ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol>
	<li>Hattar S, Liao HW, Takao M, Berson DM, Yau KW. Melanopsin-containing retinal ganglion cells: architecture, projections, and intrinsic photosensitivity. Science. 2002;295(5557):1065&#8211;70.</li>
	<li>Jones JR, Simon T, Lones L, Herzog ED. SCN VIP neurons are essential for normal light-mediated resetting of the circadian system. J Neurosci. 2018;38(37):7986&#8211;95.</li>
	<li>Coursey PJ. Daily light sensitivity rhythm in a rodent. Science. 1960;131:33&#8211;35.</li>
	<li>Kornhauser JM, Ginty DD, Greenberg ME, Mayo KE, Takahashi JS. Light entrainment and activation of signal transduction pathways in the SCN. Prog Brain Res. 1996;111:133&#8211;46.</li>
	<li>Ding JM, Weber ET, Faiman LE, Rea MA, Gillette MU. Resetting the biological clock: mediation of nocturnal circadian shifts by glutamate and NO. Science. 1994;266(5191):1713.</li>
	<li>Mintz EM, Gillespie CF, Price KM, Albers HE. Activation of NMDA receptors in the suprachiasmatic nucleus produces light-like phase shifts of the circadian clock in vivo. J Neurosci. 1999;19(12):5124&#8211;30.</li>
	<li>Shirakawa T, Moore RY. Glutamate shifts the phase of the circadian neuronal firing rhythm in the rat suprachiasmatic nucleus in vitro. Neurosci Lett. 1994;178(1):47&#8211;50.</li>
	<li>Shibata S, Watanabe A, Hamada T, Ono M, Watanabe S. N-methyl-D-aspartate induces phase shifts in circadian rhythm of neuronal activity of rat SCN in vitro. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 1994;267(2):R360&#8211;R364.</li>
	<li>Asai M, Yamaguchi S, Isejima H, Jonouchi M, Moriya T, et al. Visualization of mPer1 transcription in vitro: NMDA induces a rapid phase shift of mPer1 gene in cultured SCN. Curr Biol. 2001;11(19):1524&#8211;27.</li>
	<li>Sladek M, Sumova A. Modulation of NMDA-mediated clock resetting in the suprachiasmatic nuclei of mPer2 (Luc) mouse by endocannabinoids. Front Physiol. 2019;10:361.</li>
	<li>Shibata S, Moore RY. Neuropeptide Y and optic chiasm stimulation affect suprachiasmatic nucleus circadian function in vitro. Brain Res. 1993;615(1):95&#8211;100.</li>
	<li>Jones JR, Tackenberg MC, McMahon DG. Manipulating circadian clock neuron firing rate resets molecular circadian rhythms and behavior. Nat Neurosci. 2015;18(3):373&#8211;75.</li>
	<li>Kim S, McMahon DG. Light sets the brain&#8217;s daily clock by regional quickening and slowing of the molecular clockworks at dawn and dusk. Elife. 2021;10:e70137.</li>
	<li>de Vries MJ, Treep JA, de Pauw ES, Meijer JH. The effects of electrical stimulation of the optic nerves and anterior optic chiasm on the circadian activity rhythm of the Syrian hamster: involvement of excitatory amino acids. Brain Res. 1994;642(1-2):206&#8211;12.</li>
	<li>Rusak B, Groos G. Suprachiasmatic stimulation phase shifts rodent circadian rhythms. Science. 1982;215(4538):1407&#8211;09.</li>
	<li>Duy PQ, Komal R, Richardson ME, Hahm KS, Fernandez DC, et al. Light has diverse spatiotemporal molecular changes in the mouse suprachiasmatic nucleus. J Biol Rhythms. 2020;35(6):576&#8211;87.</li>
