ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Winden, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tuberous+sclerosis+complex%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Dis+Primers%22%5BJournal%5D)">Tuberous sclerosis complex.</a> Nat Rev Dis Primers. 12, 11(2026).</li>
<li>Ramani, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+clinical+interface+of+tuberous+sclerosis+complex+and+autism+spectrum+disorder%3A+insights+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22Neurol+Sci%22%5BJournal%5D)">The clinical interface of tuberous sclerosis complex and autism spectrum disorder: insights and future directions.</a> Neurol Sci. 46 (6), 2571-2580 (2025).</li>
<li>Lyall, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+changing+epidemiology+of+autism+spectrum+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Public+Health%22%5BJournal%5D)">The changing epidemiology of autism spectrum disorders.</a> Annu Rev Public Health. 38, 81-102 (2017).</li>
<li>Nazeer, A., Ghaziuddin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autism+spectrum+disorders%3A+clinical+features+and+diagnosis%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr+Clin+North+Am%22%5BJournal%5D)">Autism spectrum disorders: clinical features and diagnosis.</a> Pediatr Clin North Am. 59, 19-25 (2012).</li>
<li>Kern, J. K., Geier, D. A., Sykes, L. K., Geier, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relevance+of+neuroinflammation+and+encephalitis+in+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Relevance of neuroinflammation and encephalitis in autism.</a> Front Cell Neurosci. 9, 519(2016).</li>
<li>Careaga, M., Murai, T., Bauman, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maternal+immune+activation+and+autism+spectrum+disorder%3A+from+rodents+to+nonhuman+and+human+primates%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Maternal immune activation and autism spectrum disorder: from rodents to nonhuman and human primates.</a> Biol Psychiatry. 81 (5), 391-401 (2017).</li>
<li>Croonenberghs, J., Bosmans, E., Deboutte, D., Kenis, G., Maes, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activation+of+the+inflammatory+response+system+in+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychobiology%22%5BJournal%5D)">Activation of the inflammatory response system in autism.</a> Neuropsychobiology. 45, 1-6 (2002).</li>
<li>Girgis, R. R., Kumar, S. S., Brown, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cytokine+model+of+schizophrenia%3A+emerging+therapeutic+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">The cytokine model of schizophrenia: emerging therapeutic strategies.</a> Biol Psychiatry. 75 (4), 292-299 (2014).</li>
<li>Heuer, L. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+exploratory+examination+of+neonatal+cytokines+and+chemokines+as+predictors+of+autism+risk%3A+the+early+markers+for+autism+study%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">An exploratory examination of neonatal cytokines and chemokines as predictors of autism risk: the early markers for autism study.</a> Biol Psychiatry. 86 (4), 255-264 (2019).</li>
<li>Sasayama, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Negative+correlation+between+serum+cytokine+levels+and+cognitive+abilities+in+children+with+autism+spectrum+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22J+Intell%22%5BJournal%5D)">Negative correlation between serum cytokine levels and cognitive abilities in children with autism spectrum disorder.</a> J Intell. 5 (2), 19(2017).</li>
<li>Banks, W. A., Kastin, A. J., Gutierrez, E. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Penetration+of+interleukin-6+across+the+murine+blood-brain+barrier%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Lett%22%5BJournal%5D)">Penetration of interleukin-6 across the murine blood-brain barrier.</a> Neurosci Lett. 179 (1-2), 53-56 (1994).</li>
<li>Otkıran, G., Erdoğan, M. A., Uyanıkgil, Y., Erbaş, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prenatal+interferon-alpha+exposure+induces+autism-like+neurobehavioral+and+neurochemical+alterations+in+male+offspring%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neuroimmune+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Prenatal interferon-alpha exposure induces autism-like neurobehavioral and neurochemical alterations in male offspring.</a> J Neuroimmune Pharmacol. 21, 4(2026).</li>
<li>Smith, S. E. P., Li, J., Garbett, K., Mirnics, K., Patterson, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maternal+immune+activation+alters+fetal+brain+development+through+interleukin-6%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Maternal immune activation alters fetal brain development through interleukin-6.</a> J Neurosci. 27 (40), 10695-10702 (2007).</li>
