Somministrazione endovenosa di nanoparticelle terapeutiche in un modello di glioblastoma murino

Abstract

Fonte: Kim, B. D., et al. Consegna di nanoparticelle di un carico utile di oligonucleotidi in un modello animale di glioblastoma multiforme. J. Vis. Exp. (2024)

Questo video mostra l'iniezione endovenosa di nanoparticelle terapeutiche in un topo portatore di glioblastoma. Il metodo consente la somministrazione mirata attraverso la barriera emato-encefalica e supporta l'imaging non invasivo per valutare la biodistribuzione delle nanoparticelle e l'efficacia terapeutica nei tumori cerebrali.

Protocollo

Tutte le procedure che coinvolgono modelli animali sono state esaminate dal comitato istituzionale locale per la cura degli animali e dal comitato di revisione veterinaria JoVE.

1. Somministrazione di MN-anti-miR10b

NOTA: In questo studio, le iniezioni sono state effettuate una volta alla settimana per 6 settimane a partire da 7 giorni dopo l'impianto, ma lo stesso protocollo può essere utilizzato per varie frequenze di iniezione.

1. Pesare il mouse e calcolare il volume di MN (nanoparticella magnetica)-anti-miR10b da somministrare al topo. Le dosi di MN-anti-miR10b sono somministrate a 20 mg di Fe (ferro)/kg nei modelli murini di GBM (glioblastoma multiforme). Ad esempio, un topo di 20 g riceve un dosaggio di 80 μL di 5 mg Fe/mL di MN-anti-miR10b. I topi di controllo ricevono un volume uguale di PBS (soluzione salina tamponata con fosfato) coerente con questo schema di dosaggio.
2. Preparare una siringa da 28 G con la dose di MN-anti-miR10b e assicurarsi che non ci siano bolle nella soluzione iniettabile.
3. Anestetizzare il topo con isoflurano al 2%-4% per induzione e 1,5%-2% per il mantenimento con una portata di 1,5 L/min in una scatola di induzione. Sposta il mouse su un cono nasale e continua a somministrare l'anestesia. Controllare la profondità dell'anestesia e applicare un unguento veterinario.
4. Sterilizzare la coda con una salvietta di isopropanolo al 70% e lasciare asciugare l'alcol in eccesso.
5. Ruota la coda per posizionare le vene caudali laterali nella parte superiore della coda. Quindi, mirando alla vena, inserire l'ago nella coda e stabilire il vuoto tirando indietro lo stantuffo.
6. Inserire l'ago fino a quando il sangue non entra nella siringa, indicando l'ingresso riuscito nella vena.
7. Iniettare lentamente MN-anti-miR10b e ritrarre l'ago dopo la consegna completa. Applicare pressione sul sito di iniezione con una garza fino a quando l'emorragia non si ferma.
8. Rimuovere il mouse dal cono. Monitorare il topo fino a quando non si è completamente ripreso e ambulatoriale.
   NOTA: La somministrazione in bolo di nanoparticelle può causare distress respiratorio. Monitorare attentamente il mouse e applicare immediatamente leggere compressioni toraciche se ci sono segni di distress respiratorio.

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
Topi "J:NU" nudi atimici		Jackson Laboratory RRID:IMSR_JAX:007850	Salvietta imbevuta
alcol isopropoyl	modello	MW-APL	Salvietta antisettica topica per l'impianto del tumore e l'iniezione della vena caudale
Isoflurano	Covetrus	11695067772	Anestesia
Vaporizzatore di isoflurano	SOMNI Scientific	VS6002	Apparecchio per anestesia
Siringa da insulina 1CC 29G X 1/2"	Becton, Dickinson	324704	Siringa per iniezione di D-luciferina e iniezione di nanoparticelle nella vena caudale

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