	<li>Liu A, Milner ES, Peng YR, Blume HA, Brown MC, et al. Encoding of environmental illumination by primate melanopsin neurons. Science. 2023;379(6630):376&#8211;81.</li>
	<li>Milner ES, Do MTH. A population representation of absolute light intensity in the mammalian retina. Cell. 2017;171(4):865&#8211;876.e16.</li>
	<li>Komal R, Beier C, Nath A, et al. ipRGC properties prevent light from shifting the SCN clock during daytime. Nature. 2026;650(8103):942&#8211;50. .</li>
	<li>Jewett ME, Rimmer DW, Duffy JF, Klerman EB, Kronauer RE, et al. Human circadian pacemaker is sensitive to light throughout subjective day without evidence of transients. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 1997;273(5):R1800&#8211;R1809.</li>
	<li>Revell VL, Molina TA, Eastman CI. Human phase response curve to intermittent blue light using a commercially available device. J Physiol. 2012;590(19):4859&#8211;68.</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>AAV2-hSyn-DIO-hM3D(Gq)-mCherry</td><td>Addgene</td><td>44361</td><td>ווקטור ויראלי תלוי Cre המקודד DREADD מרגש (hM3Dq) ממוזג ל-mCherry להפעלה סלקטיבית של ipRGC</td></tr><tr><td>נוגדן Anti-c-Fos (מונוקלונלי ארנב)</td><td>Cell Signaling Technology</td><td>2250S</td><td>נוגדן ראשוני המשמש לזיהוי c-Fos כסמן להפעלה עצבית</td></tr><tr><td>נוגדן Anti-tdTomato (עז)</td><td>LSBio</td><td>LS-C340696</td><td>נוגדן ראשוני המשמש לזיהוי ביטוי מדווח mCherry/tdTomato</td></tr><tr><td>מפעיל LED כחול</td><td>Thorlabs</td><td>LEDD1B</td><td>ספק כוח לבקרת עוצמה ופלט של LED כחול</td></tr><tr><td>מקור אור LED כחול</td><td>Thorlabs</td><td>M470L5</td><td>מקור LED הפולט אור כחול (&lambda;max &asymp; 470 ננומטר) לגירוי פוטי</td></tr><tr><td>תוכנת ClockLab</td><td>Actimetrics</td><td>גרסה 6.0.53</td><td>תוכנה לרכישה וניתוח של נתוני פעילות לוקומוטורית צירקדית</td></tr><tr><td>Clozapine-N-oxide (CNO)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C0832-5MG</td><td>ליגנד המשמש להפעלת קולטני hM3Dq DREADD in vivo</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Invitrogen</td><td>62248</td><td>צבע גרעיני גרעיני פלואורסצנטי לסימון גרעיני תאים</td></tr><tr><td>נוגדן אלכסה פלואורו 555 של עז פרה</td><td>Invitrogen</td><td>A21432</td><td>נוגדן משני פלואורסצנטי לזיהוי נוגדנים ראשוניים של עז</td></tr><tr><td>נוגדן אלכסה פלואורו 488 של עז פרה</td><td>Invitrogen</td><td>A21206</td><td>נוגדן משני פלואורסצנטי לזיהוי נוגדנים ראשוניים של ארנב</td></tr><tr><td>Fluoromount-G</td><td>Invitrogen</td><td>00-4958-02</td><td>מדיום הרכבה המשמש לשימור פלואורסצנציה בחתכי רקמה</td></tr><tr><td>תוכנת ImageJ (Fiji)</td><td>NIH</td><td>גרסה 2.16.0/1.54g</td><td>תוכנה פתוחה לעיבוד תמונות וניתוח כמותי</td></tr><tr><td>עכברים Opn4cre</td><td>The Jackson Laboratry</td><td>RRID:IMSR_JAX:035925</td><td>עכברים המשמשים להפעלה כימוגנטית</td></tr><tr><td>מפעיל LED סגול</td><td>Mightex</td><td>SLA-1000-2</td><td>ספק כוח לבקרת פלט LED סגול</td></tr><tr><td>מקור אור LED סגול</td><td>Mightex</td><td>BLS-LCS-0385-04-22</td><td>מקור LED הפולט אור סגול (&lambda;max &asymp; 385 ננומטר) לגירוי ספציפי לאורך גל</td></tr><tr><td>עכברים מסוג Wild-type</td><td>The Jackson Laboratry</td><td>Jackson strain #101043</td><td>עכברים המשמשים לניסוי אור סגול</td></tr></tbody></table>

