ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>0.45 מיקרון פילטר</td><td>Sigma</td><td>S2HVU02RE</td><td></td></tr><tr><td>12k או 92k אוליגו צ'יפ</td><td>Customarray Inc. (Genscript)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>צלחות תרבית תאים 15 ס"מ</td><td>Corning</td><td>CLS353004</td><td></td></tr><tr><td>293FT</td><td>Invitrogen</td><td>R70007</td><td></td></tr><tr><td>293NT</td><td>Systems Biosciences</td><td>LV900A-1</td><td></td></tr><tr><td>אלקלין פוספטאז</td><td>NEB</td><td>M0290L</td><td></td></tr><tr><td>אמפיצילין</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP1760-25</td><td></td></tr><tr><td>ATP</td><td>NEB</td><td>9804S</td><td></td></tr><tr><td>ATP</td><td>NEB</td><td>P0756S</td><td></td></tr><tr><td>חיץ Cutsmart</td><td>NEB</td><td>B6004S</td><td></td></tr><tr><td>רצף עמוק (Next-Seq או Hi-Seq)</td><td>Illumina</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ערכת חילוץ DNA מדם ורקמות DNAesy</td><td>Qiagen</td><td>69506</td><td></td></tr><tr><td>מדיום Eagle שונה של Dulbecco&rsquo;</td><td>Wisent</td><td>319-015-CL</td><td></td></tr><tr><td>תאי Endura אלקטרוקומפטנטים</td><td>Lucigen</td><td>60242-1</td><td></td></tr><tr><td>ערכת מדיום EpiCult-B עכבר</td><td>Stemcell Technologies</td><td>05610</td><td></td></tr><tr><td>Esp3I</td><td>NEB</td><td>R0734L</td><td></td></tr><tr><td>סרום בקר עוברי</td><td>Wisent</td><td>090-150</td><td></td></tr><tr><td>ערכת ניקוי DNA ג'ל</td><td>Zymo Research</td><td>D4008</td><td></td></tr><tr><td>מכלי אלקטרופורציה Gene Pulser/MicroPulser</td><td>BioRad</td><td>1652089</td><td></td></tr><tr><td>Gentle Collagenase/Hyaluronidase</td><td>Stemcell Technologies</td><td>7919</td><td></td></tr><tr><td>H11-Cas9</td><td>Jackson Labratories</td><td>JAX#028239</td><td></td></tr><tr><td>צנטריפוגה במהירות גבוהה</td><td>Beckman Coulter</td><td>MLS-50</td><td></td></tr><tr><td>Kim-wipe</td><td>Kimberly-Clark</td><td>34155</td><td></td></tr><tr><td>LB Agar</td><td>Wisent Technologies</td><td>800-011-LG</td><td></td></tr><tr><td>משיכה למיקרופיפטה</td><td>Sutter Instrument</td><td>P97</td><td></td></tr><tr><td>ערכת פלסמיד Mini-prep</td><td>Frogga Bio</td><td>PDH300</td><td></td></tr><tr><td>NEBuffer 3.1 (חיץ עבור BsmBI)</td><td>NEB</td><td>R0580L</td><td></td></tr><tr><td>ניקוי אוליגו ועיבוי</td><td>Zymo Research</td><td>D4061</td><td></td></tr><tr><td>ערכת ניקוי אוליגו</td><td>Zymo research</td><td>D4060</td><td></td></tr><tr><td>פריימר רצף illumina מטוהר ב-PAGE</td><td>IDT DNA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מיקרופיפטות PCR</td><td>Drummond</td><td>5-000-1001-X10</td><td></td></tr><tr><td>PEI (פוליאתילנאימין)</td><td>Sigma</td><td>408727-100ML</td><td></td></tr><tr><td>פניצילין וסטרפטומיצין</td><td>Wisent</td><td>450-201-EL</td><td></td></tr><tr><td>pLKO-Cre</td><td>Addgene</td><td>158032</td><td></td></tr><tr><td>pMD2.G</td><td>Addgene</td><td>12259</td><td></td></tr><tr><td>Poly-L-Lysine</td><td>Sigma</td><td>P2636-100MG</td><td></td></tr><tr><td>psPAX2</td><td>Addgene</td><td>12260</td><td></td></tr><tr><td>pXPR502-PPH-Cre</td><td>Addgene</td><td>256776</td><td></td></tr><tr><td>תערובת Q5 פולימראז 2x Master</td><td>NEB</td><td>M0494L</td><td></td></tr><tr><td>כימות פלואורומטרי Qubit</td><td>Invitrogen</td><td>Q33327</td><td></td></tr><tr><td>R26-LSL-Cas9-EGFP</td><td>Jackson Labratories</td><td>JAX#024857</td><td></td></tr><tr><td>עכברים R26-LSL-TdTomato</td><td>Jackson Labratories</td><td>JAX#007909</td><td></td></tr><tr><td>SapI</td><td>NEB</td><td>R0569L</td><td></td></tr><tr><td>ליגאז DNA T4</td><td>NEB</td><td>M0202L</td><td></td></tr><tr><td>צינורות צנטריפוגה אולטרה</td><td>Beckman Coulter</td><td>344058</td><td></td></tr><tr><td>יחידות מסנן ואקום</td><td>Fisher Scientific</td><td>SCHVU02RE</td><td></td></tr></tbody></table>