<li>Bedell, V. M., Meng, Q. C., Pack, M. A., Eckenhoff, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+vertebrate+model+to+reveal+neural+substrates+underlying+the+transitions+between+conscious+and+unconscious+states%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">A vertebrate model to reveal neural substrates underlying the transitions between conscious and unconscious states.</a> Sci Rep. 10, 15789(2020).</li>
<li>Belo, M. A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+as+a+model+to+study+inflammation%3A+a+tool+for+drug+discovery%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Zebrafish as a model to study inflammation: a tool for drug discovery.</a> Biomed Pharmacother. 144, 112310(2021).</li>
<li>Ka, J., Pak, B., Han, O., Lee, S., Jin, S. -W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+transcriptomic+changes+between+zebrafish+and+mice+upon+high+fat+diet+reveals+evolutionary+convergence+in+lipid+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">Comparison of transcriptomic changes between zebrafish and mice upon high fat diet reveals evolutionary convergence in lipid metabolism.</a> Biochem Biophys Res Commun. 530 (4), 638-643 (2020).</li>
<li>Li, Y., Hu, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+multi-site+infection+model+in+zebrafish+larvae+for+studying+Staphylococcus+aureus+infectious+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Genet+Genomics%22%5BJournal%5D)">Establishment of multi-site infection model in zebrafish larvae for studying Staphylococcus aureus infectious disease.</a> J Genet Genomics. 39 (9), 521-534 (2012).</li>
<li>Nicoli, S., Ribatti, D., Cotelli, F., Presta, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mammalian+tumor+xenografts+induce+neovascularization+in+zebrafish+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Mammalian tumor xenografts induce neovascularization in zebrafish embryos.</a> Cancer Res. 67 (7), 2927-2931 (2007).</li>
<li>Cao, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Carboxyl+graphene+oxide+nanoparticles+induce+neurodevelopmental+defects+and+locomotor+disorders+in+zebrafish+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22Chemosphere%22%5BJournal%5D)">Carboxyl graphene oxide nanoparticles induce neurodevelopmental defects and locomotor disorders in zebrafish larvae.</a> Chemosphere. 270, 128611(2021).</li>
<li>Martini, D., Pucci, C., Gabellini, C., Pellegrino, M., Andreazzoli, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exposure+to+the+natural+alkaloid+berberine+affects+cardiovascular+system+morphogenesis+and+functionality+during+zebrafish+development%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Exposure to the natural alkaloid berberine affects cardiovascular system morphogenesis and functionality during zebrafish development.</a> Sci Rep. 10, 17358(2020).</li>
<li>Sun, M., et al. Robotic cardinal vein microinjection of zebrafish larvae based on 3D positioning. 2021 IEEE International Conference on Robotics and Automation (ICRA), Xi'an, China, , (2021).</li>
<li>Kedra, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TrkB+hyperactivity+contributes+to+brain+dysconnectivity%2C+epileptogenesis%2C+and+anxiety+in+zebrafish+model+of+tuberous+sclerosis+complex%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">TrkB hyperactivity contributes to brain dysconnectivity, epileptogenesis, and anxiety in zebrafish model of tuberous sclerosis complex.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 117 (4), 2170-2179 (2020).</li>
<li>Kim, S. -H., Speirs, C. K., Solnica-Krezel, L., Ess, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+model+of+tuberous+sclerosis+complex+reveals+cell-autonomous+and+non-cell-autonomous+functions+of+mutant+tuberin%5BTitle%5D)+AND+%22Dis+Model+Mech%22%5BJournal%5D)">Zebrafish model of tuberous sclerosis complex reveals cell-autonomous and non-cell-autonomous functions of mutant tuberin.</a> Dis Model Mech. 4 (2), 255-267 (2011).</li>
<li>Konadu, B., Cox, C. K., Gibert, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+the+microinjection+of+free+fatty+acids+and+triacylglycerol+in+zebrafish+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol for the microinjection of free fatty acids and triacylglycerol in zebrafish embryos.</a> STAR Protoc. 5 (2), 103086(2024).</li>
