Cromatografia liquida ad alte prestazioni: processo di eluizione

In uno strumento HPLC, più solventi sono immagazzinati in serbatoi di solvente che facilitano la variazione della composizione della fase mobile e, quindi, della sua polarità.

In primo luogo, il solvente viene filtrato e degasato per rimuovere i gas disciolti, prima di essere pompato.

Tra le pompe ad alta pressione utilizzate nell'HPLC, la pompa alternativa è la più utilizzata.

Questa pompa si basa su un piccolo pistone con due valvole di ritegno unidirezionali.

Quando il pistone viene spinto indietro, il solvente fluisce attraverso la valvola di ingresso e viene pompato fuori attraverso una valvola di uscita durante la corsa in avanti.

La composizione della fase mobile è costante nell'eluizione isocratica, mentre nell'eluizione a gradiente viene variata per facilitare la separazione.

Qui, pompe binarie indipendenti collegate a una camera di miscelazione regolano la portata e la polarità della fase mobile.

Infine, il campione viene iniettato nella fase mobile che scorre attraverso un iniettore ad anello prima di entrare nella colonna.