השראת שינויי פאזה צירקדיים ביום באמצעות גישות כימוגנטיות וספקטרליות

Inducing Daytime Circadian Phase Shifts Using Chemogenetic and Spectral Approaches

In mammals, circadian phase shifting during the daytime is limited by reduced photic responsiveness of the suprachiasmatic nucleus (SCN), restricting the ...

inducing-daytime-circadian-phase-shifts-using-chemogenetic-spectral

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

מאמר זה יסקור שיטות שניתן להשתמש בהם כדי לקבוע פונקציה היממה ואת ההיענות אור בעכברים.

התגובות מדידת אור היממה ואת חריפה בעכברים באמצעות פעילות גלגל ריצה

שעוני יממה לתפקד בתוך תאים בודדים, כלומר, הם תאים אוטונומיים. כאן, אנו מתארים שיטות ליצירת מודלי שעון תא אוטונומי באמצעות טכנולוגיה לא פולשנית, לוציפראז מבוסס זמן אמת פליטת אור. תאי Reporter מספקים מערכות צייתניות, פונקציונליות מודל ללימוד ביולוגית יממה.

ניטור מקצבי Cell-אוטונומי יממת שעון של ביטוי גנים באמצעות כתבי פליטת האור לוציפראז

מקור: Kodani, S., et.al. מניפולציה אופטוגנטית של מעגלים עצביים במהלך ניטור מצבי שינה/ערות בעכברים. J. Vis. Exp. (2019)סרטון זה מדגים את המניפולציה האופטוגנטית של מעגלים עצביים המעורבים במעבר משינה לערות בעכברים. ההליך כולל השתלה כירורגית של סיב אופטי ואלקטרודות במוח ובשרירים כדי לאפשר גירוי אור ורישום אלקטרופיזיולוגי. על ידי אספקת אור להפעלת תעלות קטיון רגישות לאור בגרעין המיטה של הסטריה טרמינליס (BNST), הפעילות העצבית מווסתת, ומאפשרת לחוקרים לנתח אותות מוחיים ושרירים הקשורים לאינדוקציה של ערות.

מניפולציה אופטוגנטית של מעגלים עצביים למעבר משינה לערות בעכברים

וזמינותו ביולומינסנציה במבחנה כדי לקבוע סלולארית בשעון הביולוגי בתאי אפיתל החלב מוצג. שיטה זו משתמשת בתרבית של תאים כתב פלסמידים לבטא גרם אולי לפגיעה ביציבות לוציפראז תחת השליטה של האמרגן ג'ין תקופה 2 . זה ניתן להתאים את סוגי תאים אחרים כדי להעריך את ההשפעות איבר ספציפי על שעון ביולוגי.

במבחנה ביולומינסנציה Assay לאפיין בשעון הביולוגי בתאי אפיתל החלב

לוציפראז מקודדים גנטית הוא עיתונאי לא פולשנית הפופולרי של ביטוי גנים. שימוש לוציפראז האורך אוטומטית הדמיה מקליט גז, טמפרטורה-אופטימיזציה (תנין) מאפשר הקלטה אורכית מתאי זוהרים תחת מגוון רחב של מצבים. הנה אנחנו מראים איך תנין עשוי לשמש בהקשר של מחקר השעון הביולוגי.

גמיש מדידה של כתבים זוהרים באמצעות לוציפראז האורך אוטומטית של הדמיה מקליט גז, טמפרטורה-אופטימיזציה (תנין)

טכנולוגיה זו מבוססת על-ידי קרינה פלואורסצנטית פיתח ' מאפשר ניטור לטווח ארוך של שעתוק של גנים שעון היממה העל-תצלובתי (SCN) לנוע בחופשיות עכברים בזמן אמת, ברזולוציה הטמפורלית גבוהה.

אין ויוו פיקוח על ביטוי גנים שעון היממה בתצלובתי העכבר באמצעות קרינה פלואורסצנטית כתבים

כאן, אנו מציגים שיטה לחקור מקצבים יומי בביצועים בעקבות סיווג מדויק של המשתתפים לתוך הקבוצות מעגליות פניטיפ מבוסס על שאלון ChronoType מינכן, מעגלי הזהב בשלב ביולוגי הפאזה ואמצעים האקטגרפיים.

בדיקות ביצועים של מעגלי האדם בעולם האמיתי

כאן, אנו מפרטים כיצד לסנכרן את דרוסופילה ליום ביולוגי. זהו הצעד הראשון והחשוב ביותר הנחוץ ללימוד מקצבים ביולוגיים ותרונוביולוגיה.

היממה של דרוסופילה מלנוגסטר

אנו מתארים נוהלי רישום פעילות של תנועה יומי של...

Assaying פעילות של תנועה כדי ללמוד בקצב היממה ושינה פרמטרים תסיסנית</em

פרופיל ביטוי של RNA מאזורים מובחנים במוח של עכבר דורש אסטרטגיה מדויקת וחזרתית לאיסוף רקמות. כאן מתואר פרוטוקול המשתמש הן בחיתוך קורונלי של המוח והן במיקרודיסקציה בעזרת מחלל רקמות (tissue corer). התנובה והאיכות של ה-RNA הכולל שהתקבל מהדגימות שהופקו מאשרות את יעילותו של המהלך המתואר.

Non-לייזר מיקרוסקופית לכידת גישה עבור Microdissection של אזורים במוח דיסקרטית עכבר עבור בידוד RNA סך סידור Downstream הדור הבא והביטוי פרופיל גנטי

National Institute of Mental Health (NIMH), National Institutes of Health (NIH).  מחקר זה מציג אסטרטגיות מבוססות כימוגנטי ואור סגול כדי לאפשר הזזת פאזה צירקדית אמינה ביום.

השראת שינויי פאזה צירקדיים ביום באמצעות גישות כימוגנטיות וספקטרליות

גלה סרטונים נוספים