<li>Evans, S. S., Repasky, E. A., Fisher, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fever+and+the+thermal+regulation+of+immunity%3A+the+immune+system+feels+the+heat%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Fever and the thermal regulation of immunity: the immune system feels the heat.</a> Nat Rev Immunol. 15 (6), 335-349 (2015).</li>
<li>Zabegalov, K. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abnormal+repetitive+behaviors+in+zebrafish+and+their+relevance+to+human+brain+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Abnormal repetitive behaviors in zebrafish and their relevance to human brain disorders.</a> Behav Brain Res. 367, 101-110 (2019).</li>
<li>Scheldeman, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((mTOR-related+neuropathology+in+mutant+tsc2+zebrafish%3A+phenotypic%2C+transcriptomic+and+pharmacological+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Dis%22%5BJournal%5D)">mTOR-related neuropathology in mutant tsc2 zebrafish: phenotypic, transcriptomic and pharmacological analysis.</a> Neurobiol Dis. 108, 225-237 (2017).</li>
<li>Ilyin, N. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+intracerebroventricular+lipopolysaccharide+administration+on+behavioral%2C+neurochemical%2C+and+neurogenomic+responses+in+adult+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of intracerebroventricular lipopolysaccharide administration on behavioral, neurochemical, and neurogenomic responses in adult zebrafish.</a> Behav Brain Res. 493, 115676(2025).</li>
<li>Luo, R., Yao, Y., Chen, Z., Sun, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+examination+of+the+LPS-TLR4+immune+response+through+the+analysis+of+molecular+structures+and+protein-protein+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Commun+Signal%22%5BJournal%5D)">An examination of the LPS-TLR4 immune response through the analysis of molecular structures and protein-protein interactions.</a> Cell Commun Signal. 23, 142(2025).</li>
<li>Grebennikova, D. V., Shandilya, U. K., Karrow, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beyond+TLR4+and+its+alternative+lipopolysaccharide+%28LPS%29+sensing+pathways+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Genes%22%5BJournal%5D)">Beyond TLR4 and its alternative lipopolysaccharide (LPS) sensing pathways in zebrafish.</a> Genes. 16 (9), 1014(2025).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Borosilicate Glass capillaries (Outer diameter 1.0 mm/ inner diameter 0.75 mm)</td><td>Sutter Instrument</td><td>BF150-75-10</td><td></td></tr><tr><td>CaCl2 (calcium chloride)</td><td>Chempur</td><td>118748703</td><td></td></tr><tr><td>Callibration Slide (1/100 mm)</td><td>Bresser</td><td>5916710</td><td></td></tr><tr><td>Capillary holder (Grip head set 4 size 0)</td><td>Fertilart Sp. z o.o</td><td>5196082001</td><td></td></tr><tr><td>Flaming/Brown micropipette puller</td><td>Sutter Instrument</td><td>P-1000</td><td></td></tr><tr><td>HCl</td><td>Chempur</td><td>115752837</td><td></td></tr><tr><td>Human IL6</td><td>Thermo Fischer Scientific</td><td>200-06-20UG</td><td>ריכוז מלאי: 10 &micro;g/mL, ריכוז עבודה: 2 pg/nL (מודלל ב-0.9% NaCl)</td></tr><tr><td>Injector pump FemtoJet 4i</td><td>Eppendorf</td><td>E5252000021</td><td></td></tr><tr><td>KCl (potassium chloride)</td><td>Chempur</td><td>117397402</td><td></td></tr><tr><td>MgCl2&middot;6H2O (magnesium chloride hexahydrate)</td><td>Chempur</td><td>116120500</td><td></td></tr><tr><td>Femtotips Microloader Tips for Femtojet Microinjector</td><td>Eppendorf</td><td>EPE 5242956003</td><td></td></tr><tr><td>Microscope Leica M165 FC 1983 magnification</td><td>Leica Microsysytems</td><td>https://www.leica-microsystems.com/products/ light-microscopes/stereo-microscopes/p/leica-m165-fc/</td><td></td></tr><tr><td>Mineral oil</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M5904</td><td></td></tr><tr><td>NaCl (sodium chloride)</td><td>Chempur</td><td>117941206</td><td></td></tr><tr><td>Pronase</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P5147-1G</td><td>ריכוז מלאי: 20 mg/mL (מוכן במים טהורים במיוחד), ריכוז עבודה: 0.5 mg/mL (מודלל ב-E3)</td></tr><tr><td>Tricaine</td><td>Sigma-Aldrich/Merck</td><td>A-5040</td><td></td></tr><tr><td>Tris base</td><td>Carl Roth</td><td>4855.3</td><td></td></tr><tr><td>Trypan Blue</td><td>Thermo Fischer Scientific</td><td>15250061</td><td></td></tr><tr><td>UltraPure Low Melting Point Agarose</td><td>Thermo Fischer Scientific</td><td>16520050</td><td></td></tr><tr><td>ZebraBox extension - Photo Motor Response EZBPMR</td><td>Animalab</td><td>https://animalab.eu/zebrabox-high-throughput-monitoring-system</td><td></td></tr><tr><td>Zebrabox</td><td>ViewPoint</td><td>https://www.viewpoint.fr/product/zebrafish/fish-behavior-monitoring/zebrabox</td><td>חדר ניתוח אוטומטי</td></tr></tbody></table>

