Targeting di nanoparticelle funzionalizzate del cancro ovarico: una tecnica per facilitare l'assorbimento dell'agente di contrasto di nanoparticelle coniugato con acido folico da parte delle cellule di cancro ovarico

Abstract

Fonte: Lusk, J. F. et al. Rilevamento del cancro ovarico utilizzando la citometria a flusso fotoacustica. J. Vis. Exp. (2020)

In questo video, dimostriamo una tecnica per facilitare l'internalizzazione delle nanoparticelle di solfuro di rame ricoperte di acido folico (NP CuS). Le NP di CuS funzionalizzate con acido folico hanno la capacità di colpire i recettori dei folati che sono sovraespressi in molte cellule di cancro ovarico.

Protocollo

1. Sintesi e funzionalizzazione di nanoparticelle

ATTENZIONE: Tutta la sintesi dovrebbe avvenire in una cappa chimica ventilata.

1. Prima della sintesi, filtrare circa 300 ml di acqua deionizzata (DI) attraverso un filtro sterile da 0,2 μm.
2. Pulire un pallone di vetro a fondo tondo da 250 ml con una soluzione detergente e risciacquare con acqua deionizzata. Aggiungere 0,0134 g di CuCl₂ in 100 mL di acqua deionizzata per creare una soluzione da 1 mM.
3. Aggiungere 0,015 g di acido folico (FA) alla soluzione di CuCl₂ e mescolare per ~5 minuti utilizzando un'ancoretta magnetica.

Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo

Nome	Azienda	Numero di catalogo	Commenti
0,025% tripsina con EDTA	Corning	25-053-CL
Filtri centrifughi Amicon Ultra-15	Millipore	UFC903024
Filtri centrifughi Amicon Ultra-4	Millipore	UFC803024
Ematocitometro Bright-Line	Hausser Scientific	Anno 1492
Cloruro di rame (II)	ACROS ORGANICS	206532500
Bagno di pulizia digitale ad ultrasuoni serie CPX	Fisherbrand	Modello CPX3800
Siringhe Norm-Ject da 10 ml	HENKE SASS LUPO	4100-X00V0
FBS	Sigma-Aldrich	F2442-500ML
acido folico	Sigma-Aldrich	F7876-10G
Pbs	Alfa Aesar	J62036
Penicillina Streptomicina	GIBCO	Codice: 15140-122
RPMI Midum 1640 (1x) Senza acido folico	Gibco	Codice 27016-021
Celle SKOV-3	ATCC	HTB-77
Perle di idrossido di sodio	BDH	BDH9292-500G
Solfuro di sodio nonaidrato	Sigma-Aldrich	Codice 431648-50G
Soluzione di Trypan Blue 0,4%	Amresco	K940-100ML
Filtro per siringa sterile da 0,2 μm	VWR	Codice 28145-477
Alconox	Sigma-Aldrich	242985-1.8KG	Detergente utilizzato per la pulizia della vetreria.
Interpolazione 20	Sigma-Aldrich	P7949-100ML