L'innesto muscolare come strategia chirurgica per ripristinare il flusso sanguigno al cervello del topo dopo l'ictus

Abstract

Fonte: Paro, M. R., et.al. Un modello per il trattamento dell'encefalomiosinanangiosi dopo ictus indotto dall'occlusione dell'arteria cerebrale media nei topi. J. Vis. Exp. (2022).

Questo video mostra una procedura chirurgica per innestare un muscolo vascolarizzato sulla superficie cerebrale dopo un'occlusione transitoria dell'arteria cerebrale media. L'innesto promuove la formazione di nuovi vasi sanguigni nella regione ischemica, migliorando l'apporto di ossigeno e nutrienti. Nel tempo, il muscolo integrato supporta la sopravvivenza neuronale e aiuta nel recupero post-ictus.

Protocollo

Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.

1. Chirurgia dell'encefalomiosinanangiosi (EMS)
   1. Dopo 60 minuti di occlusione dell'arteria cerebrale media (MCAo), randomizza i topi in gruppi solo MCAo o MCAo + EMS. Eseguire l'EMS 4 ore dopo MCAo (gruppo MCAo + EMS) o un intervento chirurgico fittizio per esperimenti selezionati (gruppo solo EMS). Indossare un nuovo paio di guanti chirurgici sterili prima dell'intervento.
      NOTA: I topi si sono ripresi dall'anestesia dopo 60 minuti di MCAo e sono stati ri-anestetizzati prima dell'intervento EMS.
   2. Per i gruppi che ricevono EMS (MCAo + EMS o gruppi solo EMS), praticare un'incisione cutanea di 10-15 mm con le forbici, estendendosi da 1-2 mm rostrale all'orecchio destro a 1-2 mm caudale all'occhio destro.
      NOTA: Sono state utilizzate forbici sterili per prevenire danni accidentali ai muscoli temporali sottostanti.
   3. Ritrarre i lembi cutanei utilizzando i morsetti e identificare visivamente il muscolo temporale e il cranio.
   4. Sezionare senza mezzi termini il muscolo temporale lontano dal cranio usando le forbici con una tecnica di diffusione. Eseguire una miotomia di 2-3 mm diretta ventralmente lungo il bordo caudale del muscolo per facilitare la riflessione ventrale.
   5. Eseguire una craniotomia di ~5 mm di diametro nel cranio sotto il muscolo temporale riflesso utilizzando un micro trapano.
   6. Rimuovere la dura madre con una pinzetta per esporre la superficie pial del cervello. Usare estrema cautela per evitare lesioni accidentali al cervello.
   7. Sutura il bordo dorsale del muscolo temporale al tessuto sottocutaneo del lembo cutaneo dorsale con filamenti monocristalli 6-0, rendendolo a filo con la corteccia cerebrale esposta.
   8. Chiudere l'incisione cutanea con sutura monofilamento 6-0. Rimetti il mouse nella sua gabbia e monitora fino al recupero dall'anestesia. Riporta il mouse nella sua struttura abitativa.

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
6-0 sutura monocryl	Ethilon	697G
70% etanolo per sanificare la superficie operativa	Walgreen
Bupivacaine 0.25% soluzione	Midwest Vet
Morsetti per retrazione tissutale	Roboz
Doccal sutura con rivestimento in nylon	Doccal corporation Sharon MA	602145PK10Re
Termoforo elettrico per superficie
Anestesia con isoflurano	Piramal Critical Care Inc
Apparecchio per la somministrazione di isoflurano	-- B6Surgivet (Isotech 4)
Micro trapano	Harvard Apparatus
Pinzette per microdissezione, curve x2	Piramal Critical Care Inc
Pannello di angiogenesi del topo arrat	R& D biotech	ARY015
Cacciavite ad ago	Ethilon
Operativo microscopio	Olympus Superficie operatoria
	Olympus
Forbici chirurgiche	Roboz

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