Tecnica necessaria per visualizzare il cuore pulsante di larve e adulti Drosophila Sono presentati. Ogni fase della vita richiede una metodologia diversa.
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Articolo metodologico
Visualizzare il cuore pulsante di Drosophila
In questo articolo
Sommario
Protocollo
Prima di iniziare
Cuori adulti
- Appena preparare emolinfa artificiale (AH) soluzione contenente 108mm Na +, 5mm K +, 2mm Ca 2 +, 8 mm MgCl 2, 1 mM NaH 2 PO 4, 4mm NaHCO 3, saccarosio 10mM, trealosio 5mm, HEPES 5mm (pH 7.1, tutti i reagenti da Prodotti chimici Sigma). Il saccarosio e trealosio dovrebbero essere aggiunti alla AH dalle soluzioni magazzino refrigerato al momento dell'uso, al fine di prevenire la contaminazione batterica.
- AH portare a temperatura ambiente e ossigenare la soluzione da bolle d'aria per almeno 15 min.
- Tirare dive....
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Discussione
Il modello Drosophila ha dimostrato di essere un potente strumento genetico che è stato usato per affrontare una serie di quesiti scientifici che spaziano dallo sviluppo embrionale all'apprendimento e alla memoria. Di recente questo organismo modello versatile è stato utilizzato per studiare la genetica della funzione cardiaca in tempo reale. Un certo numero di tentativi di quantificare fisiologia cardiaca in adulti Drosophila si sono basati sulle osservazioni fatte nei moscerini intatta attraverso la cuticola addom.......
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Ringraziamenti
KO è sostenuto da un finanziamento della American Heart Association.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Forbici da dissezione microchirurgiche a molla (curve) | Roboz Surgical Instruments Co. | RS-5611 | Adatte per tagli grossolani (Passaggio 3) |
| Forbici da dissezione microchirurgiche a molla (dritte) | Roboz Surgical Instruments Co. | RS-5620 | |
| Pinzette Dumont n. 55 | Fine Science Tools | 11295-51 | |
| Pinzette Dumont n. 5 | Fine Science Tools | 11295-10 | |
| Capillari di vetro, 100 µl | VWR international | 53432-921 | |
| Capillari di vetro, fini | Science Products | GB100T8P | |
| Tiracapillari | Sutter Equipment | P-97 | Sia i tiracapillari orizzontali che verticali sono utilizzabili |
| Tubulatura di plastica | Tygon | 1/16” diametro interno | per capillari da 100μl |
| Tubulatura di plastica | Tygon | 1/32” diametro interno | per capillari piccoli |
| Adesivo tissutale Histoacryl® | B. Braun Medical |
Riferimenti
- Ocorr, K., Reeves, N., Wessells, R. J., Fink, M., Chen, H. -S. V., Akasaka, T., Yasuda, S., Metzger, J., Giles, W., Posakony, J. W., Bodmer, R. KCNQ potassium channel mutations cause cardiac arrhythmias in Drosophila that mimic the effects of aging. Proc Natl Acad Sci U S A. 104, 3943-3948 (2007).
- Broadie, K. S., Bate, M.
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Ristampe e permessi
