Geni reporter

I ricercatori utilizzano i geni reporter per determinare quando e dove viene espresso un gene di interesse. Un gene reporter codifica per una proteina che può essere tracciata, come una proteina con un'attività enzimatica nota o una che è fluorescente.

L'espressione genica è controllata da sequenze cis-regolatorie situate a monte o a valle della regione codificante di un gene nel DNA.

Il modello e la tempistica dell'espressione genica possono essere determinati creando DNA ricombinante con un gene reporter sotto il controllo di una sequenza cis-regolatoria di interesse e introducendolo nelle cellule o in un organismo.

Questo gene ricombinante viene introdotto in diversi tipi di cellule e sia il gene di interesse che il gene reporter possono esprimersi.

Poiché il gene di interesse e il gene reporter hanno la stessa sequenza cis-regolatoria, sono espressi nelle stesse cellule e allo stesso tempo. Quindi, monitorando l'espressione del gene reporter, uno scienziato può tracciare dove viene espresso il gene di interesse.

Uno dei geni reporter più noti è quello che codifica per una proteina chiamata proteina fluorescente verde - o GFP.

La GFP è stata scoperta nella medusa Aequorea victoria. La proteina produce una fluorescenza verde sotto la luce ultravioletta, che consente ai ricercatori di tracciare la sua posizione all'interno di una cellula.

Ad esempio, per studiare l'espressione della β-tubulina in C. elegans, la sequenza codificante del gene della β-tubulina è stata sostituita dal gene gfp.

L'espressione del gene gfp è ora sotto il controllo del promotore del gene della β-tubulina.

Questo DNA ricombinante è stato introdotto nel verme utilizzando una microiniezione e il gene è stato espresso, in modo simile alla β-tubulina.

La posizione della GFP è stata monitorata utilizzando la microscopia a fluorescenza. Poiché la fluorescenza GFP è stata mostrata nei neuroni del recettore tattile, questo è probabilmente un sito in cui viene espressa la β-tubulina.