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Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.
1.
NOTA: La stimolazione elettrica viene erogata durante il periodo di assorbimento del 2-deossi-2-[18F]fluoro-D-glucosio (FDG). Per questo protocollo, la stimolazione è stata erogata con uno stimolatore isolato, con stimolazione elettrica ad alta frequenza (130 Hz) in modalità corrente costante, 150 μA, e un'ampiezza dell'impulso di 100 μs.
- Configurazione dello stimolatore DBS
- Prepara lo stimolatore isolato e i cavi necessari in una stanza ampia e silenziosa, con spazio sufficiente per le gabbie degli animali e un'influenza minima di stimoli potenzialmente disturbanti.
- Collegare i fili di stimolazione alle girelle per consentire agli animali di muoversi liberamente all'interno delle loro gabbie e allo stimolatore.
- Impostare i parametri di stimolazione in base alle esigenze dello studio.
- Utilizzare un oscilloscopio per controllare la modalità corrente, la frequenza e l'ampiezza dell'impulso. Confermare la forma d'onda bifasica con una forma di impulso rettangolare.
- la sessione di imaging dell'animale senza stimolazione (D1) e fino alla sessione due giorni dopo con stimolazione (D2), sottoponi gli animali a un protocollo di assuefazione quotidiana (45 min/giorno) per abituarli al sistema di stimolazione e alla manipolazione dell'operatore, evitando risposte di stress indesiderate in D2. Collega il sistema di stimolazione a ciascun animale, ma senza attivare la stimolazione.
- Una volta che lo stimolatore è stato impostato e l'animale è stato iniettato con FDG, collegare la girella agli elettrodi e accendere lo stimolatore.
- Dopo 45 minuti, spegnere lo stimolatore, scollegare l'animale dalla girella e trasferirlo rapidamente in una camera di induzione dell'anestesia per iniziare l'acquisizione dell'immagine della tomografia a emissione di positroni (PET).