotic+genome+activation+in+early+embryogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Nascent transcriptome reveals orchestration of zygotic genome activation in early embryogenesis.</a> Curr Biol. 32 (19), 4314-4324.e7 (2022).</li>
<li>Chen, H., Good, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+nascent+transcription+in+whole-mount+vertebrate+embryos+to+characterize+zygotic+genome+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Enzymol%22%5BJournal%5D)">Imaging nascent transcription in whole-mount vertebrate embryos to characterize zygotic genome activation.</a> Methods Enzymol. 638, 139-165 (2020).</li>
<li>Jao, C. Y., Salic, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploring+RNA+transcription+and+turnover+in+vivo+by+using+click+chemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Exploring RNA transcription and turnover in vivo by using click chemistry.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 105 (41), 15779-15784 (2008).</li>
<li>Chan, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brd4+and+P300+confer+transcriptional+competency+during+zygotic+genome+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">Brd4 and P300 confer transcriptional competency during zygotic genome activation.</a> Dev Cell. 49 (6), 867-881.e8 (2019).</li>
<li>Adar-Levor, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytokinetic+abscission+is+part+of+the+midblastula+transition+in+early+zebrafish+embryogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Cytokinetic abscission is part of the midblastula transition in early zebrafish embryogenesis.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 118 (15), e2021210118(2021).</li>
<li>Chen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantifying+nascent+transcription+in+early+embryogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Quantifying nascent transcription in early embryogenesis.</a> Methods Mol Biol. 2923, 143-162 (2025).</li>
<li>Harland, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+situ+hybridization%3A+An+improved+whole-mount+method+for+Xenopus+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">In situ hybridization: An improved whole-mount method for Xenopus embryos.</a> Methods Cell Biol. 36, 685-695 (1991).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>16% פאראפורמלדהיד (PFA)</td><td>EMS</td><td>15710-S</td><td>ליצירת הפתרון הקיבעוני</td></tr><tr><td>20&00; SSC</td><td>מדיאטק</td><td>MT46-020-CM</td><td>להכנת תמיסת ההלבנה</td></tr><tr><td>מיקסר נואטינג תלת-ממדי</td><td>VWR</td><td>76595-802</td><td>לעוברים מטורפים</td></tr><tr><td>בקבוקוני ברג בקוטר 9 מ"מ (2 מ"ל)</td><td>VWR</td><td>46610-722</td><td>לעיבוד עוברים</td></tr><tr><td>נוגדן H3 אנטי-היסטון</td><td>אבקאם</td><td>ab1791</td><td>לצביעת חיסון</td></tr><tr><td>חומצה אסקורבית</td><td>סיגמא-אלדריץ'</td><td>A7506</td><td>על יצירת תגובת הקליק</td></tr><tr><td>אלכוהול בנזיל</td><td>סיגמא-אלדריץ'</td><td>305197</td><td>לניקוי עוברים</td></tr><tr><td>בנזיל בנזואט</td><td>אקרוס אורגניקס</td><td>105860010</td><td>לניקוי עוברים</td></tr><tr><td>אלבומין סרום בקר (BSA)</td><td>סיגמא-אלדריץ'</td><td>A3059</td><td>ליצירת פתרון החסימה</td></tr><tr><td>קבלים לבקבוקי בורג 9 מ"מ (2 מ"ל)</td><td>VWR</td><td>46610-712</td><td>לעיבוד עוברים</td></tr><tr><td>זכוכית כיסוי (24 מ"מ ופ; 40 מ"מ)</td><td>VWR</td><td>48393-060</td><td>ליצירת תא הדמיה</td></tr><tr><td>CuSO4</td><td>סיגמא-אלדריץ'</td><td>61230</td><td>על יצירת תגובת הקליק</td></tr><tr><td>אתילנביס (אוקסיתילניטרילו) חומצה טטראצטית (EGTA)</td><td>תרמו פישר סיינטיפיק</td><td>AC409915000</td><td>ליצירת הפתרון הקיבעוני</td></tr><tr><td>Fiji ImageJ</td><td>NIH</td><td></td><td>לעיבוד תמונות</td></tr><tr><td>פורמיד</td><td>תרמו פישר סיינטיפיק</td><td>AC181090010</td><td>להכנת תמיסת ההלבנה</td></tr><tr><td>פיפטות זכוכית פסטר</td><td>VWR</td><td>14673-010</td><td>להעברת BABB</td></tr><tr><td>נוגדן משני נגד עזים אלכס פלואר 488</td><td>תרמו פישר סיינטיפיק</td><td>A27034</td><td>לצביעת חיסון</td></tr><tr><td>סרום עזים</td><td>אבקאם</td><td>ab7481</td><td>ליצירת פתרון החסימה</td></tr><tr><td>מי חמצן</td><td>סיגמא-אלדריץ'</td><td>H1009</td><td>להכנת תמיסת ההלבנה</td></tr><tr><td>מגנזיום סולפט (MgSO4)</td><td>תרמו פישר סיינטיפיק</td><td>M65-500</td><td>ליצירת הפתרון הקיבעוני</td></tr><tr><td>מתנול</td><td>תרמו פישר סיינטיפיק</td><td>A4524</td><td>לייבוש עוברים</td></tr><tr><td>מתנול, חסר מים</td><td>סיגמא-אלדריץ'</td><td>322415</td><td>לייבוש עוברים</td></tr><tr><td>MOPS</td><td>תרמו פישר סיינטיפיק</td><td>AC172631000</td><td>ליצירת הפתרון הקיבעוני</td></tr><tr><td>מערבל נואטינג רב-מצבי</td><td>VWR</td><td>76595-812</td><td>לעוברים מטורפים</td></tr><tr><td>פיפטת העברה מפלסטיק</td><td>תרמו פישר סיינטיפיק</td><td>13-711-9AM</td><td>להעברת עוברים</td></tr><tr><td>להב סכין גילוח</td><td>תרמו פישר סיינטיפיק</td><td>18-100-970</td><td>לחיתוך סרטים</td></tr><tr><td>מים ללא RNase</td><td>תרמו פישר סיינטיפיק</td><td>BP561-1</td><td>ליצירת פתרונות ללא RNASE</td></tr><tr><td>Roto-Mini PLUS (רוטטור)</td><td>VWR</td><td>470313-912</td><td>להעברת עוברים</td></tr><tr><td>טטרמתילרודאמין (TAMRA)-אזיד</td><td>אבקאם</td><td>AB146486</td><td>על יצירת תגובת הקליק</td></tr><tr><td>TO-PRO-3</td><td>תרמו פישר סיינטיפיק</td><td>T3605</td><td>לצביעת DNA</td></tr><tr><td>טריטון X-100</td><td>סיגמא-אלדריץ'</td><td>10789704001</td><td>להכנת בופר הכביסה</td></tr><tr><td>בסיס טריזמה (בסיס טריס)</td><td>סיגמא-אלדריץ'</td><td>T1503</td><td>ליצירת בופר טריס</td></tr><tr><td>קלטות VHB 3M GPH-110GF (45 מ"ל)</td><td>VWR</td><td>76524-608</td><td>ליצירת תא הדמיה</td></tr><tr><td>מיקרוסקופ קונפוקלי Zeiss LSM 700</td><td>צייס</td><td></td><td>להדמיה קונפוקלית</td></tr></tbody></table>

