Stimolazione ad alta frequenza per migliorare l'attivazione neuronale e la neurogenesi nel giro dentato di topo

Abstract

Fonte: Zhao, Z. et al. Un metodo invasivo per l'attivazione del giro dentato del topo mediante stimolazione ad alta frequenza. J. Vis. Exp. (2018)

Questo video mostra il protocollo per fornire una stimolazione cerebrale profonda ad alta frequenza a un giro dentato dell'ippocampo di topo, descrivendo in dettaglio i suoi effetti sull'attivazione neuronale, sulla plasticità sinaptica e sulla neurogenesi.

Protocollo

Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.

1. Erogazione di stimolazione ad alta frequenza
   1. Collega l'elettrodo impiantato nel cervello del topo a uno stimolatore programmabile tramite elettrocateteri. Configurare l'interfaccia software come illustrato nella Figura 1. Impostare i parametri di stimolazione ad alta frequenza (HFS) su 6 serie di 6 treni di 6 impulsi a 400 Hz (Figura 2B, 100 ms tra i treni, 20 s tra le serie). Impostare l'intensità di stimolazione su 200 μA.
   2. Erogare un HFS per il periodo di tempo desiderato come impostato. Erogare la stimolazione 2 volte al giorno alle 8:00 e alle 20:00.
   3. Per il gruppo di controllo, impiantare elettrodi nei topi e non eseguire la stimolazione.
   4. Per la colorazione c-fos, stimolare i topi sperimentali in modo acuto (2 volte al giorno). Per l'etichettatura della bromodeossiuridina (BrdU), dividere i topi sperimentali in un gruppo di stimolazione acuta (applicato 2 volte al giorno) e un gruppo di stimolazione cronica (applicato 10 volte in 5 giorni, 2 volte al giorno). Durante il corso della stimolazione, assicurarsi che il mouse sia sveglio. Ricordarsi di assicurarsi che gli elettrocateteri non siano attorcigliati.
      NOTA: All'ultimo giorno della procedura, i topi del gruppo di stimolazione acuta sono stati stimolati contemporaneamente.
   5. Al termine della stimolazione, scollegare con cautela il perno dell'elettrodo dal portaelettrodo e dal connettore del sistema di registrazione.

Risultati

Figure1. Interfaccia e parametri del multistimolatore. Lo stimolatore è stato collegato ad un convertitore digitale-analogico e attivato da un software proprietario. Il tipo di stimolo della stimolazione ad alta frequenza (...

Materiali