Il processo di electrospinning polimeri per l'ingegneria tissutale e colture cellulari è affrontato in questo articolo. In particolare, il electrospinning di macromers fotoreattivo con capacità di elaborazione aggiuntive di photopatterning e multi-polimero electrospinning è descritto.
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Articolo metodologico
Electrospinning Ponteggi polimeri fibrosi per l'ingegneria tissutale e colture cellulari
In questo articolo
Sommario
Abstract
Poiché il campo dell'ingegneria tissutale evolve, c'è un'enorme richiesta per produrre materiali più idonei e tecniche di lavorazione al fine di affrontare le esigenze (ad esempio, la meccanica e vascolarizzazione), di organi e tessuti più intricate. Electrospinning è una tecnica popolare per creare ponteggi fibroso che imitano l'architettura e la scala di grandezza della matrice extracellulare nativa. Queste impalcature fibroso sono utili anche come substrato di coltura cellulare in quanto le fibre possono essere utilizzati per dirigere il comportamento cellulare, quali la differenziazione delle cellule staminali (vedi un'esauriente recensione di Mauck
Protocollo
A. singolo Polymer Electrospinning
- Prima di preparare la soluzione electrospinning, fare una soluzione di 0,5% in peso del fotoiniziatore, Irgacure 2959 (I2959), in acqua deionizzata, sciogliendo a 37 ° C per diversi giorni. Questo passaggio non è necessario se un polimero fotoreattivo non viene utilizzato.
- Combina methacrylated acido ialuronico (Meha, vedere Burdick et al. Per la sintesi), poli (ossido di etilene) (PEO, 900 kDa), e I2959 in acqua deionizzata per preparare una soluzione con una concentrazione finale del 2% in peso Meha, 3% in peso PEO e 0,05% in peso I2959. Utilizzare un vortice per miscelare la soluzione fino a quando n....
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Discussione
Electrospinning utilizzata per preparare i ponteggi fibroso da polimeri. Photocrosslinkable ponteggi a base di acido ialuronico sono stati utilizzati a titolo esemplificativo, in cui è necessaria l'esposizione alla luce per la reticolazione. Con l'uso di macromers reattivo, ad esempio Meha, i canali che hanno già dimostrato una maggiore distribuzione cellulare sono stati incorporati nel ponteggi con l'uso di una maschera durante photocrosslinking per formare impalcature macro e micro-porosa. Inoltre, due pol.......
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Ringraziamenti
Questo lavoro è stato supportato da una Fellowship dell'American Heart Association Predoctoral di JLI e istituti nazionali di Heath concedere R01AR056624.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti | |
|---|---|---|---|---|
| DAPI | Reagente | Invitrogen | D1306 | |
| I2959 | Reagente | Ciba Specialty Chemicals | ||
| PEO 200 kDa | Polysciences, Inc. | 17503 | ||
| PEO 900 kDa | Reagente | Sigma-Aldrich | 189456 | |
| Methacryloxethyl thiocarbamoyl rhodamine B | Reagente | Polysciences, Inc. | 23591-100 | Preparare la soluzione madre in DMSO |
| Kit di colorazione Live/Dead | Reagente | Invitrogen | L3224 | Contiene Calceina (colora le cellule vive di verde) ed etidio omodimero (colora di rosso le cellule morte) |
| Pompa per siringa | Attrezzatura | KD Scientific | KDS100 | Ne sono necessarie due per la filatura duale del polimero |
| Alimentatore | Attrezzatura | Gamma High Voltage | ES30P-5W | Ne sono necessari due per la filatura duale del polimero |
| Motore | Attrezzatura | Triem Electric Motors, Inc | 0132022-15 | Deve essere collegato a un mandrino su misura |
| Tachimetro | Attrezzatura | Network Tool Warehouse | ESI-330 | Utilizzare per monitorare la velocità del mandrino |
| Sistema di polimerizzazione UV Omnicure con adattatore collimatore | Attrezzatura | EXFO | S1000 | |
| Tubulazione in silicone | Attrezzatura | McMaster-Carr | 51135K151 | |
| Adattatore femmina con bloccaggio Luer | Attrezzatura | McMaster-Carr | 51525K293 | |
| Adattatore maschio con bloccaggio Luer | Attrezzatura | McMaster-Carr | 51525K143 | |
| Aghi | Attrezzatura | Fisher Scientific | 14-825-16H | |
| Coprioggetti | Attrezzatura | Corning | 2875-22 |
Riferimenti
- Burdick, J. A., Chung, C., Jia, X., Randolf, M. A., Langer, R. Controlled degradation and mechanical behavior of photopolymerized hyaluronic acid networks. Biomacromolecules. 6, 386-391 (2005).
- Baker, B. M., Gee, A. O., Metter, R. B., Nathan, A. S., Marklein, R. A., Burdick, J. A., Mauck, L. R.
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Ristampe e permessi
