Name: אפיון פונקציונלי של שותפים פרה-סינפטיים ופוסט-סינפטיים במערכת העצבים המרכזית של זחל הדרוזופילה באמצעות CaMPARI (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-16T13:20:00.000+00:00
Duration: 8 min 5 s
Description: למדו לאפיין חיבורים סינפטיים פונקציונליים במערכת העצבים של זחלי דרוזופילה באמצעות CaMPARI ואופטוגנטיקה. שיטה זו מאפשרת לחקור תקשורת נוירונלית בחיות חיות ללא ניתוח.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>0.1 M Phosphate Buffered Saline (PBS)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P5368-10PAK</td><td>כימיקל המשמש בתמיסה להידרציה ולהרכבת זחלים</td></tr><tr><td>All-trans-retinal (ATR)&nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>R2500-500mg</td><td>כימיקל המוסיף למזון כדי להפעיל כלים אופטוגנטיים</td></tr><tr><td>מיקרוסקופ קונפוקלי</td><td>ZEISS&nbsp;</td><td>LSM900 קונפוקלי</td><td>מיקרוסקופ קונפוקלי, עדשת אובייקטיב (40&times;/1.2 NA), מקור אור/לייזר (405, 488, 561 ננומטר)</td></tr><tr><td>כיסויים (18x18מ"מ)</td><td>VWR</td><td>48366-205</td><td>משמשים להרכבת בעלי חיים לצורך הדמיה</td></tr><tr><td>אתנול (95%)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>E7023</td><td>משמש כממס לאבקת ATR</td></tr><tr><td>Fiji (ImageJ)</td><td>מקור פתוח</td><td>RRID:SCR_002285&nbsp;</td><td>משמש לניתוח הדמיה</td></tr><tr><td>Prism version 10.4.1</td><td>GraphPad Software Inc.</td><td>RRID:SCR_002798</td><td>משמש לניתוח סטטיסטי</td></tr><tr><td>שקופיות מיקרוסקופ</td><td>VWR</td><td>&nbsp;48300-041</td><td>משמשות להרכבת בעלי חיים לצורך הדמיה</td></tr><tr><td>חימר לדוגמנות</td><td>Flinn scientific</td><td>FB0600</td><td>משמש להחזקת זכוכית כיסוי על שקופית מיקרוסקופ עם זחלים ביניהם</td></tr><tr><td>מברשת צבע&nbsp;</td><td>Genesee scientific</td><td>59-204</td><td>משמשת להעברת זחלים בין מיקומים</td></tr><tr><td>מדיום אגר תירס סטנדרטי</td><td>Genesee scientific</td><td>66-123</td><td>ניתן להכין מזון גם באמצעות מתכונים ומרכיבים סטנדרטיים דומים</td></tr><tr><td>בקבוקונים פלסטיק סטנדרטיים של דרוזופילה (25 מ"מ x 95 מ"מ בקבוקונים צרים של דרוזופילה)</td><td>Genesee scientific</td><td>32-109</td><td>ניתן להשתמש גם בבקבוקים או בקבוקונים גדולים</td></tr><tr><td>צלחת מיקרו בעלת שלושה בלוטים</td><td>Electron Microscopy Sciences&nbsp;</td><td>71561-01</td><td>צלחת המשמשת להפרדה ולניקוי זחלים בודדים</td></tr><tr><td>מלאי דרוזופילה (גנוטיפ: w; Basin4-LexA/CyO-TwGFP; ppk-GAL4/ppk-GAL4)&nbsp;</td><td>Bloomington Drosophila Stock Center</td><td>RRID:BDSC_54899 &amp; RRID:BDSC_32079</td><td>הושג על ידי רקומבינציה של RRID:BDSC_54899 ו-RRID:BDSC_32079</td></tr><tr><td>מלאי דרוזופילה (גנוטיפ: w, UAS-IVS-CsChrimson.mVenus, LexAOp-CaMPARI2; Sp/CyO)</td><td>Bloomington Drosophila Stock Center</td><td>RRID:BDSC_81085</td><td>הושג על ידי רקומבינציה של RRID:BDSC_81085 עם סמני כרומוזום שני</td></tr></tbody></table>

אפיון פונקציונלי של שותפים פרה-סינפטיים ופוסט-סינפטיים במערכת העצבים המרכזית של זחל הדרוזופילה באמצעות campari

Functional Characterization of Individual Pre- and Postsynaptic Partners In the Drosophila Larval Central Nervous System Using CaMPARI

אפיון פונקציונלי של שותפים פרה-סינפטיים ופוסט-סינפטיים במערכת העצבים המרכזית של זחל הדרוזופילה באמצעות CaMPARI

Connectome studies have greatly expanded understanding of synaptic connectivity in the nervous systems of various species. While characterization of ...

functional-characterization-individual-pre-postsynaptic-partners

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

הקלטה של ​​אלקטרו תסיסנית עובריים

Dissection והדמיה של אזורי פעיל תסיסנית Neuromuscular צומת

ניתוח microarray נערך כדי לקבוע פרופילים של ביטוי...

