Homing delle cellule ematopoietiche del midollo osseo

Sommario

Questo articolo descrive un protocollo utilizzato per studiare l'homing delle cellule ematopoietiche alla loro nicchie nel midollo osseo.

Abstract

Homing è il fenomeno per cui trapiantato cellule ematopoietiche sono in grado di viaggiare da e per innestare o stabilire la residenza nel midollo osseo. Chemomkines vari recettori sono coinvolti nella homing delle cellule staminali ematopoietiche. [1, 2]

Questo documento descrive il protocollo classico homing utilizzati negli studi di cellule staminali ematopoietiche. In generale si tratta di isolare la popolazione di cellule il cui homing ha bisogno di essere indagato, colorazione questa popolazione con un colorante di interesse e iniettando queste cellule nel sangue di un animale destinatario. L'animale destinatario è poi sacrificata a un pre-determinato tempo dopo l'iniezione e il midollo osseo per valutare la percentuale o il numero assoluto di cellule che sono positivi per la tintura di interesse. In uno degli schemi più comuni sperimentale, l'efficienza di homing delle cellule ematopoietiche da due animali geneticamente distinte (un tipo di animale selvatico e il corrispondente knock-out) è confrontato. Questo articolo descrive il protocollo di homing delle cellule ematopoietiche nel quadro di come esperimento.

Protocollo

1. Iniziamo l'esperimento homing con l'estrazione di cellule da utilizzare per l'esperimento. Per questo esperimento in corso siamo interessati a scoprire se l'homing di midollo osseo intero le nicchie nelle ossa lunghe degli animali beneficiari è differente per le cellule del midollo osseo viene quindi prelevato da animali WT come C57BL/6J (WT) e quelli che sono transgenici fori per il recettore Lysophosphatidic 1 (LPAR1) (KO).
2. Prima di iniziare l'esperimento, che raccoglierà i materiali di cui abbiamo bisogno per questo esperimento. Nel nostro laboratorio tutte le dissezioni del mouse sono svolte in una cappa flusso laminare cultura dei tessuti, soprattu....

Discussione

Homing è il processo attraverso il quale le cellule del midollo osseo comprese le cellule staminali, le cellule staminali e differenziate, la loro strada nel midollo osseo dopo essere stata iniettata nel flusso del sangue o del midollo osseo di topi cavità. Come è evidente dalla definizione, uno scienziato può scegliere di studiare l'homing delle cellule staminali ematopoietiche, cellule progenitrici o cellule differenziate da immunofenotipizzazione identificato e isolato dalla separazione delle cellule. Di solito g.......

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
DPBS (Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline)	Mediatech, Inc.	21-031-CV
Serum bovino fetale sterile	Valley Biomedical, Inc.	BS3033
EDTA 0,5 M (pH 8,0)	Boston BioProducts	BM-150
Soluzione di Blu di Tripano	Mediatech, Inc.	25-900-CI
Tampone lisante ACK	Lonza Inc.	10-548E
Isoproprolol U.S.P.	Denison Pharmaceuticals, Inc
Soluzione colorante per cellule Vybrant DiD	Invitrogen	V22887
Soluzione colorante per cellule Vybrant DiI	Invitrogen	V22885