Modello murino sperimentale di melanoma metastatico: una piattaforma per studiare il potenziale metastatico delle cellule di melanoma nei polmoni

Abstract

Fonte: Joshua J. Timmons et al. Iniezione di cellule di melanoma murino singenico per determinare il loro potenziale metastatico nei polmoni. J. Vis. Exp. (2016)

In questo video, le cellule di melanoma vengono iniettate per via endovenosa attraverso la vena della coda nel modello murino. Le cellule del melanoma viaggiano ulteriormente attraverso il sistema circolatorio, adattandosi al microambiente distante e causando metastasi in organi come i polmoni.

Protocollo

Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.

1. Preparazione delle cellule B16-BL6

1. Rimuovere le piastre per colture cellulari dall'incubatore a 37 gradi e posizionarle in una cappa sterile. Le placche devono essere confluenti per circa il 70% con le cellule di melanoma murino B16-BL6. Una maggiore confluenza può alterare il potenziale metastatico delle cellule.
2. Aggiungere 1 mL di tripsina-EDTA allo 0,05% per piastra, lasciare riposare per 1 minuto, quindi aspirare la solu....

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
tripsina	Corning	MT25052CV
RPMI 1640 Medio	Corning	MT15040CM
Ematocitometro a contrasto di fase	Hausser	02-671-54
Siringhe da insulina Micro-Fine IV	Bd	14-829-1D
Tamponi sterili per la preparazione dell'alcol	Fisherbrand	Codice 22-363-750
Mouse Resbrake	Braintree Scientifico	NC9999969	La scelta del sistema di ritenuta dipende dall'età/taglia dei topi
termoforo	Harry Schein	NC0012697	opzionale