קביעת פרופילים ביטוי גנטיים ג elegans שימוש microarray בזמן אמת PCR

Arborization הנוירונים הדנדריטים חושית...

ניתוח מורפולוגי של תסיסנית הזחל היקפיים Neuron דנדריטים חושי האקסונים באמצעות פסיפסים גנטי

פרוטוקול זה מדגים כיצד סמיכות קשירת Assay יכול לשמש כדי לזהות באינטראקציות חלבון-חלבון אתרו בצומת העצבית-שרירית זחל תסיסנית. בעזרת טכניקה זו, שאו טאי גדול והו-לי דיסקים מוצגים בצורה מורכבת באזור postsynaptic, עמותה זוהתה בעבר באמצעות שיתוף immunoprecipitation.

זיהוי של באתר מכלולי חלבון-חלבון ב דרוזופילה הזחל Neuromuscular צומת שימוש סמיכות קשירת Assay

כאן אנו מראים כיצד לכמת את מספר הפריסה המרחבית של אזורי הפעילות הסינפטית קולטני האור תסיסנית, הדגיש עם סמן מולקולרי מקודדים גנטית, אפנון שלהם לאחר חשיפה ממושכת לאור.

ניתוח Synaptic אפנון של<em&gt; תסיסנית</em&gt; קולטני אור לאחר חשיפה לאור ממושך

כאן, אנו מציגים פרוטוקול טכניקת תיוג פסיפס המאפשרת ההדמיה של נוירונים נגזרו תא אב משותף בשני צבעים שונים. זה מקל על ניתוחי שושלת עצביים עם היכולת של נוירונים בודדים היכרויות לידת תפקוד גן הלומדים באותו נוירונים של אנשים שונים.

ניתוח שושלת תא ולימודי תפקוד גן באמצעות Twin-spot MARCM

ניתן להקליט זרמים סינפטית focally מ עם העיתון ons סינפטית מטמיעים בצומת דרוזופילה השלישי לחלל הזחלים עצב-שריר. טכניקה זו מאפשרת פיקוח על הפעילות של בוטון סינפטית יחיד.

מוקד Macropatch הקלטות של זרמי סינפטית מצומת דרוזופילה Neuromuscular זחל

כאן אנו מציגים פרוטוקול שבו ניתן לדמיין את הסידן הטרום ו/או הפוסט-סינפטיות בהקשר של למידה וזיכרון של דרוזוהילה . בשנת הדמיה vivo סידן באמצעות synaptically חיישנים סידן מקומי משולב עם הפרדיגמה הקלאסית מיזוג ריח כגון הפלסטיות הסינפטית הבסיסית בבסיס סוג זה של למידה אסוציאטיבית עשוי להיקבע.

ב-Vivo סידן הדמיה אופטית של למידה הנגרמת הפלסטיות הסינפטית בדרוזופילה מלאנוסטר

אנו מתארים שיטה עבור מעקב נסיגה של הנוירונים המנוע העובריים מוטוריים באמצעות צבעי פלורסנט ליפופילית.

מעקב רטרוגרדי של דרוזופילה ממונע נוירונים מוטוריים שימוש בצבעי פלורסנט

אנו מתארים פרוטוקול למדידת מגעים בין תאים בשכבות אפיתל סמוכות בדיסקים דמיוניים חיים של כנפי דרוזופילה באמצעות גישה מבוססת בנייה מחדש של GFP.

מערכת ביטוי כפול מבוססת השלמת GFP להערכת מגע תא-תא בתיווך ציטונמים בדיסקים דמיוניים חיים של כנף דרוזופילה

למדו לאפיין חיבורים סינפטיים פונקציונליים במערכת העצבים של זחלי דרוזופילה באמצעות CaMPARI ואופטוגנטיקה. שיטה זו מאפשרת לחקור תקשורת נוירונלית בחיות חיות ללא ניתוח.

אפיון פונקציונלי של שותפים פרה-סינפטיים ופוסט-סינפטיים במערכת העצבים המרכזית של זחל הדרוזופילה באמצעות CaMPARI

גלה סרטונים נוספים