cromatografia su strato sottile

La cromatografia su strato sottile, o TLC, è una tecnica utilizzata per separare i composti organici in base alle differenze nelle loro polarità. Ci sono tre componenti di un sistema TLC: la fase stazionaria, il soluto e il solvente di sviluppo.

La fase stazionaria è la superficie su cui verranno separati i composti, che di solito è composta da gel di silice estremamente polare. I composti o miscele analizzati sono i soluti. Le soluzioni diluite dei soluti vengono individuate su un bordo della piastra utilizzando sottili capillari.

Il fondo della piastra viene quindi immerso nel solvente di sviluppo, che di solito è un solvente organico meno polare della fase stazionaria. Il solvente risale la piastra per azione capillare. Quando il solvente passa attraverso le macchie del soluto, porta con sé una parte di ciascun soluto. Questa miscela soluto-solvente è la fase mobile.

La parte superiore della fase mobile è chiamata fronte del solvente. Mentre la fase mobile viaggia lungo la piastra, le molecole di soluto e solvente si attaccano temporaneamente alla fase stazionaria in base alla loro polarità.

I soluti più polari sono fortemente attratti dalla fase stazionaria, quindi si attaccano più spesso e rimangono bloccati per un po'. Meno soluti polari si attaccano meno spesso e non rimangono bloccati a lungo. Ciò significa che un minor numero di soluti polari trascorre più tempo nella fase mobile rispetto a un maggior numero di soluti polari. In altre parole, meno soluti polari viaggiano più velocemente di più soluti polari.

Per ottenere una buona separazione tra i composti, il solvente dovrebbe essere abbastanza polare da spostare il soluto più polare. Ecco alcuni solventi comuni in ordine crescente di polarità. A volte, due solventi vengono combinati per ottenere la polarità desiderata.

Poiché la maggior parte dei composti organici sono bianchi o incolori, le lastre TLC di solito contengono un composto fluorescente. Sotto la luce UV, i composti organici appariranno come macchie scure sulla piastra luminosa.

Una volta visualizzati i composti, è possibile misurare la distanza percorsa e calcolare il fattore di ritardo, o R_f, per ciascuno di essi. Questo valore è la distanza percorsa dal soluto divisa per la distanza totale percorsa dalla fase mobile.

Se il solvente viene scelto correttamente, ogni soluto avrà un R_f nettamente diverso. Questo ci permette di identificare i composti componenti nelle miscele abbinando i valori di R_f ai composti noti.

In questo laboratorio, utilizzerai TLC per determinare l'R_f di diversi composti noti, quindi utilizzerai quei valori R_f per determinare l'identità di un composto sconosciuto.