Accoppiamento e stadiazione delle uova: un metodo per generare embrioni e ordinarli per fase di sviluppo

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Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Fonte: Hostelley T.L., et al. Preparazione del campione e analisi dei dati di espressione genica basati su RNASeq da Zebrafish. J. Vis. Exp. (2017)

L'articolo descrive un protocollo per generare embrioni di zebrafish attraverso l'accoppiamento naturale e l'ordinamento delle loro fasi di sviluppo. Il protocollo viene utilizzato ulteriormente per l'analisi delle cellule β pancreatiche utilizzando pesci transgenici.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Generazione di embrioni attraverso l'accoppiamento naturale

Coltura di embrioni fino a 3 mesi di età, maturità riproduttiva.
Segregatare i pesci maschi e femmine adulti del ceppo desiderato in vasche di accoppiamento divise la sera prima della raccolta degli embrioni e aggiungere 2 maschi e 3 femmine a ciascuna vasca.
NOTA: L'uso del ceppo reporter fluorescente transgenico insulin2a:mCherry ha permesso l'analisi delle cellule β pancreatiche.
Trasferire i pesci nella vasca di accoppiamento con acqua fresca del sistema e rimuovere il divisorio subito dopo l'accensione dell....

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ins2a:mCiliegia

ZIRC

ZL1483

Serbatoi di accoppiamento Set di serbatoi incrociati da 1,0 litri

Acquaree

ZHCT100

Microscopio da dissezione

Zeiss

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