Articolo metodologico

Induzione e punteggio clinico dell'epatite cronica-recidivante encefalomielite autoimmune sperimentale

DOI:

10.3791/224

4 luglio 2007

In questo articolo

Sommario

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Questo video dimostra il punteggio di induzione e clinica di un modello animale di sclerosi multipla: cronico-recidivante encefalomielite autoimmune sperimentale nei ratti DA. La malattia, indotta da immunizzando topi con una emulsione che contiene tutto midollo spinale di ratto e adiuvante completo di Freund, presenta segni clinici simile alla malattia umana.

Abstract

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La sclerosi multipla (SM) è una malattia infiammatoria cronica del sistema nervoso centrale (SNC) che colpisce generalmente i giovani adulti. E 'caratterizzato da demielinizzazione e spaventando gliali nelle aree disseminate nel cervello e nel midollo spinale. Queste lesioni alterano la conduzione nervosa e indurre i deficit neurologici invalidanti che variano con la posizione delle placche demielinizzati nel sistema nervoso centrale (es. paraparesi, paralisi, cecità, incontinenza).

Encefalomielite autoimmune sperimentale (EAE) è un modello per la SM. EAE è stato indotto accidentalmente negli esseri umani durante la vaccinazione contro la rabbia, con virus coltivati ​​su coniglio midollo spinale. Residui di iniezione spinale con il virus inattivato indotta la malattia SNC. A seguito di queste osservazioni, un primo modello di EAE è stata descritta nel primati non umani immunizzati con un sistema nervoso centrale omogenato da fiumi e Schwenther nel 1935. EAE da allora è stato generato in una varietà di specie e possono seguire corsi diversi a seconda della specie / ceppo e immunizzante antigene utilizzato. Per esempio, immunizzando topi Lewis con proteina basica della mielina in emulsione con adiuvante induce un modello di EAE acuta, mentre lo stesso antigene induce una malattia cronica nelle cavie.

Il modello di EAE qui descritto è indotta da immunizzando topi DA contro il midollo spinale nel ratto DA emulsione in adiuvante completo di Freund. Ratti sviluppare una paralisi flaccida ascendente entro 7-14 giorni post-vaccinazione. Segni clinici seguono una sclerosi multipla recidivante-remittente per diverse settimane. Patologia grandi spettacoli infiltrati immunitario del sistema nervoso centrale e placche demielinizzazione. Considerazioni speciali per prendersi cura di animali con EAE sono descritte alla fine del video.

Protocollo

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Induzione e monitoraggio delle patologie cronico-recidivante EAE

L'emulsione è una miscela 1:1 di antigene in soluzione acquosa aggiunto integrato adiuvante completo di Freund. E 'molto importante aggiungere l'antigene per l'adiuvante e non viceversa!

Ci sono un sacco di rifiuti quando si effettua l'iniezione e una emulsione. Sempre preparare 1,5 o 2 volte più di quello che vi serve.

Usa mortaio in autoclave, pestello, siringhe di vetro, e ponti. Tutte le plastiche devono essere sterili. La preparazione può essere fatta su un banco di la....

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Discussione

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Ci sono alcune considerazioni importanti per questo protocollo.

La genetica dei topi DA varierà leggermente a seconda di quale allevatore sono acquistato. Queste differenze possono aumentare o diminuire la suscettibilità dei topi EAE a induzione. Se il vostro ratti sono più suscettibili alle EAE si vuole ridurre la forza della vaccinazione utilizzando non integrato completo di Freund adiuvante o adiuvante incompleto di Freund. È anche possibile ridurre la quantità di emulsione iniettati o diluire l'omogeneizzato midollo spinale .......

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Dichiarazioni

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CB e KGC sono co-fondatori e consulenti per Airmid Inc.

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Completa Freund' sReagenteFisher ScientificDF 311-360-5Prodotto da Difco
Mycobacterium tuberculosis H37RaReagenteFisher ScientificDF3114-33-8Prodotto da Difco
DA rattoAnimaleHarlan LaboratoriesFemmine, di 7-9 settimane.
Siringhe in vetro - 5 mlToolFisher Scientific14-823-10 B
Ponte in metallo - 18GToolFisher Scientific14-825-17L
Siringhe in plastica Luer Lok - 3 mlToolBD Biosciences309585
Aghi - 20G 1 1/2ToolFisher Scientific14-826-5C
adiuvante

Ristampe e permessi

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Tag

EAE recidivante cronicamodello di ratto DAomogenato di midollo spinaleadiuvante completo di Freundsistema di punteggio clinicoparalisi flaccida ascendentedecorso recidivante remittentedemielinizzazione del SNCmodello animale di sclerosi multipla

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