Co-colture di sferoidi 3D biostampate magneticamente: un metodo per la co-coltura di cellule cancerose e fibroblasti

Abstract

Fonte: Noel P. et al.Preparazione e analisi metabolica di co-colture di sferoidi tridimensionali di cellule tumorali pancreatiche e fibroblasti. J. Vis. Exp. (2017)

Questo video spiega la biostampa magnetica 3D di cellule tumorali pancreatiche e fibroblasti co-coltivati. Le cellule tumorali del pancreas e le cellule dei fibroblasti pancreatici attivati vengono co-coltivate e magnetizzate utilizzando un assemblaggio di nanoparticelle biocompatibili, per generare sferoidi, sotto l'influenza delle forze magnetiche.

Protocollo

1.Coltura di sferoidi 3D per cancro al pancreas con bioprinting magnetico

1. Utilizzando la tecnica standard di coltura tissutale asettica, le cellule di interesse vengono coltivate in un pallone T75 a una confluenza del 70-80% in terreni di crescita appropriati.
   nota: Tipicamente, sono state raccolte 5-7 × 10⁶ celle da un pallone di T75 confluente al 70-80%. In questo studio sono stati utilizzati due diversi tipi di cellule: Patu8902 (cellule tumorali pancreatiche) e cellule PS1 (cellule stellate pancreatiche attivate). Entrambe le linee cellulari sono state coltivate nel terreno 1640 del Roswell Park Memorial Institute (RP....

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
0,05% tripsina EDTA	sigma	Codice 25300-054
Piastra repellente per celle a 96 pozzetti	USA Scientifico/ Griener Bio-One	Codice 655970	cartilagine di accrescimento sferoidale
Cellometria Vetrini per conteggio cellulare	Nexcelom	CHT4-SD100-002
n3D Unità sferoidale magnetica	Bioscienze Nano3D	655841	Parte del kit di biostampa Spheroid
Tenuta sferoidale magnetica n3D Guida	Bioscienze Nano3D	655841	Parte del kit di biostampa Spheroid
n3D NanoShuttle-PL	Bioscienze Nano3D	655841	Parte del kit di biostampa Spheroid: conservare a 4 °C
Celle Patu8902	Stock da laboratorio		Adenocarcinoma duttale pancreatico cellule
Celle PS1	Stock da laboratorio		cellule stellate pancreatiche attivate
RPMI1640	Gibco	Codice 11875-093	terreni di crescita per cellule, sferoidi