Mastectomia radicale: rimozione chirurgica dell'intera ghiandola mammaria da un topo per studiare la progressione del cancro

Abstract

Fonte: Katsuta, E., et al. Generazione di un modello di carcinoma mammario metastatico ortotopico murino ed esecuzione di mastectomia radicale murina. J. Vis. Exp (2018).

Questo video descrive una tecnica di mastectomia radicale, che viene utilizzata per la rimozione chirurgica dell'intera ghiandola mammaria da un topo per studiare la progressione del cancro.

Protocollo

1. Mastectomia

NOTA: Il momento della mastectomia è molto importante. Se viene eseguita troppo presto, non si verificano metastasi polmonari. Se viene eseguito troppo tardi, il tumore primario ha invaso i principali vasi sanguigni, il che rende difficile una resezione oncologica completa. Pertanto, sono stati testati più punti temporali per la mastectomia per determinare quale punto temporale ha prodotto l'equilibrio appropriato in attesa delle metastasi prima che la resezione diventasse troppo impegnativa. Dopo averlo fatto in oltre 50 esperimenti sui topi, è stato dimostrato che la mastectomia a 8 giorni dopo l'inoculazione delle cellule tumorali (o quando la dimensione del tumore raggiunge i 5 mm) era il punto temporale ideale per raggiungere quell'equilibrio.

1. Anestetizzare un topo con isoflurano al 2-4% e un flusso di ossigeno di 0,2 L/min fino a quando i topi respirano tranquillamente (2-3 minuti) e iniettare 0,05 mg/kg di buprenorfina nella spalla per via sottocutanea.
2. Trattenere gli arti del topo con del nastro adesivo da laboratorio e sterilizzare la sua pelle con clorexidina, iodio ed etanolo al 75%, utilizzando tamponi di cotone.
3. Praticare un'incisione cutanea di 5 mm a 2 mm a sinistra dalla cicatrice chirurgica che è stata praticata all'inoculazione iniziale delle cellule tumorali, utilizzando le forbici per microdissezione. Estendere l'incisione verso la radice dell'arto anteriore per rimuovere il tumore, la pelle compresa la cicatrice chirurgica e la lesione a contatto con il tumore, nonché il bacino linfonodale ascellare in cui il più delle volte non esiste alcun linfonodo visibile al momento della mastectomia. Assicurati di non danneggiare la vena ascellare.
4. Chiudere i difetti cutanei mediante sutura, utilizzando suture sterili 5-0 non assorbibili a forma di "Y".
5. Rimetti il topo in una gabbia pulita e monitoralo fino a quando non si è ripreso e si muove liberamente (dopo ~1-2 minuti). Se un animale non sembra essere in buona salute entro 24 ore dall'intervento, somministrare buprenorfina (0,2 mg/kg).
6. Rimuovere i punti di sutura in anestesia (con isoflurano al 2-4% e flusso di ossigeno di 0,2 L/min) 7 giorni dopo l'intervento.

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Forbici per micro dissezione	Roboz	RS-5983	Per l'inoculazione di cellule tumorali e la mastectomia
Pinza Adson	Roboz	RS-5233	Per l'inoculazione di cellule tumorali e la mastectomia
Porta aghi	Roboz	RS-7830	Per l'inoculazione di cellule tumorali e la mastectomia
5-0 suture di seta	guardare	774B	Per l'inoculazione di cellule tumorali e la mastectomia
Sterilizzante a secco (Germinator 500)	Braintree Scientifico	GER 5287-120V	Per l'inoculazione di cellule tumorali e la mastectomia
Clipper	Wahl	9908-717	Per l'inoculazione di cellule tumorali e la mastectomia