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Tutte le procedure che coinvolgono gli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria di JoVE.
1.18Imaging F-FDG PET e CT nei topi
ATTENZIONE: Utilizzare dispositivi di protezione quando si maneggia la radioattività. Seguire tutte le procedure normative applicabili quando si maneggia la radioattività.
- Posizionare la gabbia con i topi da fotografare su un letto caldo a 37 °C 1 ora prima dell'iniezione di 18F-FDG per ridurre il consumo di grasso bruno di 18F-FDG.
nota: Il digiuno dei topi per 4-16 ore può aiutare a ridurre il consumo miocardico di 18F-FDG.
- Pesa il mouse e registra il suo peso.
- Anestetizzare il topo utilizzando isoflurano al 2-3% in ossigeno a 0,5 - 2 L/min per 2 - 3 min utilizzando una camera di anestesia mantenuta a 37 °C. Assicurarsi che il topo sia stato anestetizzato pizzicando l'alluce; non si osserverà alcuna reazione se il topo è stato anestetizzato. Applicare un unguento oftalmico sugli occhi per prevenire la secchezza durante l'anestesia.
- Diluire 18F-FDG (109 min emivita radioattiva) in soluzione fisiologica sterile a una concentrazione di iniezione aggiustata per il decadimento di 70 - 75 μCi/100 μL.
nota: Seguire la dose di 18F consigliata dal produttore dello scanner PET per ottenere un imaging ottimale dello scanner.
- Prelevare 70 - 75 μCi con una siringa da insulina con un ago da 28 G, misurare la dose di radioattività utilizzando un calibratore di dose e registrare la misurazione e il tempo. Posizionare la siringa in un portasiringa di piombo.
nota: La quantità di radioattività 18F-FDG in ciascuna dose viene misurata con un calibratore di dose, che viene calibrato rispetto a un materiale di riferimento standard, come il cesio-137, secondo i protocolli del produttore. Viene registrato anche il tempo della lettura per determinare la correzione del decadimento.
- Bucherellare l'estremità distale della coda del topo e misurare la glicemia del topo con un glucometro.
- Scaldare la coda per 1 - 2 minuti con una garza imbevuta di acqua tiepida. Pulisci la coda con isopropanolo al 70% per dilatare la vena caudale appena prima dell'iniezione. Somministrare 100 μl di 18F-FDG (l'intero volume nella siringa) con un'iniezione in bolo attraverso la vena caudale laterale e registrare il tempo di iniezione. Misurare la dose rimanente nella siringa utilizzando il calibratore di dose e registrare la misurazione e il tempo.
nota: Ci sarà una certa quantità di sonda rimasta nella siringa. L'uso di siringhe da insulina è preferito rispetto alle siringhe collegate agli aghi tramite Luer lock a causa della ridotta quantità di dose intrappolata nella siringa/ago dopo la somministrazione dell'iniezione.
- Posizionare il topo iniettato nella camera di anestesia mantenuta sotto l'1,5 - 2% di isoflurano a 37 °C per consentire la distribuzione della sonda attraverso la circolazione sistemica del topo per 1 ora prima della scansione PET.
nota: Potrebbe essere utile svuotare la vescica prima della scansione per consentire una più facile visualizzazione 18F-FDG PET dei tumori impiantati nei fianchi inferiori del topo.
- Dopo 1 ora, posizionare il topo in una camera di imaging in anestesia con isoflurano a cono di naso e a 37 °C e fissare gli arti in posizione con nastro adesivo in posizione supina.
- Posizionare la camera di imaging nello scanner PET/CT.
- Acquisire le scansioni PET e TC come descritto nel manuale dello scanner PET/CT.
nota: Le immagini PET sono state acquisite per 600 s con una finestra di energia di 150 - 650 keV, ricostruite utilizzando la massimizzazione dell'aspettativa di massima verosimiglianza con correzioni per l'attenuazione dei fotoni, la normalizzazione del rivelatore e il decadimento dei radioisotopi (non è stata applicata una correzione di dispersione). Le immagini TC vengono acquisite in modalità continua per 50 s utilizzando una sorgente di raggi X da 50 kVp, 200 μA e un rivelatore a pannello piatto, e vengono ricostruite utilizzando l'algoritmo di Feldkamp.
- Al termine della PET/CT, rimuovere il topo dalla camera di imaging e lasciarlo riprendersi nella sua gabbia.