מיקרוהזרקה של אינטרלוקין-6 לזרם הדם של זחלי דגי זברה tsc כדי לחקור התנהגויות דמויות הפרעות נוירופסיכיאטריות

Microinjection of Interleukin-6 into the Bloodstream of TSC Zebrafish Larvae to Study Neuropsychiatric Disorder-Like Behaviors

מיקרוהזרקה של אינטרלוקין-6 לזרם הדם של זחלי דגי זברה TSC כדי לחקור התנהגויות דמויות הפרעות נוירופסיכיאטריות

Patients with tuberous sclerosis complex (TSC1/TSC2 mutations) exhibit variable expressivity of autism spectrum disorder (ASD), and maternal immune ...

המחקר שלי בוחן כיצד דלקת המושרה על ידי IL-6 מקיפה עם מוטציות סיכון גנטיות לאוטיזם כדי להשפיע על התפתחות המוח ותפקודו. בניגוד לדלקת רחבה המושרית על ידי LPS, פרוטוקול זה מעלה באופן סלקטיבי את רמת ה-IL-6, מה שמאפשר חקירה מדויקת של השפעות נוירו-התפתחותיות ספציפיות לסייטוקין. כדי להתחיל, אספו את מחטי המיקרו-הזרקה, את הריאגנטים הדרושים ועוברים של דגי זברה יומיים לאחר ההפריה.הכינו תמיסת אגרוז בריכוז 1% משקל לנפח במדיום E3, וחממו אותה עד להמסה מלאה של האגרוז ועד שהתמיסה תהפוך לצלולה. המתינו לקירור קצר של תמיסת האגרוז. צקו כ-30 milliliters לתוך צלחת פטרי בקוטר 100 millimeter כדי להבטיח שכבה אחידה על פני השטח.בעוד שהאגרוז עדיין נוזלי, אך מתחיל להתמצק, הניחו בעדינות תבנית סיליקון על פני השטח כדי ליצור חריצים אחידים. העבירו כ-100 עוברים עם קוריון, יומיים לאחר ההפריה, לצלוחית פטרי קטנה בנפח 50 מילימטר המצופה באגרוז. הוסיפו לצלוחית ארבעה מיליליטר של תמיסת pronase שהוכנה טרי, תוך הבטחה שהעוברים שקועים לחלוטין.דגרו בטמפרטורת החדר למשך שלוש עד חמש דקות. תחת מיקרוסקופ סטריאו, עקבו אחר שחרור העוברים מהכוריון. סובבו או סחררו בעדינות את הצלחת לסירוגין כדי להקל על הסרתו האנזימטית של הכוריון.המשיכו עד שרוב העוברים ישתחררו מהכוריון שלהם. שטפו את העוברים ביסודיות על ידי העברתם דרך חמישה עד שישה החלפות של מצע גידול E3 טרי לעוברים. ודאו שכל השאריות של הכוריון וה-pronase הוסרו כדי למנוע נזק לזחלים ולשמור על תנאי תרבית אופטימליים.באמצעות פיפטת זכוכית מסוג פסטור, העבירו כ-50 לרבות שעברו דקוריונציה למנתרה של 100 מילימטר המכילה 40 מיליליטר של מצע E3. שמרו את הלרבות במצע E3 עד למיקרו-הזרקה. תחת מיקרוסקופ סטריאו, השתמשו בפינצטה עדינה כדי לשבור בזהירות את קצה הנימה מזכוכית שהוכנה מראש, כדי ליצור מיקרו-פיפטה עם פתח שקוטרו כמעט שלושה מיקרומטרים.הכינו תמיסת sodium chloride בריכוז 0.9% משקל לנפח להזרקות ביקורת. עבור הזרקות IL-6, הכינו תמיסת Interleukin 6 או IL-6 בריכוז 2 pg/nl ב-0.9% sodium chloride. הוסיפו 1 µL של Trypan blue בריכוז 0.05% לכל 10 µL מתמיסת ההזרקה כדי להקל על הוויזואליזציה במהלך ההזרקה.באמצעות פפית, טענו את התמיסה לקצה מיקרו-לודר (microloader tip). לאחר מכן, השתמשו בקצה המיקרו-לודר כדי למלא לאחור את מחט ההזרקה של המיקרו-פפית שהוכנה עם כ-3 µL של תמיסת ההזרקה, תוך הבטחה שלא יכנסו בועות אוויר. חבקו את מחט ההזרקה הטעונה למחזיק הנימי המיועד לחיבור למערכת המיקרו-הזרקה.