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Cromatografia liquida ad alte prestazioni: introduzione
Nella cromatografia liquida ad alte prestazioni o HPLC, la separazione avviene in una colonna analitica impaccata con una fase stazionaria legata a base di silice.
La separazione degli analiti avviene in base alle interazioni tra la fase stazionaria solida e la fase mobile liquida.
La superficie di silice è costituita anche da gruppi silanolo non reagiti, che causano interazioni polari che portano alla coda.
Quindi, i gruppi silanolo vengono fatti reagire con trimetilclorosilano per formare la fase stazionaria con tappo terminale.
Una colonna di protezione riempita con la stessa fase stazionaria viene posizionata prima della colonna analitica per proteggerla dalla contaminazione e viene sostituita regolarmente per aumentare la durata della colonna.
La polarità della fase mobile gioca un ruolo cruciale nell'eluizione degli analiti.
La cromatografia in fase normale utilizza una fase stazionaria polare e una fase mobile non polare.
Al contrario, la cromatografia in fase inversa utilizza una fase stazionaria non polare e una fase mobile polare.
La cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC), precedentemente nota come cromatografia liquida ad alta pressione, è una tecnica potente che vien…
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