המחשת הפעלת הגנום הזיגוטי בתאים בודדים של עוברים מוקדמים

Visualizing Zygotic Genome Activation In Single Cells of Early Embryos

Early embryogenesis requires the maternal-to-zygotic transition (MZT) that necessitates the zygotic genome activation (ZGA). During ZGA, hundreds to ...

visualizing-zygotic-genome-activation-in-single-cells-of-early-embryos

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

ביולוגיה התפתחותית

בסרטון הזה, אנחנו מראים שיטה שבאמצעותה לנתח את המוח חוליות עוברי דג הזברה מתפתח לחיות ברזולוציה של תא בודד על ידי מיקרוסקופיה confocal. זה כולל את השיטה שבאמצעותה אנו מזריקים את העובר מתא בודד דג הזברה ולאחר מכן הר התמונה במוח המתפתח.

חיים הדמיה של המוח על ידי עוברי דג הזברה מיקרוסקופיה confocal

פרוטוקול זה מתאר הדמיה של נוירונים בודדים או תאים הרכס העצבי החיים עוברים דג הזברה. שיטה זו משמשת כדי לבחון התנהגויות הסלולר לוקליזציה אקטין פלואורסצנטי באמצעות מיקרוסקופיה confocal זמן לשגות.

הדמיה חיה של תנועתיות התא ואת cytoskeleton אקטין של נוירונים בודדים לבין תאים קרסט עצבית בעוברים דג הזברה

הסרטון הנוכחי מדגים שיטה אשר מנצל שילוב של electroporation ו מיקרוסקופיה confocal לבצע הדמיה לחיות על הפרט ובתאים עצבית forebrain דג הזברה מתפתח.