לאחר מכן, הניחו טיפה קטנה של שמן מינרלי על שקופית כיול. כיילו את נפח ההזרקה על ידי פליטת טיפות אל תוך השמן המינרלי. מדדו את קוטר הטיפה באמצעות שקופית הכיול בעלת סולם של 0.01 millimeter.כווננו את לחץ ההזרקה כדי להשיג נפח טיפה של כ-1 nanoliter. הרדימו את הזחלים בקבוצות קטנות על ידי הוספת tricaine לתווך E3 בריכוז סופי של 1X, כדי למזער את העקה ולהבטיח הרדמה עקבית. העבירו זחלים בודדים, יומיים לאחר ההפריה, אל פלטת הזרקה של agarose מוצק.הנח את הצלחת תחת מיקרוסקופ סטריאוסקופי. באמצעות פיפטת זכוכית, כוון בעדינות כל זחל כך שתעלת קוויאר (duct of Cuvier) תהיה גלויה ונגישה בבירור. מקם את קצה המיקרופיפטה בנקודת הכניסה לתעלת קוויאר על ידי מעקב אחר תאי דם הנעים לעבר הלב תחת המיקרוסקופ הסטריאוסקופי.הזריקו את הטיפה הראשונה של התמיסה שהוכנה לתוך תעלת קובייר (duct of Cuvier). לאחר כ-20 שניות, הזריקו טיפה שנייה לתוך תעלת קובייר. לאחר ההזרקה, העבירו בעדינות את הזחלים לצלחת פטרי נקייה בקוטר 100 מילימטר המכילה 40 מיליליטר של מצע E3.החזירו את הזחלים לאינקובטור בטמפרטורה של 28.5 °C להתאוששות. למחרת, חזרו על הליך המיקרו-הזרקה כפי שהודגם קודם לכן. חמישה ימים לאחר ההפריה, השתמשו בזחלים ליישומים המשכיים, כולל בדיקות התנהגותיות, דימוי של המוח או ניתוח אימונופלואורסצנציה.מיקרו-הזרקה של IL-6 לא השפיעה על חיוניות הזחלים בהשוואה להזרקות של נתרן כלורי. שיעורי ההישרדות חמישה ימים לאחר ההפריה היו דומים בין הקבוצות שהוזרקו IL-6 לקבוצות שהוזרקו NACL, מה שמעיד על כך שמשטר המינון נסבל היטב ואינו גורם לרעילות לא-ספציפית. מיקרו-הזרקות הפחיתו מעט את החיוניות בהשוואה לאחים שלא הוזרקו.מוטנטים הומוזיגוטים של Complex Tuberous Sclerosis 2, או TSC2, הראו רמות בסיס גבוהות משמעותית של prostaglandin E2 או PGE2 בהשוואה לאחים מסוג wild-type. מוטנטים הטרוזיגוטים של TSC2 הראו עלייה מתונה ולא מובהקת ברמות הבסיס של PGE2 בהשוואה לאחים מסוג wild-type. רמות ה-PGE2 עלו בחדות במוטנטים הטרוזיגוטים של TSC2 בעקבות מיקרו-הזרקה של IL-6.בדיקת השטח הפתוח הראתה כי מוטציות ב-TSC2 גרמו להתגברות של התנהגות דמוית חרדה בהשוואה לאחים מסוג הפרא (wild-type) בקבוצות ביקורת שלא קיבלו הזרקה, ומיקרו-הזרקות של IL-6 לא השפיעו על התנהגות זו. מוטנטים הומוזיגוטים והטרוזיגוטים של TSC2 שהו זמן רב יותר באופן מובהק באזור החיצוני של הזירה והפגינו חקירה מופחתת של המרכז בהשוואה לאחים מסוג הפרא בקבוצות ביקורת שלא קיבלו הזרקה, וכן בהשוואה לזחלי TSC2 שהוזרק להם IL-6. הזרקות של IL-6 הגבירו דפוסי שחייה חזרתיים וסטריאוטיפיים, במיוחד במוטנטים הטרוזיגוטים של TSC2.הפרופורציה של מוטנטים הטרוזיגוטיים של TSC2 שהוזרק להם IL-6 והפגינו לולאות חוזרות (repetitive looping) הייתה גבוהה משמעותית בהשוואה למשבקי ביקורת שהוזרק להם נתרן כלורי. פרוטוקול זה מאפשר מחקרי דלקת מבוקרי IL-6 להערכת השפעות של סביבת גנים על התפתחות נוירולוגית והתנהגות בדגי נקבת (zebrafish). שיקולים מרכזיים בעת ביצוע פרוטוקול זה כוללים שימוש בגודל מחט עקבי, נפח הזרקה מדויק של שני ננוליטרים, וצמצום זמן השהיית הזחלים מחוץ ל-E3. מחקרים עתידיים יכולים לבחון כיצד דלקת IL-6 וסיכון גנטי משפיעים יחד על התפתחות המוח וההתנהגות.

