Articolo metodologico

Applicazione della Luce cured resina adesiva dentale per montaggio elettrodi o sonde Microdialisi negli esperimenti cronica

DOI:

10.3791/249

⸱

30 luglio 2007

 ,  , 
1Laboratory for Behavior and Dynamic Cognition, Brain Science Institute, RIKEN, 2Laboratory for Biolinguistics, Brain Science Institute, RIKEN

In questo articolo

Sommario

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In questo rapporto, proponiamo una nuova applicazione di resine dentali fotopolimerizzabili per la base di montaggio degli elettrodi o sonde di microdialisi in esperimenti cronica. Questo materiale permette legame diretto al cranio.

Abstract

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In esperimenti di registrazione cronica, resine dentarie autopolimerizzante acrilici sono stati usati come una base di montaggio di elettrodi o di microdialisi-sonde. Dal momento che questi acrilici non legame con l'osso, le viti sono stati utilizzati come ancore. Tuttavia, in piccoli animali da esperimento, come fringuelli o il mouse, i loro crani sono molto fragili e non possono tenere con successo le ancore. In questo rapporto, proponiamo una nuova applicazione di resine dentali fotopolimerizzabili per la base di montaggio degli elettrodi o sonde di microdialisi in esperimenti cronica. Questo materiale permette legame diretto al cranio. Pertanto, le viti di ancoraggio non sono necessarie e campo chirurgico può essere ridotto notevolmente. Le esperienze passate dimostrano che l'effetto di incollaggio mantiene più di 2 mesi. Finestra di resina convenzionale di tempo in cui i materiali sono flessibili e funzionali è a pochi minuti. Tuttavia, la finestra del tempo di lavoro per questi adesivi dentali è significativamente più ampio e regolabile.

Protocollo

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Fase 1. Preparazione di impianto sonda

  1. Anestesia (non mostrato nel video)

    Anestetizzare ogni uccello con un'iniezione interperitoneal di ketamina (12,5 mg / kg di peso corporeo) e xilazina (25 mg / kg) miscela per produrre un livello costante di anestesia chirurgica.

  2. Fissare una testa ad un telaio stereotassico

    Usa Xylocaine (TM) gelatina per ridurre i dolori locali bar di pressione all'orecchio '. La testa di uccello è fissato in un apparato stereotassico composto da barre di orecchio e di un supporto becco che tiene la testa con un angolo di 45 °. Durante la chirurgia stereotassica per l'impianto, caldo il corpo di uccello da pad chirurgica con controllo termico (temperatura = 34 ~ 36 ° C).

  3. Disinfettare l'area chirurgica

    Disinfettare il campo chirurgico con isodine (TM) prima della chirurgia.

Fase 2. Posizionamento stereotassico

  1. Punto di riferimento di allineamento

    Allineare sonda fittizio (vetro micropipetta) al Lambda (Y-punto) e il punto Y-point con il colorante pieno di pipette. Rimanenti Destrano-TMR dello studio tracciante ultima è stata utilizzata nel video.

  2. Incisione della pelle

    Togliere la pelle ed esporre la superficie del cranio. Poi, pulire la superficie del cranio con tamponi di cotone.

  3. Posizionamento di cannula fittizio (in direzione orizzontale)

    Spostare la cannula fittizio al sito di destinazione (AP asse laterale e di coordinamento)

  4. Craniotomia piccole e incisione della dura madre.

    Utilizzare una pinza sottile per craniotomia e un sottile ago per iniezione (30 G) per incisioni della dura madre. Poi, pulire la superficie del cranio.

  5. Posizionamento finale (impianto) di cannula dummy

    Individuare la punta della cannula guida allo 0,30 mm al di sopra della microdialisi sonda destinata regione di destinazione. Infine, pulire la superficie del cranio di nuovo, perché una superficie asciutta e pulita è necessaria per l'incollaggio dura.

Fase 3. Pretrattamento della superficie cranica

(La procedura simile per "restauro diretto riempimento" del prodotto dentale deve essere impiegato.)

  1. Primer trattamento
    1. Mix PRIMAR liquido A con B su un piatto.
    2. Applicare il composto sulla superficie del cranio con un pennellino.
    3. Lasciare agire per 30 secondi.
    4. A secco con flusso d'aria mite. (Non lavare.)

  2. Applicazione di legante
    1. Applicare il collante sulla superficie del cranio con un pennellino.
    2. Applicare una leggera corrente d'aria. (Non lavare.)
    3. Fotopolimerizzare per 20 secondi.

