Xenotrapianto derivato da paziente Zebrafish (zPDX): un modello di cancro

Abstract

Fonte: Wang L. et. al., Modello eterogeneo di xenotrapianto derivato dal paziente del cancro al pancreas utilizzando larve di pesce zebra come ospiti per la valutazione comparativa dei farmaci. J. Vis. Exp. (2019).

Questo video descrive la tecnica per creare un modello di xenotrapianto derivato da un paziente zebrafish. Nel protocollo campione, valutiamo l'efficacia dei farmaci Gemcitabina e Navitoclax sul modello di xenotrapianto di tumore pancreatico.

Protocollo

1. Iniezione di Sospensione Cellulare Mista nel Pesce Zebra

1. Aggiungere 10 volte la soluzione di tricaina nell'acqua E3 per anestetizzare le larve di zebrafish e trasferire le larve (dal passaggio 2.3) alla piastra di iniezione riempita con E3 modificato (E3 con 1 g/L di glucosio e 5 mmol/L di L-glutammina).
2. Riempire 25 μl di sospensione di cellule miste nell'ago dei microcapillari e inserire l'ago nel manipolatore per microiniezione.
3. Impostare la pressione e il tempo di iniezione. Iniettare 50-80 cellule (~8 nL) nel sacco vitellino del pesce zebra 48 hpf.

2. Coltura del pesce zeb....

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
L-glutammina	GIBCO	21051024
Gemcitabina	Gemzan
Metilcellulosa	sigma	Codice: M0262
Navitoclax (ABT-263)	Selleck	S1001	Inibitore di Bcl-xL
attrezzatura
Microiniettore	NARISHIGE
Microscopio confocale	LEICA	SP8	0,00