microinjection-interleukin-6-into-bloodstream-tsc-zebrafish-larvae-to

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

וידאו זה מראה כיצד morpholino או mRNA יהיה ניתן להזריק לתוך עוברי דג הזברה בשלב אחד התא כדי להגדיל או להקטין את רמת המוצרים גן מסוים במהלך ההתפתחות הבאים.

Microinjection של עוברי דג הזברה לנתח פונקציה ג&#39;ין

ההתפתחות המהירה, גודל קטן השקיפות של דג הזברה הם יתרונות עצומים למחקר שליטה החיסון המולדת של...

הדמיה לא פולשנית של פטרת מופצת הזחלים דג הזברה

הסרטון מדגים מיקרו-הזרקה של ליפופוליסכרידים (LPS) למוחם של זחלי דגי זברה כדי לגרום לדלקת עצבית. הזחלים ממוקמים על צלחת מרופדת באגרוז, המחט מוחדרת לחדרי המוח, וה-LPS מוזרק. ה-LPS המוזרק מעורר תגובה חיסונית שמובילה לדלקת עצבית.

גרימת דלקת עצבית בזחלי דגי זברה עם הזרקת ליפופוליסכריד

במאמר זה, אנו מדגימים שיטה למניפולציה של ביטוי גנים בתאי חדריות של telencephalon דג הזברה המבוגר באמצעות oligonucleotides morpholino antisense. אנו מציגים שיטה זו כפרוטוקול יעיל ומהיר שיכול לשמש למחקרים תפקודיים במוח החולייתנים המבוגר.