Fase 4. Montaggio in resina composita

  1. Resina montare con plugger pianura

    Se un plugger Pianura non è disponibile, un micro-spatola può essere utilizzato.

  2. Fotopolimerizzazione
  3. Incrementale di montaggio

    Incrementale di montaggio si consiglia di assicurare la reazione completa della resina.

    Per il montaggio incrementale, applicare collante prima di ogni montaggio.

  4. Stampo la resina composita e fotopolimerizzabile per la finale di indurimento.
  5. Fine della chirurgia

Pulire l'area chirurgica, si applicano agli antibiotici (gentamicina pomata), e rimuovere l'animale dal fuoco stereotassica. Quindi, tenere l'animale in una camera termo-controllati (temperatura = 33-35 ° C) per il recupero post-anestetico.

Come mostrato nel video, nessun comportamento anomalo è stato osservato in qualsiasi degli animali il giorno successivo dopo l'intervento.

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Discussione

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Rispetto per l'applicazione dei tradizionali resine acriliche cura di sé, la tecnica ha introdotto una serie di vantaggi importanti:

1. Legame diretto:
Acrilico curare sé può essere attaccati all'osso per un po 'ma non aderisce alle ossa. Pertanto, le viti di ancoraggio sono tenuti a fissare una base di montaggio (vedi Figura 2A). Al contrario, la resina fotopolimerizzazione possibile legame con l'osso direttamente le viti in modo non sono necessari (Figura 2B). Pertanto, il volume di base di montaggio ...

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Dichiarazioni

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Gli esperimenti sono stati effettuati in conformità con le linee guida per la sperimentazione animale del cervello Science Institute, RIKEN (RIKEN-BSI) e dell'Istituto animale comitato etico li ha approvati.

Ringraziamenti

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Ringraziamo i nostri colleghi in RIKEN-BSI per il loro supporto e consigli gentilmente proficuo nel corso di questo lavoro. Vorrei esprimere il mio sincero apprezzamento al Prof. Shigemi Mori, il professor G bor Juh tg, Drs. Kiyoji Matsuyama, Katalin AK kesi e rp d Dobolyi che mi ha consigliato di metodo di studio microdialisi durante il corso di laurea presso l'Università Graduate for Advanced Studies, in Giappone. Infine, ringraziamo il Sig. Chris Sarnecky e il Dr. Akitsugu Takasu per il loro supporto per la registrazione video.

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Materiali

1A fotografia mostra sonda microdialisi (a), un dado cieco (b) e una cannula guida (c). In questa foto, la cannula guida è circondata da resina dentale che aderisce al cranio direttamente. Foto B mostra un uccello durante la perfusione di droga. Sulla sommità della testa, c'è una sonda microdialisi che è collegato a un tubo tefron fine. Barre di scala = 1 cm per A e 2 cm per B, rispettivamente.

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Figura 1 - Le fotografie di una sonda da microdialisi (A) e un uccello durante la perfusione di droga (B)

Riferimenti

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  1. Adell, A., Artigas, F. In vivo Brain microdialysis: Principles and applications. In Vivo Neuromethods: Neuromethods. Boulton, A., Baker, G., Bateson, A. 32, Humana Press Inc. Totowa. 325-357 (1998).
  2. Kendrick, K. Microdialysis in large unrestrained animals: neuroendocrine and behavioral studies of acetylcholine, amino acid, monoamine and neuropeptide release in the sheep. Microdialysis in the Neuroscience. Robinson, T., Justice, J., Bateson, A. 7, Elsevier. Amsterdam. 327-348 (1991).
  3. Oakley, B., Schafer, R. Experimental Neurobiology: A laboratory Manual. , University of Michigan Press. Ann Arbor. (1978).
  4. Okumura, T., Yamashita, Y., Okanoya, K., Tani, J. Function of the sensori-motor nucleus NIf in generation of complex syntactical song in the Bengalese Finch I. A Biological study. Soc. Neurosci Abst. 33, (2007).
  5. Boulton, A., Baker, G. The relation of brain electrical activity to behavior. In Vivo Neuromethods: Neuromethods. Robinson, T., Bateson, A. 32, Humana Press Inc. Totowa. 325-357 (1998).
  6. Yamashita, Y., Okumura, T., Okanoya, K., Tani, J. Function of the sensori-motor nucleus NIf in generation of complex syntactical song in the Bengalese finch. Proceeding of the 2nd International Symposium on Mobiligence, , 101-104 (2007).

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Montaggio degli elettrodisonda per microdialisifissaggio del craniochirurgia stereotassicaapplicazione del primeragente legantemontaggio incrementaleunit a luce LED

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