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Conoscenza del numero esatto di cellule vitali in un dato volume di una sospensione cellulare è richiesto per molte manipolazioni di routine di coltura, come le cellule placcatura per immunocitochimica o per transfezione delle cellule. Questo protocollo descrive un metodo semplice e veloce per la differenziazione tra cellule vive e morte e quantificare la concentrazione delle cellule e il numero totale di cellule utilizzando un emocitometro. Questa procedura richiede in primo distacco delle cellule da una superficie di crescita e risospendere in media. Successivamente, le cellule sono diluiti in una soluzione di Blu tripano (idealmente ad una concentrazione che darà 20-50 cellule per quadrante) e collocato nella emocitometro. Infine, la media dei conteggi di cellule vitali in diversi quadranti selezionati in modo casuale, dividendo la media per il volume di un 1 mm 2 quadranti (0,1 mL) e moltiplicando per il fattore di diluizione fornisce il numero di cellule per l. Moltiplicando questa concentrazione di cellule per il volume totale in microlitri dà il numero totale delle cellule. Questo protocollo descrive il conteggio umano neurali staminali / precursori delle cellule (hNSPCs), ma può anche essere usato per molti altri tipi di cellule.