מיקרומניפולציה של ביטוי גנים במוח דג הזברה למבוגר באמצעות Microinjection Cerebroventricular של oligonucleotides morpholino

Microinjection של דג זברה עוברי וזחלים היא טכניקה חיונית ומאתגרת המשמשים דגמים רבים של דג זברה. כאן, אנו מציגים מגוון רחב של כלים microscale כדי לסייע ייצוב והכיוון של דג זברה הן microinjection והן הדמיה.

Microstructured מכשירי Microinjection אופטימיזציה והדימות של הזחלים דג זברה

כאן, אנו מציגים פרוטוקול להתפתחות ואפיון של מודל דג זברה של אפילפסיה הנובע מהעיכוב הארעי של הגן DEPDC5.

ניתוח התנהגותי ופיזיולוגי במודל דגי זברה של אפילפסיה

הפרוטוקול הנוכחי מתאר את ההזרקה התוך-חדרית (ICV) של דגי זברה בוגרים עם נוירוטוקסי-הידרוקסידופאמין (6-OHDA) בדיאנספלון הגחוני (Dn) ואת הערכת הליקוי וההתאוששות שלאחר מכן של פוסטלציה של התנהגות שחייה באמצעות מבחן הטנק הפתוח, המלווה בניתוח באמצעות תוכנת מעקב וידאו.

הערכת לוקומוטור של מודל מחלת פרקינסון למבוגרים המושרה על ידי 6-הידרוקסידופמין

פרוטוקול זה מדגים את המיקרו-הזרקה של ליפופוליסכריד לאזור חדר המוח במודל של זחל דג זברה כדי לחקור את התגובה הנוירו-דלקתית והרעילות העצבית המתקבלות כתוצאה מכך.

מיקרו-הזרקות חדריות למוח של ליפופוליסכריד לדגי זברה זחליים להערכת דלקת עצבית ורעילות עצבית

אנו מדגימים שיטה המנצלת סריקה מהירה של מיקרוסקופ קונפוקלי כדי לבצע הדמיה חיה של תאי מיקרוגליה בטקטום האופטי המתפתח של דגי זברה, המאפשר ניתוח של הדינמיקה של תאים אלה in vivo.

הדמיה חיה ואפיון דינמיקה של תאי מיקרוגליה בעובר דג הזברה

RASopathies הן תסמונות גנטיות רב-מערכתיות הנגרמות על ידי היפראקטיביזציה של מסלול RAS-MAPK. וריאנטים פתוגניים פוטנציאליים הממתינים לאימות מופיעים ללא הרף בעוד ראיות פרה-קליניות גרועות מגבילות את הטיפול. כאן, אנו מתארים את פרוטוקול ה-in vivo שלנו לבדיקה ואימות צולב של רמות הפעלת ERK הקשורות ל-RASopathy ואת האפנון הפרמקולוגי שלו במהלך האמבריוגנזה על ידי הדמיית FRET חיה בדג זברה Teen-reporter.

פרוטוקול יעיל להערכת אפנון פעילות ERK במודלים מוקדמים של תסמונת נונן של דג הזברה באמצעות מיקרוסקופ FRET חי ואימונופלואורסצנציה

International Institute of Molecular Mechanisms and Machines, IMol, Polish Academy of Sciences.  כדי למודל כיצד אותות דלקתיים משפיעים על התפתחות עצבית באורגניזמים רגישים גנטית, אנו מציגים פרוטוקול להזרקת IL-6 מיקרו לתעלה של הווריד הקרדינלי הנפוץ של זחלי דגי הזברה, המאפשר השראה מבוקרת של דלקת והערכת השפעתו ההתפתחותית בהקשר של קומפלקס טרשת ?...

מיקרוהזרקה של אינטרלוקין-6 לזרם הדם של זחלי דגי זברה TSC כדי לחקור התנהגויות דמויות הפרעות נוירופסיכיאטריות

גלה סרטונים נוספים