Name: בידוד תאים בודדים מעוברים מוקדמים של Xenopus ומיונם לפי גודל (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-03-20T14:05:00.000+00:00
Duration: 4 min 33 s
Description: למדו לבודד ולמיין תאים בודדים מעוברים מוקדמים של Xenopus laevis לפי גודל התא. שיטה זו מאפשרת הפרדה פיזית מדויקת של בלסטומרים לקבוצות גודל שונות לניתוח מחזור תאים וריצוף תא בודד.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Ginzberg, M. B., Kafri, R., Kirschner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+biology.+On+being+the+right+%28cell%29+size%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Cell biology. On being the right (cell) size.</a> Science. 348 (6236), 1245075(2015).</li>
<li>Xie, S., Swaffer, M., Skotheim, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eukaryotic+cell+size+control+and+its+relation+to+biosynthesis+and+senescence%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Eukaryotic cell size control and its relation to biosynthesis and senescence.</a> Annu Rev Cell Dev Biol. 38, 291-319 (2022).</li>
<li>Chadha, Y., Khurana, A., Schmoller, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eukaryotic+cell+size+regulation+and+its+implications+for+cellular+function+and+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Eukaryotic cell size regulation and its implications for cellular function and dysfunction.</a> Physiol Rev. 104 (4), 1679-1717 (2024).</li>
<li>Chen, H., Einstein, L. C., Little, S. C., Good, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatiotemporal+patterning+of+zygotic+genome+activation+in+a+model+vertebrate+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">Spatiotemporal patterning of zygotic genome activation in a model vertebrate embryo.</a> Dev Cell. 49 (6), 852-866.e7 (2019).</li>
<li>Hubatsch, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+cell+size+threshold+limits+cell+polarity+and+asymmetric+division+potential%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Phys%22%5BJournal%5D)">A cell size threshold limits cell polarity and asymmetric division potential.</a> Nat Phys. 15 (10), 1075-1085 (2019).</li>
<li>Fung, H. F., Bergmann, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Function+follows+form%3A+How+cell+size+is+harnessed+for+developmental+decisions%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Function follows form: How cell size is harnessed for developmental decisions.</a> Eur J Cell Biol. 102 (2), 151312(2023).</li>
<li>Chen, H., Qian, W., Good, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrating+cellular+dimensions+with+cell+differentiation+during+early+development%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Integrating cellular dimensions with cell differentiation during early development.</a> Curr Opin Cell Biol. 67, 109-117 (2020).</li>
<li>Clute, P., Masui, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+the+appearance+of+division+asynchrony+and+microtubule-dependent+chromosome+cycles+in+Xenopus+laevis+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Regulation of the appearance of division asynchrony and microtubule-dependent chromosome cycles in Xenopus laevis embryos.</a> Dev Biol. 171 (2), 273-285 (1995).</li>
<li>Venkataraman, T., Dancausse, E., King, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PCR-based+cloning+and+differential+screening+of+RNAs+from+Xenopus+primordial+germ+cells%3A+Cloning+uniquely+expressed+RNAs+from+rare+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">PCR-based cloning and differential screening of RNAs from Xenopus primordial germ cells: Cloning uniquely expressed RNAs from rare cells.</a> Methods Mol Biol. 254, 67-78 (2004).</li>
<li>Sive, H. L., Grainger, R. M., Harland, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Xenopus+laevis+in+vitro+fertilization+and+natural+mating+methods%5BTitle%5D)+AND+%22CSH+Protoc%22%5BJournal%5D)">Xenopus laevis in vitro fertilization and natural mating methods.</a> CSH Protoc. 2007, (2007).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>16% פאראפורמלדהיד (PFA)</td><td>EMS</td><td>15710-S</td><td>ליצירת הפתרון הקיבעוני</td></tr><tr><td>צלחות פטרי חד-פעמיות בקוטר 60 מ"מ</td><td>VWR</td><td>25384-092</td><td>לדגירה של עוברים</td></tr><tr><td>מיקרוסקופים סטריאוסקופים זום ACCU-SCOPE 3075</td><td>VWR</td><td>470351-130</td><td>להמחשת עוברים</td></tr><tr><td>אגרוז</td><td>סיגמא-אלדריץ'</td><td>A-9414</td><td>לציפוי צלחות פטרי</td></tr><tr><td>מסננת תאים, 100 ומיקרו; m</td><td>VWR</td><td>76327-102</td><td>למיון תאים לפי גודל</td></tr><tr><td>מסננת תאים, 40 ומיקרו; m</td><td>VWR</td><td>76327-098</td><td>למיון תאים לפי גודל</td></tr><tr><td>מסננת תאים, 70 ומיקרו; m</td><td>VWR</td><td>76327-100</td><td>למיון תאים לפי גודל</td></tr><tr><td>פיפטות העברה חד-פעמיות</td><td>VWR</td><td>414004-035</td><td>להעברת עוברים</td></tr><tr><td>פינצטה דומונט, סגנון 5</td><td>מדעי מיקרוסקופיית אלקטרונים</td><td>72701-D</td><td>להסרת ממברנת ויטלין</td></tr><tr><td>צלחת פטרי מזכוכית, 60 פעמים; 15 מ"מ</td><td>VWR</td><td>75845-542</td><td>לדגירה של עוברים</td></tr></tbody></table>

בידוד תאים בודדים מעוברים מוקדמים של xenopus ומיונם לפי גודל

Isolating Single Cells from Xenopus Early Embryos and Sorting Them by Size

בידוד תאים בודדים מעוברים מוקדמים של Xenopus ומיונם לפי גודל

Early embryogenesis requires an exponential decrease in cell size, while the embryo remains constant in size at the earliest stages of development. The ...

isolating-single-cells-from-xenopus-early-embryos-sorting-them

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

ביולוגיה התפתחותית

אנו מדווחים שיטה יעילה ופשוטה לבודד את העוברים בשלבים מוקדמים של פיתוח...

