Un metodo di trasferimento genico per il trattamento dell'insufficienza cardiaca ischemica è descritta utilizzando un modello suino di infarto miocardico. Il nostro metodo semplice e riproducibile ci permette di valutare rapidamente l'efficacia dei trasferimenti di geni diversi, con un modo molto semplice e riproducibile.
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Articolo metodologico
Trasferimento Genico per insufficienza cardiaca ischemica in un modello preclinico
In questo articolo
Sommario
Abstract
Diverse tecnologie emergenti si stanno sviluppando per i pazienti con insufficienza cardiaca. Consolidate valutazioni precliniche sono necessari per determinare la loro efficacia e sicurezza.
La terapia genica mediante vettori virali è uno degli approcci più promettenti per il trattamento di malattie cardiache. Consegna virale di vari geni diversi modificando il gene trasportatore è incommensurabile potenziale terapeutico.
In questo video, l'intero processo di un modello animale di insufficienza cardiaca creazione seguita da trasferimento di geni è presentato con un modello suina. In primo luogo, infarto del miocardio è stato creato da occlusione della discendente anteriore sinistra prossimale delle arterie coronarie. Rimodellamento cardiaco risultati nell'insufficienza cardiaca cronica. Unico per il nostro modello è una cicatrice abbastanza grande, che rispecchia in pieno i pazienti con grave insufficienza cardiaca che richiedono una terapia aggressiva per i risultati positivi. Dopo infarto miocardico creazione e lo sviluppo di tessuto cicatriziale, una iniezione intracoronarica di virus è dimostrato con simultanea infusione di nitroglicerina. Il nostro metodo d'iniezione prevede il trasferimento di geni semplice ed efficiente con l'espressione genica migliorata. Questa combinazione di un modello di infarto del miocardio suina con consegna intracoronarica virus ha dimostrato di essere una metodologia coerente e riproducibile, che aiuta non solo a testare l'effetto di singoli geni, ma anche di confrontare l'efficacia di molti geni candidati terapeutici.
Protocollo
1. Infarto miocardico creazione
- Femmina maiali Yorkshire (20kg) da Animal Industries Biotech (Doylestown, PA) sono pre-medicati con Telazol (tiletamina / zolazepam) (8,0 mg / kg) e Buprenorfina (0,6 mg).
- Gli animali sono intubati e ventilati con ossigeno al 100%. L'anestesia generale viene mantenuta con Propofol (5-8mg/kg/hr) durante tutta la procedura.
- Il sito del femore è preparato con il 70% di alcool isopropilico seguita da iodio povidone. Una puntura percutanea fornisce l'accesso a l'arteria e per il posizionamento della guaina. Dopo l'inserimento della guaina, 3000-5000 UI di eparina viene somministrata per via endovenosa per mant....
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Discussione
Tra le varie cause di insufficienza cardiaca, ischemia è di gran lunga la più frequente in eziologia. Per superare questa grave malattia, diversi approcci terapeutici sono stati sviluppati. Attente valutazioni delle terapie sono necessarie prima di queste terapie promettenti possono essere applicate alle cliniche. Pertanto, la creazione di un modello di insufficienza cardiaca ischemica che rappresenta le condizioni cliniche dei pazienti è fondamentale per lo sviluppo di terapie insufficienza cardiaca. Il nostro modello .......
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Dichiarazioni
Tutti gli autori non hanno associazioni commerciali che potrebbero rappresentare come un conflitto di interessi in relazione con il manoscritto.
Ringraziamenti
Questo lavoro è supportato dalla Fondazione Leducq attraverso la rete Caerus (RJH), dal NIH R01 HL093183, HL088434, HL071763, HL080498, HL083156 e P20HL100396 (RJH). DL è stato sostenuto dalla Fondazione tedesca per la ricerca. Vorremmo ringraziare Lauren Leonardson per l'assistenza tecnica in questo progetto.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Telazol | Fort Dodge Animal Health | 0856-9050-49 | |
| Propofol | APP Pharmaceuticals | 63323-270-20 | |
| Eparina | APP Pharmaceuticals | 63323-540-11 | |
| Amiodarone | APP Pharmaceuticals | 63323-616-03 | |
| Solfato di atropina | Med-Pharmex | 54925-063-10 | |
| Acetato di potassio | American Regent Inc. | 2053-25 | |
| Nitroglicerina | American Regent Inc. | 4810-25 | |
| Salix (Furosemide) | Intervet Inc. | 710461 | |
| Catetere da 5 Fr a forma di hockey | Cordis | 556-278-0L | |
| Catetere da 7 Fr a forma di hockey | Cordis | 778-278-00 | |
| Filo guida coronarico | Abbott Laboratories | 1044588 | |
| Palloncino coronarico | Abbott Laboratories | 1009447-08 | |
| Sheath da 8 Fr | Terumo Medical Corp. | RSS801 |
Riferimenti
- Perez de Prado, A. Closed-chest experimental porcine model of acute myocardial infarction-reperfusion. J Pharmacol Toxicol Methods. 60, 301-306 (2009).
- Angeli, F. S. Left ventricular remodeling after myocardi....
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Ristampe e permessi
