Method Article

Topo iniezione parete della vescica

DOI:

10.3791/2523

July 12th, 2011

In This Article

Summary

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Vescica iniezione del mouse muro è un approccio utile per lo studio delle cellule staminali ortotopicamente della vescica e della biologia del cancro. Questo metodo microchirurgico delicato può essere padroneggiato con tecnica attenta e pratica.

Abstract

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Vescica iniezione del mouse muro è una tecnica utile per lo studio dei fenomeni ortotopicamente vescica, tra cui cellule staminali, muscolo liscio, e la biologia del cancro. Prima di iniziare le iniezioni, l'area chirurgica devono essere pulite con acqua e sapone e soluzione antisettica. Strumenti chirurgici devono essere sterilizzati prima dell'uso e tra ogni animale. Ogni mouse è posta sotto anestesia per via inalatoria isoflurano (2-5% per l'induzione, 1-3% per la manutenzione) e la sua vescica esposti facendo una incisione addominale mediana con le forbici. Se la vescica è piena, è parzialmente decompresso dalla spremitura delicata tra due dita. La sospensione di cellule di interesse è intramurale iniettato nella parete della cupola della vescica con un 29 o 30 gauge e 1 cc o più piccoli siringa. La ferita viene poi chiusa con clip ferita e il topo ha permesso di recuperare su un blocco del riscaldamento. Parete vescicale iniezione è una tecnica microchirurgica delicato che può essere masterizzato con la pratica.

Protocol

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1. Topo iniezione parete della vescica

Scelta del ceppo di topi, l'età e il sesso è dettata da esigenze sperimentali. Noi usiamo topi tra 8 e 12 settimane di età, dal momento che questo è una finestra di maturità immunologica prima senescenza. Come regola generale, i topi dovrebbero arrivare almeno una settimana prima di manipolazione sperimentale al fine di evitare fattori di confondimento indotta da stress.

  1. Pulire la superficie del tavolo operatorio con acqua e sapone.
  2. Pulire la superficie del tavolo operatorio con Swipes Cide o salviette antisettico.
  3. Autoclave pulizia degli strumenti chirurgici prima di u....

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Discussion

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Vescica iniezione del mouse parete permette l'impianto di cellule specifiche in determinati settori della parete vescicale. Questa tecnica ha applicazioni gamma di modelli murini di cancro alla vescica, muscolo liscio, e biologia delle cellule staminali. Per definizione, la vescica di iniezione del mouse parete facilita l'introduzione di cancro della vescica o di cellule staminali in una posizione ortotopico in modo che la loro crescita e differenziazione possono essere studiati in un contesto fisiologicamente r.......

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Disclosures

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Nessun conflitto di interessi dichiarati.

Acknowledgements

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Noi riconosciamo con gratitudine il supporto di una borsa di studio pilota del Fondo Stanford Research Pediatrica e K08DK087895-01 dal NIDDK.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Nome del reagente Azienda Numero di catalogo
Isoflurano (Aerrane) Baxter NDC 10019-773-60
29 o 30 gauge aghi Hamilton 7803-06 e 7803-07
100 microlitri siringa Hamilton 7656-01

References

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  1. Dinney, C. P., Fishbeck, R., Singh, R. K., Eve, B., Pathak, S., Brown, N., Xie, B., Fan, D., Bucana, C., Fidler, I. J., Killion, J. J. Isolation and Characterization of Metastatic Variants from Human Transitional Cell Carcinoma Passaged by Orthotopic Implantation in Athymic Nude Mice. The Journal of Urology. 154, 1532-1538 (1995).
  2. Singh, A. V., Franke, A. A., Blackburn, G. ....

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Tags

Mouse Bladder InjectionBladder Wall InjectionAbdominal IncisionCell Suspension InjectionWound Clip ClosureIsoflurane AnesthesiaSurgical Site SterilizationHistological AnalysisBladder Dome ExposureHamilton Syringe Use

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