בידוד יעיל ומהיר של עוברים משלבים מוקדמים<em&gt; Thaliana ארבידופסיס</em&gt; זרעים

אנו מדווחים על מכשיר שיטה חדשה ללמוד תאי עוברים. תאים בודדים מסודרים דווקא מערכי microcavity. כליאת 3D שלהם היא צעד לקראת סביבות 3D נתקלו בתנאים פיסיולוגיים מאפשרת התמצאות אברון. על ידי שליטת צורת תא, התקנה זו ממזערת השתנות שדווחה מבחני תקן.

הזמנת תאים בודדים עוברים יחיד מאסר 3D: התקן חדש עבור הקרנת תוכן גבוהה

פרוטוקול זה מתאר שיטה לבידוד תאים בודדים מעוברי דג הזברה, העשרה לתאים מעניינים, לכידת תאי דג זברה במערכות מולטיפלקס תאים בודדים מבוססות מיקרופלואידית, והערכת ביטוי גנים מתאים בודדים.

בידוד ואפיון של תאים בודדים מעוברים דג הזברה

גזע אבות היווצרות הדם תאים (HSPC) נובעים מתאי אנדותל מיוחדים (hemogenic) במהלך הפיתוח, עדיין מעט מאוד ידוע על התהליך שבו כמה תאי אנדותל לציין להפוך להרכיב דם. אנו מדגימים שיטה המבוססת זרימת cytometry המאפשרת בידוד סימולטני של תאי hemogenic האנדותל HSPC מרקמות עובריות בעכברים.

בידוד של Murine העוברי Hemogenic לתאי אנדותל

מנגנונים של קנה מידה תאי ותוך-תאי נותרו חמקמקים. השימוש בתמציות עוברי קסנופוס הפך נפוץ יותר ויותר כדי להבהיר מנגנונים של ויסות גודל האברונים. שיטה זו מתארת הכנת תמצית עובר ובדיקת קנה מידה גרעינית חדשה שבאמצעותה ניתן לזהות מנגנונים של ויסות גודל גרעיני.

Assay חינם-נייד באמצעות<em&gt; Laevis Xenopus</em&gt; עוברי מחלץ לחקור מנגנונים של תקנת גודל גרעינית

אנו מתארים צעדים המאפשרים דיגום מהיר בתוך באתרו של חלק קטן של תא יחיד עם דיוק גבוהה, הפלישה מינימלי באמצעות נימי מיקרו-דגימה, כדי להקל על אפיון כימי של תמונת מצב של פעילות מטבולית חיים העוברים באמצעות אלקטרופורזה נימי תא בודד לפי הזמנה ספקטרומטר מסה פלטפורמה.

Microprobe נימי אלקטרופורזה ספקטרומטריית עבור מטבולומיקס תא בודד ב- Live צפרדע (צפרדע רפואית זריזה) העוברים

אנו מתארים טכניקה לפרופיל microRNAs בעוברי עכבר מוקדם. פרוטוקול זה מתגבר על האתגר של קלט תאים נמוך והעשרת RNA קטנה. תוואי זה יכול לשמש כדי לנתח שינויים בביטוי miRNA לאורך זמן בנסיגות תאים שונים של עובר העכבר המוקדם.

הכנת ספריות RNA קטנות לצורך רצף של עוברי עכבר מוקדם

אנו מתארים פרוטוקול פשוט לפתח אורגנואידים אפיתל mucociliary מתאי ectoderm עמוקים מבודדים מעוברי Xenopus laevis. האבות הרב-פוטנטיים מחדשים את מבשרי תא גביע האפיתל ומאפשרים מעקב חי אחר החניכה וההתקדמות של מעברי התא על פני השטח של אורגנואידים.

אורגנואידים אפיתל Mucociliary מתאי עובר קסנופוס: דור, תרבות והדמיה חיה ברזולוציה גבוהה

כאן אנו מתארים אפיון פרוטאומי מבוסס ספקטרומטריית מסות של שושלות תאים עם גורלות רקמות ידועים בעובר בעל חוליות Xenopus laevis .

ספקטרומטריית מסה מונחית שושלת תאים פרוטאומיקה בעובר המתפתח (צפרדע)

מאמר זה קובע צינור להשעיה איכותית של תאים בודדים וגרעינים של עוברי עכברים גסטרולטיביים לצורך ריצוף של תאים בודדים וגרעינים.

ריצוף RNA חד-תאי של עוברי עכברים שלמים מוטנטיים: מהאפיבלסט ועד סוף הגסטרולציה

אנו מתארים שיטת היצרה פיזית ליצירת עוברים מיניאטוריים מעוברים חד-תאיים של Xenopus laevis .

מניפולציה פיזית ליצירת עוברים מיניאטוריים של Xenopus

למדו לבודד ולמיין תאים בודדים מעוברים מוקדמים של Xenopus laevis לפי גודל התא. שיטה זו מאפשרת הפרדה פיזית מדויקת של בלסטומרים לקבוצות גודל שונות לניתוח מחזור תאים וריצוף תא בודד.

בידוד תאים בודדים מעוברים מוקדמים של Xenopus ומיונם לפי גודל

גלה סרטונים נוספים