Saggio XTT: un test colorimetrico per valutare la vitalità cellulare e l'attività mitocondriale

Abstract

Trendowski, M., et al. Generazione e analisi quantitativa degli ultrasuoni pulsati a bassa frequenza per determinare la sensibilità sonica delle cellule neoplastiche non trattate e trattate. J. Vis. Exp. (2015)

Questo articolo descrive il protocollo per il test XTT, che è un test colorimetrico per valutare la vitalità cellulare e l'attività mitocondriale.

Protocollo

1. Saggio XTT per determinare la vitalità cellulare e l'attività mitocondriale delle cellule U937 e THP1 trattate

1. Prima dei saggi XTT, coltivare le cellule U937 e THP1 nelle stesse condizioni. Pretrattare le cellule con lo stesso intervallo di concentrazione di MeβCD per 30 minuti prima della sonicazione. Utilizzare gli stessi parametri degli ultrasuoni di prima, tranne per il fatto che le celle vengono ora sonicate utilizzando un intervallo di 1-3 impulsi di un secondo distanziati di un secondo l'uno dall'altro per sviluppare un intervallo di danni che il kit XTT deve valutare.
   nota: Molti di questi passaggi sono presi direttamente....

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Medium di Dulbecco modificato di Iscove con NaHCO3 e 25mM Hepes	Tecnologie per la vita	12440079
Disgregatore cellulare Branson SLPe 40kHz con Corno da 3" (25 mm)	Ultrasuoni Branson	Codice 101-063-726	Sonicazione dispositivo
Punta: Puntali con filtro da 100 μl e 1.000 μl	Stati Uniti d'America Scientific	1120-1840, 1126-7810
Micropipetta da 100 μl	Wheaton	851164
Micropipetta da 1000 μl	Wheaton	851168
Forma Scientific Acqua a doppia camera incubatrice incamiciata	Forma Scientifica	Telefono 3131
Kit per il saggio di proliferazione cellulare XTT	ATCC	30-1011K
Lettore di micropiastre a 96 pozzetti	Cole-Palmer	EW-13055-54
U937 Cellule di leucemia monocitica umana	ATCC	CRL1593.2
THP1 Cellule di leucemia monocitica umana	ATCC	TIB-202