זמן לשגות הדמיה חיה של Related Clonally ובתאים עצבית של פיתוח דג הזברה forebrain

מאמר זה מתאר טכניקה להדמיה של האירועים הראשונים של העובר בתוך...

זמן לשגות מיקרוסקופית של העובר בשלב מוקדם Caenorhabditis elegans

מעקב חיה של אבות רשתית WT בודדים רקע גנטי מובהק מאפשר הערכה של תרומת איתות שאינו אוטונומי התא במהלך הנוירוגנזה. כאן, שילוב של מציאת גן, דור הכימרה באמצעות השתלה העובר בתחום הדמית confocal זמן לשגות vivo נוצל למטרה זו.

In vivo הדמיה של ביטוי מהונדס ג&#39;ין הפרט רשתית אבות ב Chimeric דג הזברה עוברים לחקר השפעות Cell Nonautonomous

כתב יד זה מתאר במבחנה ביצית טיפוח שיטה המאפשרת הדמיה לחיות תאים של תודרנית מופרות, העוברים. בשיטה זו הוא מנוצל כדי להמחיש את הדינמיקה תאיים במהלך זיגוטה קיטוב מפרט הגורל תא בפיתוח עוברי.

במבחנה ביצית טיפוח עבור Live-תא הדמיה של הזיגוטה קיטוב והמתבנת העובר ב תודרנית לבנה

שילוב של טכניקות אופטי מתקדם של סריקת מיקרוסקופ עם זמן עירור קרינה פלואורסצנטית פוטון מרובה אורך גל לייזר בוצע כדי ללכוד דימות ברזולוציה גבוהה, תלת מימדי, בזמן אמת של הרכס העצבי הגירה ב Tg (sox10:EGFP) ו- Tg (foxd3:GFP) דג זברה עוברי.

פוטון רב זמן לשגות הדמיה כדי להמחיש את התפתחות בזמן אמת: ויזואליזציה של העברת תאי הרכס העצבי עוברי דג זברה

עבודה זו מתארת פרוטוקול של תפוקה חצי-גבוהה המאפשרת הדמיה בו של embryogenesis בזמן בו במהירות של 80-100 ס מ עוברים בריצה אחת ללילה. בנוסף, כלי עיבוד תמונה ופריטים חזותיים נכללים כדי לייעל את ניתוח הנתונים. השילוב של שיטות אלה עם זני כתבת מותאמים אישית מאפשר ניטור מפורט של embryogenesis.

שיטת דימות למחצה של תפוקה גבוהה וערכת כלי הדמיה של נתונים כדי לנתח את הפיתוח העובריים של ס. אלאנס

מתוארת אסטרטגיית הכנת דגימה להדמיית עוברים מוקדמים של דגי זברה בתוך כוריון שלם באמצעות מיקרוסקופ יריעות אור. הוא מנתח את הכיוונים השונים שהעוברים רוכשים בתוך הכוריון בשלבי 70% אפיבולי וניצן ומפרט אסטרטגיות הדמיה להשגת רזולוציה בקנה מידה תאי בכל העובר באמצעות מערכת יריעות האור.

אסטרטגיות הדמיה והרכבה של מיקרוסקופ גיליון אור עבור עוברים מוקדמים של דגי זברה

מאמר זה קובע צינור להשעיה איכותית של תאים בודדים וגרעינים של עוברי עכברים גסטרולטיביים לצורך ריצוף של תאים בודדים וגרעינים.

ריצוף RNA חד-תאי של עוברי עכברים שלמים מוטנטיים: מהאפיבלסט ועד סוף הגסטרולציה

אנו מספקים שיטות מפורטות לתיוג מטבולי ולטיהור תמלילים מתחילים לניתוח טרנסקריפטום בעוברים מוקדמים של Xenopus באמצעות 5-אתיניל-אורידין (5-EU).

תיוג מטבולי של הטרנסקריפטום המתהווה בעובריות מוקדמת של Xenopus

למד הדמיה ישירה של הפעלת הגנום הזיגוטי ברזולוציית תא בודד בעוברי Xenopus laevis באמצעות תיוג 5-EU וכימיה קליקית. פרוטוקול זה מאפשר מעקב אחר דינמיקת השעתוק בתקופת המעבר ממטופל לזיגוטי.

המחשת הפעלת הגנום הזיגוטי בתאים בודדים של עוברים מוקדמים

גלה סרטונים נוספים