cromatografia su strato sottile

Fonte: Lara Al Hariri presso l'Università del Massachusetts Amherst, MA, USA

1. Preparazione delle SoluzioniEspandi

   Qui mostriamo la preparazione del laboratorio per 10 studenti che lavorano in coppia, con qualche eccesso. Si prega di regolare le quantità secondo necessità.

   • Prima di iniziare, indossa un camice da laboratorio, occhiali di sicurezza e guanti in nitrile. Lavorerai con esano, etanolo e acetato di etile, che permeano tutti i sottili guanti in nitrile in pochi minuti, quindi cambia prontamente i guanti se ottieni del solvente su di essi.
   • Prepara ~1 mg/mL soluzioni di butil fenil etere, fenolo, acido benzoico, aspirina, caffeina e paracetamolo. Utilizzare una bilancia analitica o una micropipetta per misurare circa 10 mg o 10,7 μL di butil fenil etere in una fiala di vetro da 20 mL. nota: Il butil fenil etere è un liquido a temperatura ambiente e deve essere maneggiato in una cappa aspirante.
   • Misura 10 ml di etanolo, aggiungilo alla fiala ed etichettalo '1 mg/mL di etere di butile fenile in etanolo'.
   • Prepara le altre cinque soluzioni, iniziando con il fenolo. Tarare un flaconcino di vetro da 20 ml e misurare 10 mg di fenolo.
   • Allora, aggiungi 10 ml di etanolo alla fiala e mescola la miscela con una bacchetta di vetro fino a quando il fenolo non si è completamente sciolto.
   • Tappa la fiala ed etichettala '1 mg/mL di fenolo in etanolo'. Ripetere questo processo per preparare soluzioni da 1 mg/mL di acido benzoico, aspirina, caffeina e paracetamolo. Conservare le fiale nel cofano dell'istruttore o in uno spazio di lavoro comune.
   • Prepara le tre soluzioni sconosciute di analgesici disponibili in commercio nell'etanolo. Le formulazioni delle compresse possono variare, quindi potresti voler pesare le compresse in anticipo per stimare la percentuale di peso dei principi attivi.
   • Usa un piccolo mortaio e un pestello per ridurre in polvere una compressa di paracetamolo. Misurare 10 – 15 mg di polvere in un flaconcino di vetro da 20 ml.
   • Quindi, aggiungi 10 ml di etanolo assoluto alla fiala e mescola la miscela con una bacchetta di vetro pulita per 1 – 3 minuti. Va bene se rimane del solido sul fondo della fiala.
   • Tappo la fiala ed etichettala 'Sconosciuto 1'. Scartare la polvere rimanente e pulire e asciugare accuratamente il mortaio e il pestello.
   • Usa 10 – 15 mg di una compressa di aspirina frantumata per preparare la soluzione sconosciuta 2 e 30 – 40 mg di una compressa frantumata contenente una miscela di paracetamolo, aspirina e caffeina per fare la soluzione sconosciuta 3 allo stesso modo. Archiviare le soluzioni sconosciute con le soluzioni note.
   • Prepara le miscele di solventi che gli studenti useranno come eluenti. Preparare 100 ml di una miscela di esano al 60% e acetato di etile al 40%. Misurare 60 mL di esano e versarlo in un becher da 250 o 400 mL. Aggiungere 40 mL di acetato di etile e mescolare il composto fino a renderlo omogeneo.
   • Etichetta un flacone da 150 ml '60% esano, 40% acetato di etile (v/v)' e usa un imbuto per trasferire la soluzione. Tappare la bottiglia prima di metterla da parte.
   • Produci 100 ml di una miscela di acetato di etile al 90% ed esano al 10%. Misurare 10 ml di esano e versarlo in un becher da 250 o 400 ml. Quindi, aggiungere 90 ml di acetato di etile e mescolare bene il composto.
   • Etichetta un flacone da 150 ml come '90% acetato di etile, 10% esano (v/v)'. Trasferite il composto nella bottiglia e tappatelo bene. Conservare i solventi e le miscele di solventi in un armadio per materiali infiammabili.
2. Preparazione del LaboratorioExpand
   • Prepara o ottieni contenitori per rifiuti di vetro, iodio e rifiuti organici non alogenati. Assicurati che ogni lavandino da laboratorio abbia una scorta di asciugamani di carta.
   • Collega e testa una piccola lampada UV da 254 nm in un'area condivisa.
   • Installa una piastra riscaldante in una cappa aspirante centrale, etichetta un becher da 500 ml 'camera di iodio' e posiziona circa 1 – 2 g di iodio nel becher. Coprilo con un grande vetro dell'orologio e posizionalo sulla piastra.
   • Posiziona i seguenti oggetti di vetro e attrezzature in ogni postazione di laboratorio degli studenti (suggeriamo che gli studenti lavorino in coppia):

     3 barattoli di vetro da 50 ml con tappo a vite

     3 cilindri graduati da 10 ml

     1 matita

     1 penna per etichettatura

     1 paio di pinzette

     1 Righello piccolo con incrementi metrici

   • Etichetta una bottiglia da 150 ml come '100% esano', versa circa 100 ml di esano nella bottiglia e chiudila ermeticamente. Metti via il flacone di esano e metti le miscele di esano e acetato di etile nel cappuccio del solvente con il flacone di esano puro.
   • Organizza le sei soluzioni conosciute e le tre soluzioni sconosciute su un banco condiviso.
   • Posiziona contenitori di capillari di vetro usa e getta, carte da filtro di medie dimensioni e piastre TLC nelle vicinanze.
   • All'inizio del laboratorio, assegna casualmente un composto sconosciuto a ciascun gruppo di studenti.
   • Una volta che alcuni studenti sono circa a metà del primo sviluppo, riscalda lo iodio a 110 °C sulla piastra.
   • Dopo il laboratorio, lascia raffreddare il becher e smaltisci i rifiuti di iodio in modo appropriato.