סקר מקביל ב-vivo של השמדת גנים והפעלה בבלוטת השד של העכברים

Parallel In Vivo Screening of Gene Knockout and Activation in the Mouse Mammary Gland

Forward genetics screens are routinely employed to perturb thousands of genetic elements in a pooled fashion with the goal of producing large-scale ...

parallel-vivo-screening-gene-knockout-activation-mouse-mammary

Research

JoVE Journal

Genetics

גנטיקה

שיטה זו מתארת ​​כיצד לנתח ולהעריך התפתחות תפקוד בלוטת החלב ומן העכברים. בלוטות החלב נכרת מוערכים לתואר הפיתוח באמצעות הר שלם תוך פליטה החלב מוערך באמצעות אוקסיטוצין מבוססי assay myoepithelial התכווצות התא.

הערכת התפתחות בלוטת החלב פונקציה ועל מודלים עכבר

הדמית זמן לשגות משמשת כדי להעריך את ההתנהגות של תאים ראשוניים preneoplastic חלב האפיתל הנגזרים ממודלי עכבר מהונדס גנטי של סיכון לסרטן שד על מנת לקבוע אם יש קשר בין פרמטרים התנהגותיים ספציפיים ונגעים גנטיים מובחנים.

הדמית זמן לשגות של תאי אפיתל חלב Preneoplastic ראשוניים הנגזרת ממודלי עכבר מהונדס גנטי של סרטן השד

פרוטוקול למשלוח intraductal לא פולשנית של חומרים כימיים מימיים לבלוטת החלב בעכבר מתואר. השיטה מנצלת הזרקה מקומית לפטמות של בלוטות החלב מיקוד צינוריות החלב באופן ספציפי. טכניקה זו ניתנת להתאמה למגוון רחב של תרכובות כולל siRNA, תרופות כימותרפיות ומולקולות קטנות.

הזרקת intraductal עבור משלוח סמים מקומיים לעכבר החלב בלוטת

הפעלה של מוטציות סמויות עם adenovirus-Cre לתוצאות מערכת ductal החלב בסרטן שד גרורתי רלוונטי מבחינה קלינית. התאגדות של אמרגן YFP מאפשרת מעקב של תאים סרטניים גרורתי דיסטלי. מודל זה שימושי ללמוד גרורות סמויות, חסינות אנטי סרטניים, ולעיצוב immunotherapies החדשני לטיפול בסרטן השד.

חניכה של סרטן השד גרורתי על ידי מיקוד של האפיתל ductal עם Adenovirus-Cre: דגם רומן מהונדס עכבר של סרטן השד

הסרטן הוא מחלה מורכבת שמושפעת מהרקמות המקיפות את הגידול, כמו גם המתווכים פרו מקומיים ואנטי דלקתיים. לכן, דגמי הזרקת orthotropic, ולא מודלים תת עורי עשויים להיות שימושיים ללמוד התקדמות הסרטן באופן שהפתולוגיה אנושית מחקה טוב יותר.

הזרקת orthotopic של תאי סרטן השד לחלב שומן Pad של עכברים לחקר התפתחות גידול.

כאן נתאר הפרוטוקול הסטנדרטי איתור פעילות β-galactosidase מוקדם העכבר כל העוברים ואת שיטת העבודה פרפין חלוקתה ולא counterstaining. . זה הליך קלה ומהירה כדי לפקח על ביטוי גנים במהלך פיתוח שניתן להחילם גם על מקטעים של רקמות, איברים או תאים בתרבית.

עקיבה ביטוי גנים דרך זיהוי של β-galactosidase פעילות ב עכבר כל העוברים

המטרה של הפרוטוקול הזה היא לתאר את הגישה החדשה מידול סרטן השד מבוסס על הזרקת הפנים של יצור-הבעת אדנווירוס לתוך בלוטות החלב של העכבר. גישה זו מאפשרת גם מניפולציה ייחודית לסוג תא ולעוגב של אירועים אונגניים באופן זמני מבוקר.

דוגמנות סרטן השד באמצעות הזרקת הפנים של המין-אדנווירוס המבטא לתוך בלוטת החלב של העכבר

מודלים של קסנוגרפט (PDX) שמקורם בחולה ומודלים של עכברים מהונדסים גנטית הניתנים להשתלה מחדשים בנאמנות מחלות אנושיות והם מודלים מועדפים לחקר בסיסי ותרגום של סרטן השד. כאן, שיטה מתוארת להשתלה אורתוטופית שברי גידול השד לתוך כרית השומן הממארי כדי ללמוד ביולוגיה של הגידול ולהעריך את תגובת התרופה.

השתלה אורתוטופית של גידולי שד כמודלים פרה-אקליניים לסרטן השד

פרוטוקול זה מתאר חלון הדמיה חדש של יונקים עם מכסה הניתן להחלפה (R.MIW). מיקרוסקופיה תוך-ורידית לאחר השתלת ה-R.MIW מאפשרת הדמיה אורכית ורב-יומית של בלוטת החלב הבריאה והחולה עם רזולוציה תאית בשלבי ההתפתחות השונים.

מיקרוסקופיה תוך-ורידית אורכית באמצעות חלון הדמיה של יונקים עם מכסה הניתן להחלפה

הפרוטוקול הנוכחי מתאר טכניקה קלה להדמיה תוך-חיונית של בלוטת החלב של עכבר מניק, באמצעות סריקת לייזר, מיקרוסקופ קונפוקלי ומולטיפוטון.

מיקרוסקופיה תת-תאית תוך חיונית של בלוטת החלב

הפרוטוקול הנוכחי מתאר הזרקה אינטרדוקטלית של וקטורים נגיפיים דרך הטיט כדי להעביר גנים מעניינים לתאי אפיתל החלב.

ב Vivo העברת גנים לתאי אפיתל חלב עכבר באמצעות הזרקה intraductal חלב

Mount Sinai Hospital.  פרוטוקול זה מתאר גישת סקר CRISPR תוך-צינורית ניתנת להרחבה, המאפשרת מחקרים מקבילים של הכיבוי וההפעלה של הגנים בחיים בבלוטת השד של העכבר.

סקר מקביל ב-vivo של השמדת גנים והפעלה בבלוטת השד של העכברים

גלה סרטונים נוספים